微生物棉签擦拭取样方法验证

第 1 页 共12页

文件名称 棉签擦拭取样方法验证方案 文件编码 VP-JF·00·55 00-00 方 案 批 准 方案起草 QC室

报告审核 质量保证部 质量保证部 设备工程部 人力资源部

方案批准 质量受权人 签 名 日 期 年 月 日 签 名 日 期 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 签 名 日 期 年 月 日 验证小组人员名单 组 长 姓名 职务 成 员 姓名 职务 部门

部门 VP-JF·00·55 00-00

棉签擦拭取样方法验证方案

第 2 页 共12页

目 录

1 概述 ................................................................................................................................................. 3 2 验证目的 .........

第 1 页 共12页

文件名称 棉签擦拭取样方法验证方案 文件编码 VP-JF·00·55 00-00 方 案 批 准 方案起草 QC室

报告审核 质量保证部 质量保证部 设备工程部 人力资源部

方案批准 质量受权人 签 名 日 期 年 月 日 签 名 日 期 年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 签 名 日 期 年 月 日 验证小组人员名单 组 长 姓名 职务 成 员 姓名 职务 部门

部门 VP-JF·00·55 00-00

棉签擦拭取样方法验证方案

第 2 页 共12页

目 录

1 概述 ................................................................................................................................................. 3 2 验证目的 .........

手、设备表面微生物取样方法

一、携带物品：

酒精灯、75%酒精棉球若干、不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水、一次性手套。 备注：不锈钢剪、镊子、棉签、10ml生理盐水须经高温蒸汽灭菌；10ml生理盐水根据实际所需准备多支；一次性手套需经辐照灭菌；

二、操作方法： 1、手取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹车间人员手正背面，反复两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

2、设备表面取样

点燃酒精灯，取样人员戴上一次性手套，用棉签蘸取少许无菌生理盐水涂抹设备平滑表面（面积自己预先估计一个大概数值，25、50或100cm2等），反复涂抹两次，在涂抹时要转动棉签，使各部位能均匀。完成后用不锈钢剪剪去取样人员手持部段，然后将棉签投入10ml生理盐水中，盖上试管盖。

三、细菌及大肠菌群的培养（具体操作时以GB4789.2-2010和GB4789.3-2003为准）

样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇。配成1：10样液。根据污染情况，进行十倍递增稀释，吸取1ml 的1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1

药品微生物限度检查及方法验证

从事药品微生物限度检查工作两年时间，从学做到承担工作到变得有点经验，经历了一个摸索、学习和积累的过程，回过头来做一个总结，把一些零散的经验和体会做一个梳理和归整，以供在此岗位工作的同仁参考。

第一部分：外围工作

外围工作主要有器皿清洗、灭菌，培养基、试剂配制及灭菌，无菌室清洁消毒等。 器皿的清洗是每个实验室和每一个实验员必须要做的最起码的工作，工作要求简单，操作方便，把握一个原则：干净。

培养基、试剂配制后一般都要求调PH到7.20，因为高温灭菌之后PH值会下降0.2左右。固体培养基在灭菌前要先加热煮沸，使琼脂均匀分散。煮沸时要注意不要溢出容器，以免发生烫伤。万一不小心溢出，可用一湿抹布盖住容器口，迅速将其从加热源上移开，不要在情急之下徒手去拿或者在容器侧面拿，那样容易被从容器口源源不断溢出的培养基烫伤。液体物品灭菌后，不能立即打开放气阀放气，因为此时被灭菌物品的温度大于100℃，在压力等于常压时，液体会暴沸，造成液体喷出或容器炸裂，发生事故。

万级洁净度的无菌室应当每周进行一次消毒，消毒剂每月更换一次，防止长期使用同一种消毒剂而使微生物形成耐药性。消毒范围包括墙壁，地面，天花板以及空气。表面消毒可以用消毒剂擦拭

微生物限度检查方法（平皿法）

验证方案

目 录

一、 验证方案的制定

二、 验证方案的起草与审批

三、微生物限度检查方法（平皿法）验证方案

1．验证目的和原理

2．验证方法步骤

3．试验实施

3.1试验前的准备

3.2验证试验操作

3.3试验结果

4．验证结果评价分析

第 1 页 共 14 页

5．附件

微生物限度检查方法（平皿法）验证文件

一、 验证方案的制定 验证项目名称 编号 验证小组组员 成员职务 组长 副组长 组员 姓名 步骤 验证方案组织实施进度 二、 验证方案的起草与审批 1验证方案的起草 验证项目名称 编号 微生物限度检查方法（平皿法）验证 VF-PR-17-A 第 2 页 共 14 页 主要工作职责 方案设计责任人 方案实施负责人 操作人 操作人 操作人 操作人 实施日期 微生物限度检查方法（平皿法）验证 VF-PR-17-A

微生物限度/无菌方法学验证流程

1.：提交单位购买申请菌种的购买：需要1.5个月

单位介绍信证明工作用途等文件，并向中检院网站提交申请，接到申请后一个月后中检院会把有

的菌种邮寄到使用单位，中检院菌种经常缺货并不是很齐全，不能一次买齐所需要的8种菌一次性买齐，

2. 每种从菌复活、分离、纯化复壮：共需要30天

药典规定进行药品检验所需8种标准阳性菌，购买中检院冻干菌粉后进行复活与保藏

1大肠埃希菌 2金黄色葡萄球菌 3枯草芽孢杆菌 4生孢梭菌 5铜绿假单胞菌 6沙门菌

（细菌每种冻干菌粉复活到分离纯化保藏各需要3-4天时间） 7白色念珠菌 8黑曲霉菌

（霉菌酵母菌冻干菌粉从复活到分离纯化制备孢子菌悬液需要至少7天时间）

3.培养基适用性/灵敏度验证：需要60-80天

实验中使用的培养基需要进行与中检院提供的标准培养基进行培养基适用性验证 每种培养基不同批号之间也需要进行验证之后方可以进行微生物检验用

药检室现有培养基种类20余种，每种培养基验证需要3-4天，完成所有培养基适用性验证需要60-80天。

恩替卡韦分散片微生物限度方法学适用性验证：

1. 回收率验证：回收率验证实验共需要26天

（若回收率达不

微生物限度/无菌方法学验证流程

1.：提交单位购买申请菌种的购买：需要1.5个月

单位介绍信证明工作用途等文件，并向中检院网站提交申请，接到申请后一个月后中检院会把有

的菌种邮寄到使用单位，中检院菌种经常缺货并不是很齐全，不能一次买齐所需要的8种菌一次性买齐，

2. 每种从菌复活、分离、纯化复壮：共需要30天

药典规定进行药品检验所需8种标准阳性菌，购买中检院冻干菌粉后进行复活与保藏

1大肠埃希菌 2金黄色葡萄球菌 3枯草芽孢杆菌 4生孢梭菌 5铜绿假单胞菌 6沙门菌

（细菌每种冻干菌粉复活到分离纯化保藏各需要3-4天时间） 7白色念珠菌 8黑曲霉菌

（霉菌酵母菌冻干菌粉从复活到分离纯化制备孢子菌悬液需要至少7天时间）

3.培养基适用性/灵敏度验证：需要60-80天

实验中使用的培养基需要进行与中检院提供的标准培养基进行培养基适用性验证 每种培养基不同批号之间也需要进行验证之后方可以进行微生物检验用

药检室现有培养基种类20余种，每种培养基验证需要3-4天，完成所有培养基适用性验证需要60-80天。

恩替卡韦分散片微生物限度方法学适用性验证：

1. 回收率验证：回收率验证实验共需要26天

（若回收率达不

标 题 文件编码 生效日期 页 码 颁发部门 质量部 棉签擦拭取样法标准操作规程 SOP-JF-016A 第 1页共 3页 制定人 审核人 批准人 日期 日期 日期 分发部门 质量部

一、目的：建立棉签擦拭取样法标准操作规程，规范清洁验证的取样。 二、范围：清洁验证的取样方法-棉签擦拭取样法。 三、职责：清洁验证取样员对本规程的实施负责。 四、内容 1 概述

制药企业生产设备、生产场所、用具等清洁，需进行清洁验证，对于直接口服中药饮片的生产设备的清洁后残留物限度需经验证，以证明该清洁操作规程能持续有效的清洁效果。残留物限度的取样方法有两种：一是最终淋洗水取样，二是擦拭取样。擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，可通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况，但擦拭取样法具有重现性差，受主观因素影响大等缺点，因此需对擦拭取样进行取样方法回收率验证。 2 取样工具

2.1 取样工具应不得干扰取样结果，一般选用无菌取样棉签，其材料组成为聚酯纤维无尘布和聚丙烯杆，取样棉签应从合格供应商目录中的供应商购买，其外观见下图

2.2 取样棉签使用前用密封的洁净PE袋装好保存。

2.3 取样使用时，应将棉签放在清

标 题 文件编码 生效日期 页 码 颁发部门 质量部 棉签擦拭取样法标准操作规程 SOP-JF-016A 第 1页共 3页 制定人 审核人 批准人 日期 日期 日期 分发部门 质量部

一、目的：建立棉签擦拭取样法标准操作规程，规范清洁验证的取样。 二、范围：清洁验证的取样方法-棉签擦拭取样法。 三、职责：清洁验证取样员对本规程的实施负责。 四、内容 1 概述

制药企业生产设备、生产场所、用具等清洁，需进行清洁验证，对于直接口服中药饮片的生产设备的清洁后残留物限度需经验证，以证明该清洁操作规程能持续有效的清洁效果。残留物限度的取样方法有两种：一是最终淋洗水取样，二是擦拭取样。擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，可通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况，但擦拭取样法具有重现性差，受主观因素影响大等缺点，因此需对擦拭取样进行取样方法回收率验证。 2 取样工具

2.1 取样工具应不得干扰取样结果，一般选用无菌取样棉签，其材料组成为聚酯纤维无尘布和聚丙烯杆，取样棉签应从合格供应商目录中的供应商购买，其外观见下图

2.2 取样棉签使用前用密封的洁净PE袋装好保存。

2.3 取样使用时，应将棉签放在清

论 著2013年7月

儿科护士由于担心固定不牢导致针头脱出，因而会下意识将绷带缠的较紧，在连续两到三天经留置针静脉输液后，在留置针尾端肝素帽和针体侧翼紧挨皮肤的位置，由于长时间低压力的原因，加上穿刺肢体由于留置有针头活动减少或不动，静脉回流轻微受阻，会在尾端压在皮肤位置形成皮肤压痕，如果局部有轻微的外渗，容易形成压疮，使用裁剪后绷带固定时由于在皮肤和留置针之间有一层带弹性透气的自粘绷带缓冲保护皮肤，上下两条根据不同直径固定压力有区别，没有固定过度，减少皮肤损伤，有效地减少减少皮肤形成压痕的机会，因此观察组皮肤压痕只有2例，对照组有18例，观察有明显差异。

3.3 提高护士工作效率

美国输液学会将静脉留置针留置时间规定为不超过96小时 ,中国中华护理学会输液治疗护理实践指南中指出儿童外周静脉留置针在没有并发症的去情况下可一直保留到治疗结束[5]。留置针固定的尾端使用裁剪后的自粘绷带后,尾端反折的现象不再出现，延长了留置时间,减少了重新穿刺的次数,而且由于自粘绷带的保护,无菌敷贴更换的次数减少,减轻了护士的工作量，有效提高儿科门急诊护士工作效率。

3.4 减少家长居家照顾的担心

门急诊使用留置针，治疗结束后要在家里护理留置针，影响家长门诊使用留置针的主