微生物的接种与培养

实验七 微生物的接种与培养

一、实验教学目的与要求

目的：1、掌握各种微生物接种的基本操作技术。

内容：1、斜面接种。

2、液体接种。

3、穿刺接种。

4、平板接种。

二、实验原理

将有菌的材料或纯粹的菌种转移到另一无菌的培养基上，这个过程就称为接种。

三、实验材料及用具

1.仪器及用具

斜面培养基、液体培养基、平板培养基、记号笔、酒精灯、接种针、消毒酒精、涂布棒。

四、操作步骤

（一）斜面接种：

从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好气性微生物的接种。 左手持菌种管和斜面管，使斜面向上，并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动，再拿接种环，用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧，同时将管口在火焰上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部，沿斜面划曲线或直线。

图1. 斜面接种示意图

（二）液体接种：

由斜面菌接种到液体培养基（如试管或三角瓶等）中的方法。 操作与上法基本一致，只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀，即可培养。 如果菌种是培养在液体培养基中时，一般用移液管或滴管接种。

（三）穿刺接种：

用接种针挑取菌种后，插入深层固体培养基内，（不要刺到底部），再沿

本科毕业论文

BACHELOR DISSERTATION

论文题目： 甲醇降解微生物的筛选与培养 学位类别： 工学学士 学科专业： 生物工程 作者姓名： 作者学号： 导师姓名： 完成时间：

生物工程专业毕业论文

目录

目录 ................................................................................................................................... I 摘要 ................

孟加拉红培养基

用途:用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定。 成分(g/L) 蛋白胨 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 琼脂 20.0 孟加拉红 0.033 氯霉素 0.1 用法

称取本品 36.6g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15 分钟备用。

蒙金娜基础培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 3g, KCl 0.3g，FeSO4 7H2O 0.03g，MnSO4 H2O 0.03g，MgSO4 7H2O 0.3g，CaCO3 5g，酵母膏 0.4g，蒸馏水1000ml，pH7.0~7.5。灭菌前分装为10×100ml小瓶，每组1瓶。 1. 无机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入1g磷矿粉（或磷酸钙2g作为无机磷源）和2g琼脂粉，包装，灭菌。 2. 有机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入2g琼脂粉，包装，灭菌。 用酒精擦净新鲜鸡蛋外壳，用解剖刀切破鸡蛋两端，流去蛋清后将蛋黄流

孟加拉红培养基

用途:用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定。 成分(g/L) 蛋白胨 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 琼脂 20.0 孟加拉红 0.033 氯霉素 0.1 用法

称取本品 36.6g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15 分钟备用。

蒙金娜基础培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 3g, KCl 0.3g，FeSO4 7H2O 0.03g，MnSO4 H2O 0.03g，MgSO4 7H2O 0.3g，CaCO3 5g，酵母膏 0.4g，蒸馏水1000ml，pH7.0~7.5。灭菌前分装为10×100ml小瓶，每组1瓶。 1. 无机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入1g磷矿粉（或磷酸钙2g作为无机磷源）和2g琼脂粉，包装，灭菌。 2. 有机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入2g琼脂粉，包装，灭菌。 用酒精擦净新鲜鸡蛋外壳，用解剖刀切破鸡蛋两端，流去蛋清后将蛋黄流

生物技术进展

■■■

难培养微生物培养方法的研究进展

曾建民,　曾振顺,　原红娟,　谭志远

华南农业大学农学院,广州510642

摘　要:利用环境样品16SrRNA克隆测序等许多非培养(culture-independent)研究表明,自然界存在许多独特而难培养未培养的微生物,如何开发更多的微生物资源成为当前重要的课题,本文综述了影响分离得到难培养微生物的主要原因,介绍了当前出现的已经证实卓有成效的新型培养基及培养方法,旨在为研究开发更多创新的培养方法提供参考借鉴。

关键词:难培养微生物;培养方法;新药物;微观世界DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2012.03.02

AdvancesinCultureMethodsofOligotrophicMicrobes

ZENGJian-min,ZENGZhen-shun,YUANHong-juan,TANZhi-yuan

CollegeofAgriculture,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China

Abstract:Theculture-independenttechniqueof16SrRNAcloneandsequ

课题1: 微生物的实验室培养（导学案）

高二生物组

目标导引

1、通过学习知道培养基的种类、营养要素及如何配制培养基 2、通过学习知道消毒灭菌的原理和方法

3、通过学习你将知道如何用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养

问题导学

一、培养基:阅读课本培养基的相关内容，完成下列问题：

（1）培养基分为哪两类？二者的区别？培养基有何用途？

（2）不同的微生物所需要的培养基配方相同吗？培养基的基本成分（主要营养物质）有哪些？为什

么大多数培养基都需要具备这些基本成分？

（3）培养基除能为微生物生长提供几种主要营养物质外，培养基还需要满足微生物生长的哪些要求？

（4）你知道牛肉膏、蛋白胨可以为微生物的生长提供哪些营养物质吗？

二、无菌技术：阅读无菌技术的相关内容，完成下列问题：

（1）获得纯净培养物的关键是什么？无菌技术围绕什么而展开？主要包括哪几个方面？

（2）什么是消毒与灭菌？二者的区别？实验室常用的消毒方法、灭菌方法有哪些？分别适用于那些用具？

（3）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？

（4）请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。

①培养细菌用的培养基与培

生物技术进展

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难培养微生物培养方法的研究进展

曾建民,　曾振顺,　原红娟,　谭志远

华南农业大学农学院,广州510642

摘　要:利用环境样品16SrRNA克隆测序等许多非培养(culture-independent)研究表明,自然界存在许多独特而难培养未培养的微生物,如何开发更多的微生物资源成为当前重要的课题,本文综述了影响分离得到难培养微生物的主要原因,介绍了当前出现的已经证实卓有成效的新型培养基及培养方法,旨在为研究开发更多创新的培养方法提供参考借鉴。

关键词:难培养微生物;培养方法;新药物;微观世界DOI:10.3969/j.issn.2095-2341.2012.03.02

AdvancesinCultureMethodsofOligotrophicMicrobes

ZENGJian-min,ZENGZhen-shun,YUANHong-juan,TANZhi-yuan

CollegeofAgriculture,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou510642,China

Abstract:Theculture-independenttechniqueof16SrRNAcloneandsequ

探究性实验一 微生物的培养与应用

课题1、 课题 、

微生物实验室培养

1.培养基概念、培养基的分类、特点和用途 培养基概念、培养基的分类、 培养基概念 2. 培养基的配制原则和营养构成 3.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 . 4.纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 . 5.对位训练 .

课题1、 课题 、 微生物实验室培养 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 1.培养基概念： 出供其生长繁殖的营养基质。划分 标准 物理 性质 特点 培养基种类 液体培养基 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 半固体培养基 培养基 化学 成分 成培养基 含化学成分不明 的 物质 培养基成分明 培养基 加 种化 学物质， 制不需 的微生物的生长， 需 的的生长 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 工业生产 分类、鉴定 培养、分离出特定微生物(如培养 菌和 菌， 培养基 加 培养 菌， 培养基 ) 不加凝固剂 用途 工业生产 观察微生物的运动、分类、鉴定

用 培养基 途

加

鉴

培养基

微生物的 特 鉴 点， 培养基 加 种 剂 化学 品

不同种类的微生物，如 用 — 培养基鉴 用 制品 菌( ,菌 呈 ， )

2.培养基的配制原则和营养构成 培养基的配制原则和营养构成(

探究性实验一 微生物的培养与应用

课题1、 课题 、

微生物实验室培养

1.培养基概念、培养基的分类、特点和用途 培养基概念、培养基的分类、 培养基概念 2. 培养基的配制原则和营养构成 3.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 . 4.纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 . 5.对位训练 .

课题1、 课题 、 微生物实验室培养 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 1.培养基概念： 出供其生长繁殖的营养基质。划分 标准 物理 性质 特点 培养基种类 液体培养基 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 半固体培养基 培养基 化学 成分 成培养基 含化学成分不明 的 物质 培养基成分明 培养基 加 种化 学物质， 制不需 的微生物的生长， 需 的的生长 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 工业生产 分类、鉴定 培养、分离出特定微生物(如培养 菌和 菌， 培养基 加 培养 菌， 培养基 ) 不加凝固剂 用途 工业生产 观察微生物的运动、分类、鉴定

用 培养基 途

加

鉴

培养基

微生物的 特 鉴 点， 培养基 加 种 剂 化学 品

不同种类的微生物，如 用 — 培养基鉴 用 制品 菌( ,菌 呈 ， )

2.培养基的配制原则和营养构成 培养基的配制原则和营养构成(

高中生物人教版《选修一 生物技术实践》《专题2 微生物的培养与应用》《课题1 微生物的实验室培养》精品专题课后

练习【1】(含答案考点及解析)

班级:___________ 姓名：___________ 分数：___________

1.下图为“宁夏红”枸杞果酒生产工艺流程简图，据图回答问题。 选料→？→粉碎→灭菌→接种→发酵→？→果酒 (1)流程中？处的内容应为________、________。

(2)制作果酒时，温度应该控制在________，果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。____________________________，___________________________。 (3)果酒制作离不开酵母菌，与醋酸杆菌相比，酵母菌在结构上的主要特点是__________________________。

(4)枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是______________________________。

(5)若要提高果酒的产量，发酵过程中关键要控制好哪些条件？____________。

(6)果酒