花色苷含量测定与计算方法

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

摘 要

论文题目：牡丹花色与花色苷的研究

摘 要

牡丹为我国著名花卉，被称为“万花一品”、“冠绝群芳”的“花王”。花色是牡丹重要的观赏性状，花色素则是牡丹花色形成的物质基础，又因多种生理活性而具有潜在的应用价值。本文主要研究了中原牡丹品种群的花色、花色苷及二者的相关性，确定了大孔吸附树脂法纯化牡丹花色苷的工艺条件，测定了牡丹花提取液与花色苷的抗氧化活性。具体研究内容及结果如下：

1．利用色差仪按国际照明委员会（International Commission on Illumination，CIE）表色系统对94个中原牡丹品种的花色进行测定，并在此基础上，通过CLUSTER过程将花色三刺激值（明度L*、 色相a* 和b*）采用Ward离差平方和法进行了聚类分析。结果表明：94个中原牡丹品种花色在CIE表色系统坐标系上的分布广泛，聚类分析将其分为9个色系：白（20种）、绿（1种）、浅粉（8种）、粉红（13种）、粉蓝（12种）、红（14种）、紫（11种）、红紫（7种）、红黑（8种），不同色系牡丹的L*、 a* 和b*值特征明显。白、浅粉、粉红和红色系以及粉蓝、紫和红紫色系的L*与a*、L*与彩度（C*）均表现出显著的负相关性（L*与a*的相关

简要介绍了常见肥料中氮磷钾的含量,及其计算方法。

常见肥料的有效含量及计算方法

通常情况是，肥料中氮磷钾的含量指N，P2O5，K2O的含量。 N的原子量为14；P2O5的原子量为31*2+16*5=142；K2O的原子量为39*2+16=94；

1）. 尿素 化学式为(NH2）2CO，原子量为16*2+12+16=60； 含氮量为46%（14*2/60*100%=46.7%）。

2）. 磷酸氢二铵，俗称二铵，化学式为(NH4）2HPO4，原子量为18*2+1+31+16*4=132；

含N量为21.2%（14*2/132*100%=21.2%）； 含P2O5量为53.8% （142/2=71，71/132*100%=53.8%）； 一等品二铵的氮磷含量为16-48-0。

3）. 氯化钾，化学式为KCl，原子量为39+35.5=74.5， 含K2O量为63% （94/2=47,47/74.5*100%=63%）； 氯化钾的含K2O量要求≥60%。

4）. 硫酸钾，化学式为K2SO4，原子量为39*2+32+64=174， 含K2O量为54% （94/174*100%=54%）。

5）. 硝酸钾，化学式为KNO3，原子量为39+14+48=101， 含氮量为14

实验目的

作为实践性非常强的课程，安排上机实验的目的，不仅是为了验证教材和授课内容，更重要的是，要通过实验深入理解方法的设计原理与处理问题的技巧，培养自行处理常规数值计算问题的能力和综合运用知识分析、解决问题的能力。

1、通过上机实验加深课堂内容的理解。

数值分析的主要任务就是研究适合于在计算机上使用的数值计算方法及与此相关的理论。通过编程上机，就可以加深对方法运行过程的理解，同时在编程中领会和理解数值计算方法的计算要领和步骤，体会问题的条件和限制范围，理解一般问题和特殊问题的区别。

2、学会对数值计算结果的分析和处理。

数值分析实验不只是编写程序得到一个数值结果，我们应在掌握数值计算计算方法的基本原理和思想的同时，注意方法处理的技巧及其与计算机的密切结合，重视误差分析、收敛性及稳定性的讨论。此外，还要注意算法能否在计算机上实现，应避免因数值方法选用不当、程序设计不合理而导致超过计算机的存储能力，或导致计算结果精度不高等。

3、要能灵活掌握各种数值计算方法。

由于针对同一个问题可以选用不同的数值计算方法，我们要注意各种方法的使用条件。通过上机，比较各种方法间的异同及优缺点，以便更好的使用不同的方法来解决实际问题，使计算机成为我们最好的工具。

时珍国医国药２００７年第１８卷第８期

ＩＪＩｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤＩｃｌＮＥＡＮＤ

ＭＡＴＥＲｎＭＥＤＩｃＡＲＥＳＥＡＲｃＨ２０ｃｒ７ＶｏＬ．１８

Ｎｏ．８‘

多糖含量测定方法比较

钟方晓１，任海华２，李岩１

（１．山东省中医药研究院，山东济南２５００１４；２．山东省肿瘤医院，山东济南２５０１１７）

摘要：目的探讨中药多糖含量测定方法酶可行性及稳定性。方法对测定多糖常用对照品葡萄糖、鼠李糖、半乳糖，参

考文献方法，分别采用硫酸一苯酚法、硫酸一蒽酮法比较显色反应后吸收曲线的稳定性。结果不同单糖对照品显色反

应后最大吸收波长不同，其中硫酸一苯酚法显色反应后稳定性较好，硫酸一蒽酮法稳定性较差。结论硫酸一苯酚法为

较理想的多糖含量测定方法。

关键词：多糖；硫酸一苯酚法；硫酸一蒽酮法．中图分类号：Ｒ２８４．２

文献标识码：Ａ

文章编号：１００８电８０５（２００７）０８－１９１６旬１

ｏｆ

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ｎｏｓ

天然产物

一些天然产物的含量测定方法

成分名称 提取方法 流动相 检测波长(纳米) 流速 柱温

丹参酮IIA 甲醇回流 甲醇-水(75:25/73：27) 270 1 室温

丹酚酸B 75%乙醇回流 甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59) 286 1 室温

丹参素 水,超声/乙醇-水超声/盐酸(1->10)50毫升,超30分钟,冷,补足,氯化钠5克,取上清液25毫升,乙乙提取4次,合并,干,50%甲醇溶,定10毫升./50%甲醇超提 甲醇-水-乙酸(8:91:1)/乙腈-水-磷酸(2:60:0.5)/乙腈-水-乙酸(9:90:1)/甲醇-二甲基甲酰胺-水-乙酸(4:4:90:2/2:95:2:1)/甲醇-0.4%乙酸(5:95)/甲醇-1%乙酸(8:92)/乙腈-甲醇-水-冰醋酸（0.5：8：92：1） 280 1 室温

天然产物

362页后

《欧洲药典》中蛋白含量的测定方法

1. 《欧洲药典》第7版2.5.33，USP<1057>Biotechnology-derived articles-Total protein assay。

EP2.5.33收录了7种检测方法，即扫描法、Lowry 法、Bradford 法、BCA法、Biuret 法、荧光法和氮分析法。 1.1 扫描法：

原理：依据蛋白质结构中含有芳香族氨基酸（如酪氨酸、色氨酸），其在280nm处有吸光值。检测时，如果溶解蛋白质的溶剂也有高吸光度，则采用干扰对照液进行补偿消除。但如果干扰对照液吸光值也很高，则检测结果误差大。此外，低浓度蛋白质溶液会因蛋白质吸附至检测池上而影响浓度，后者可使用高浓度或用去离子去污剂处理样品。 待测品：蛋白质溶液浓度一般为0.2mg/mL~2 mg/mL。

对照品：选择合适的对照品，用溶解待测品蛋白质的溶剂配制，浓度与待测品溶液一致。 检测：检测过程中，将待测蛋白溶液、对照品溶液和干扰对照液保持在相同温度。使用石英比色皿检测280nm处吸光值，并使用规定的溶液进行补偿。溶液浓度应尽可能保持在适宜范围内以便获取准确结果。

光散射影响：样品引起的光散射会导致蛋白质检测结果准确度降低。如果蛋白质溶液中存

清洁验证残留限度的计算

根据GMP实施指南和相关要求，我们控制原料药（乙酰螺旋霉素）残留限度的计算依据如下：

计算方法：10ppm法、日剂量的千分之一、下批批量的0.1%（基于低毒性原料的杂质限度标准）

1、10ppm法：乙酰螺旋霉素批量为260kg，因残留物浓度最高为10*10-6，即10mg/kg，则残留物总量最大为：260*10*10-6=2600mg。则设备内表面残留物允许的限度为：

2600g?1000?100cm2?10%（保险系数）?70%（取样回收率） 残留限量A? 289.7m?10000＝20.31㎎/100㎝2

残留限度定为：20.31㎎/100㎝2/25ml=0.8124mg/ml

2、日剂量的千分之一：由于原料药生产清洁后用于生产药用辅料（醋酸钠），其为无活性物质，因此暂无法用此公式计算。

3、下批批量的0.1%（基于低毒性原料的杂质限度标准）

原料药（乙酰螺旋霉素）的最小批产量为260㎏，下批批量的0.1%，则乙酰螺旋霉素最大残留物为260g。

擦拭测试：擦拭面积以10㎝×10㎝的区域计 残留限量A?260g?1000?100cm2?10%（保险系数）?70%（取样回收率） 289.7m?10

吸附树脂在中药产业化生产中已有广泛应用!吸附树脂柱在使用一定周期后!需要再生处理!可以去除树脂柱上堆积的杂质!使得树脂柱保持正常工作流速"存放后需重新使用的树脂柱!也

应再生处理"生产中常用的处理方法为碱水#

酸水#盐酸乙醇洗涤!水冲洗至中性即可"

本实验研究利用淫羊藿总黄酮$%&%

大孔吸附树脂上吸附#洗脱#再生过程!考察树脂再生后提取物残留量和再生后吸附容量的变化!作为吸附树脂再生效果的评价指标"

在本实验的操作条件下!得出如下结论’再生后吸附树脂柱上淫羊藿总黄酮的残留量为该产物再生前吸附洗脱平均收得率

的&()*!再生后树脂的吸附容量为+,(-&./0.12%

!与前%&批树

脂平均吸附容量+-(34./0.1

2%

相比较!变化不大"本实验研究的结论为’$%&%大孔吸附树脂可连续多批次地用于淫羊藿总黄酮的提取分离!从上述结论可以认为!再生后树脂柱上有淫羊藿总黄酮残留!再生后吸附容量变化不大!但可通过

改善吸附洗脱过程的流动性提高工作效率"

以上实验提供的数据和结论!可作为吸附树脂法工艺流程设计中再生效果评价的参考依据!但是完整的工艺流程设计尚需考虑多种因素"

参考文献’

5%6胡军!周跃华(大孔吸附树脂在中药成分精制纯化中的应用57

6(中成药!+&&+!+,8+