百合组织培养实验报告

组培经典3

78湖北农业科学　HUBEI　AGRICULTURAL　SCIENCES　No11,2004

文章编号:0439-8114(2004)01-0078-05

百合的组织培养技术综述

蒋细旺1,司怀军2

(11江汉大学医学与生命科学学院,湖北武汉　430056;21甘肃农业大学农学院,甘肃兰州　730070)

摘要:对20世纪90年代以后的百合组织培养技术进行了综述,包括百合外植体的准备、百合的快速繁殖技术等。还对百合种质资源离体保存和百合的组织培养技术在百合育种中的应用作了论述。关键词:百合;组织培养;育种

中图分类号:S68211;Q94311;Q81311+2　　　　文献标识码:A

　　百合(Lilium.spp)是全世界著名的观赏花卉之

一。中国是世界百合种质资源的分布中心,约有47个种、18个变种,占世界百合属总数的一半以上。其中36个种、15个变种是我国特有的珍稀种类[1]。百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。但由于人类、非人类的影响,使一些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到严重威胁球、分珠芽鳞片扦插、繁殖,,常造成种性退化,,量。,能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生育周期

植物组织培养实验报告

实验小组成员：

姓名 班级

2013 年4 月 20 日

绿豆的植物组织培养

学号

一、实验目的

1．通过诱导绿豆根、茎、芽形成愈伤组织，学习愈伤组织的建立方法。

2．熟悉植物组织培养各阶段的过程，初步掌握无菌操作的植物组织培养方法。

3．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。 二、实验原理

1. 植物细胞的全能性：

一切植物，都是由细胞构成的，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植株的潜能。 2. 植物组织培养技术：

把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。 3. 组织的分化与器官建成 外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。 4. 培养基的组成

培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。营养培养基一般由无机营养、碳源和能源

组培经典3

78湖北农业科学　HUBEI　AGRICULTURAL　SCIENCES　No11,2004

文章编号:0439-8114(2004)01-0078-05

百合的组织培养技术综述

蒋细旺1,司怀军2

(11江汉大学医学与生命科学学院,湖北武汉　430056;21甘肃农业大学农学院,甘肃兰州　730070)

摘要:对20世纪90年代以后的百合组织培养技术进行了综述,包括百合外植体的准备、百合的快速繁殖技术等。还对百合种质资源离体保存和百合的组织培养技术在百合育种中的应用作了论述。关键词:百合;组织培养;育种

中图分类号:S68211;Q94311;Q81311+2　　　　文献标识码:A

　　百合(Lilium.spp)是全世界著名的观赏花卉之

一。中国是世界百合种质资源的分布中心,约有47个种、18个变种,占世界百合属总数的一半以上。其中36个种、15个变种是我国特有的珍稀种类[1]。百合除具有观赏价值外,大多数可以食用、药用,是上等的滋补佳品。但由于人类、非人类的影响,使一些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到严重威胁球、分珠芽鳞片扦插、繁殖,,常造成种性退化,,量。,能够迅速去除病毒和更新品种,加快了百合的快速繁殖速度,缩短了百合的生育周期

实验一 植物组织培养实验的准备 （一）、实验室的设计与布局

1、目的要求

通过认知实习，了解植物组织培养实验室的布局，掌握植物组织培养的程序，同时熟悉组织培养中涉及的各种仪器设备和器皿用具。 2、仪器与用具

超净工作台、蒸馏水发生器或纯水发生器、高压灭菌器、普通冰箱、微波炉、煤气灶或电炉、显微镜、万分之一（或千分之一）电子天平、恒温箱、烘箱、各种培养器皿、分注器、各种实验器皿和各种器械用具。 3、方法步骤

1．结合所学理论知识，学习组织培养实验室守则及有关注意事项。 2．了解植物组织培养的具体流程。

3．了解组培实验室的构建情况，包括准备室、缓冲室、无菌操作室（又称接种室）和培养室的设计要求。

4．了解仪器设备的名称、用途及使用方法。

5．了解实验室中培养材料的一些常用参数，如培养间的温度、光照时数、光照度等。 4、作业

1．植物组织培养实验室一般由几部分构成？各个部分的功能主要有哪些？植物组织培养常用的设备有哪些？

2．每人设计一个植物组织培养实验室的组建方案。

（二）、培养器皿的洗涤

1、目的要求

了解各种洗涤液的特性，掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器皿的洗涤技术。 2、基本原理

由于组织培养过程中器皿的重复利用，特别是培养基中有机

植物组织培养实验指导

2012.3

附录 培养基母液的配制

一、实验目的：掌握培养基母液配制的方法。

二、实验原理：配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即将所选培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存，使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。以MS培养基为例，所需配制的母液可分为：MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外，还要配制生长物质母液，在不同类型的培养基中使用。 三、实验器具与药品：

电子分析天平、托盘天平、烧杯（50ml, 100ml, 500ml, 1000ml）、量筒（1000ml,100ml, 25ml）、容量瓶（1000ml,500ml,100ml）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。

配制MS培养基所需药品按培养基的配方准备。植物生长调节物质，2,4-D, NAA, 6-BA等。

四、培养基母液的配制过程

首先，按下表“MS培养基母液的配制”，将各种母液根据各自的扩大倍数，计算出扩大后的称取量，然后，分别进行药品称取和母液配制。 母液种类 成分 规定用扩大 称取量母液定配1LMS量ml/L 倍数 m

T

植物细胞组织培养技术

实验指导书

中国计量学院生命科学学院

二零零六年七月

《植物细胞组织培养》实验指导

目 录

实验一、植物组织培养培养基母液的配制 实验二、植物组织培养的培养基配制 实验三、康乃馨的离体快繁 实验四、胡萝卜愈伤组织的建立 实验五、组织培养物的继代培养

1

实验一 组织培养基母液的配制

一、 仪器及药品

冰箱、天平（0.0001g）

容量瓶: 1000 ml, 500 ml、250 ml、100 ml、25 ml 广口储液瓶：500 ml、250 ml、50 ml、25 ml 烧杯：1000 ml 、500 ml 、250 ml、100 ml 、50 ml 数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺或挖耳勺

标签纸、胶水、50%酒精、95%酒精、1 mol/L盐酸、1 mol/L NaOH 几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等药品 蒸馏水

二、方法和步骤：

按照培养基配方,把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素分类,每一类中各种药品分别称量,如N6培养基各种母液的配制步骤如下：

大量元素母液：包括用量较大的几种化合物〈见N6培养基配方〉，按表中排列顺序,将每种药品的用

篇一：植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告

一、实验目的

1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；

2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法； 3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法；

4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织 学习愈伤组织的建立方法； 5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理 （一）植物组织培养

植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。 （二）植物细胞的全能性

植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。 （三）组织的分化与器官建成

外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细

[目的]采用组织培养的方法对宜兴百合(Lilium lancifoium Thumb)进行扩大繁殖研究。[方法]以宜兴百合鳞茎为外植体,在其不同的组织培养阶段采用不同的激素配比,观察培养效果,以建立宜兴百合的组培快繁体系。[结果]宜兴百合鳞茎不定芽诱导的最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,继代培养的最佳培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,生根培养的最佳培养基为1/2MS+0.

安徽农业科学，ora o A h i g .Si2 1 4 (0)5 4 5 5 Junl f n u A n c.0 2,0 1:7 8— 7 0

责任编辑

朱琼琼

责任校对

卢瑶

宜兴百合组培快繁技术的研究潘理云，海洋 (州范院命学院浙湖 30)张 湖师学生科学，江州 10 30摘要[目的]采用组织培养的方法对宜兴百合( i m l co m T u b进行扩大繁殖研究。[法] L i nii hm ) l a fu u方以宜兴百合鳞茎为外植体，在其不同的组织培养阶段采用不同的激素配比，察培养效果，观以建立宜兴百合的组培快繁体系。[果]结宜兴百合鳞茎不定芽诱导的最佳培养基为 M 30m/ -A+ . m/

脱分化 外植体 继代培养 植物细胞全能型 种质 褐变 人工种子 器官培养 .胚胎培养 植物组织培养． 灭菌： 驯化

愈伤组织培养： 玻璃化现象 无病毒苗． 胚状体． 愈伤组织． 消毒

植物生长调节物质 接种 细胞悬浮培养 脱毒苗

褐化． 再分化．

1 植物组培对象分为 ， ， ,细胞培养，原生质体培养几种类型。 2 培养基中有机态氮素营养主要是 和 MS

3 种质保存的方式有 ， ， 。 4在组织培养中，不耐热对的用 法灭菌，耐热的培养基用 法灭菌 5幼胚培养的三种常见方式是 ， ， 。

6 去除植物病毒的主要方法是 ， ， 。 7 愈伤组织的形成大志经历 ， ， 三个时期 8植物组培过程中，最常用的培养基是

《植物组织培养实验指导》

1

《植物组织培养实验指导》的相关说明

一、本指导用于《植物组织培养概论》课程的实验教学。 二、各专业班级根据实际情况做相应调整，调整情况详见各专业班级的授课计划。其中15个课时的内容调整如下： 实验一、二、五 3学时 实验六 3学时 实验七 3学时 实验九、实验十二 3学时 实验十三 3学时

2

实验一 实验室基本设备及其用途的识别

一、

目的

认识植物组织培养实验室的基本结构，必须的基本设备及其用途与作用方法。 二、

实验室的基本结构

（一） 化学实验室（工作室）培养基药品称量、配制、分装、灭菌；材料预处理；培养材料的观察分析；制蒸馏水。

设备、药柜、工作台、蒸馏水器、天平、冰箱，手提高压消毒锅、显微镜、解剖镜、各种玻璃仪器、金属仪器等。

安装水、电、排气等装置。 （二）接种室 ①无菌操作室 ②接种箱 ③超净工作台 （三）培养室

（四）洗涤、消毒室；卧式高压消毒锅。 （