免疫共沉淀试剂盒
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免疫共沉淀
免疫共沉淀 from WHU SKY
1用细胞刮子收细胞,3000rpm,5min,离心,去上清;或者弃培养基后直接用裂解液裂解细胞。从细胞裂解开始要保持低温,冰上或4度冰箱或4度离心机。
2 PBS清洗,重复步骤1
3选择合适的bufer裂解细胞,现加1000XAL(一般核质均分布的建议使用NP-40,核内分布的建议使用High Salt ,只要求拉下抗原的建议使用RIPA buffer),加入1ml Buffer (106-107个细胞),4℃,30min(在功能旋转仪上旋转裂解)。 4 12000rpm,15min,离心取上清(若上清仍浑浊,可重复离心1-2次)50ul上清作为 Input,其它各取400ul分别加入特异性抗体和对照IgG均1ug(可根据抗体效价酌情增减),4℃,旋转2-4h,
加抗体时要计算使用相同抗体的样品数,取(N+1~2)*1ug,用小量裂解buffer
稀释,再均分到各样品中,以保证抗体加入量的一致。 5细胞裂解液和抗体孵育期间,准备Protein G(一个反应20ul纯beads,如果beads原管中液体和beads体积比是1:1,一个样品取总体积40ul,多个样品需要多取1-2个样品的beads/液体混合物)
PCR试剂盒类型
微生物检测试剂盒
核
酸 产品编
项目
种号 类
产品名称
方 法
规 格 价 格
SA-6131 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒
沙门氏菌 DNA
SA-6132 沙门氏菌(Spp)核酸检测试剂盒 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂
SA-7051
副溶血性盒
DNA
弧菌 副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂
SA-7052
盒 SA-7061 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒
霍乱弧菌 DNA
SA-7062 霍乱弧菌(VC)核酸检测试剂盒 大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂
SA-7071
盒
大肠杆菌 DNA
大肠杆菌(O157:H7)核酸检测试剂
SA-7072
盒
单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂
SA-7081
单增李斯盒
DNA
特菌 单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂
SA-7082
盒
金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测
SA-7091
金黄色葡试剂盒
DNA
萄球菌 金黄色葡萄球菌(MRSA)核酸检测
SA-7092
试剂盒
口腔变形链球菌(SM)核酸检测试
SA-7111
口腔变形剂盒
DNA
链球菌 口腔变形链球菌(SM)核酸检测试
SA-7112
剂盒
幽门螺旋杆菌(HP)核酸检测试剂
SA-7121
幽门螺旋盒
DNA
杆菌 幽
免疫共沉淀Co-IP步骤
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤
一、原理:
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为:(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点为:(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正
免疫共沉淀Co-IP步骤
免疫共沉淀Co-IP实验操作步骤
一、原理:
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
其优点为:(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。缺点为:(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正
人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒(新科英创)
人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒(胶体金法)
生产厂家:英科新创(厦门)科技有限公司 储存条件:4℃-30℃保存 操作步骤
1. 2. 3. 4.
将待测标本从存储条件下取出,平衡至室温并编号 将所需数量的测试试剂从包装盒取出平衡至室温
用微量加样器取60μl待检血清/血浆标本滴加到试剂加样处
加样后,阳性标本可在1-30分钟内检出,超过30分钟将对实验结果造成影响。因此建议30分钟内最终观察并记录实验结果
结果判读
1. 阳性结果:测试条在测试区和对照区位置各出现一条紫红色条带。如果检测区的紫红色条带隐约可见,建议对实验重复检测,并使用其他方法确认
2. 阴性结果:测试条只在对照区位置出现一条紫红色条带 3. 无效结果:对照区未出现紫红色条带,表明不正确的操作或试剂已变质损坏或是试剂中抗体含量过高。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试剂条重新测试。如果问题依然存在,应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系
注意事项
1. 本试剂用于体外诊断,仅用于人全血、血清或血浆样品,其它体液样本可能得不到准确结果
2. 本试剂用于定性检测人全血、血清或血浆样品中HIV1/2型抗体,对于所有使用本试剂条检测的结果必须进一步验证 3. 样品的加样
小鼠_IL-2_Elisa试剂盒
产品详细说明书
小鼠IL-2定量分析酶联免疫检测试剂盒
本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-2浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。
如您有其它需求,请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。
IL-2简介:
IL-2是一种主要由T淋巴细胞产生的多效性的细胞因子,成熟的鼠IL-2是149个氨基酸的糖蛋白,由169个氨基酸的前体蛋白通过剪切而成为成熟的蛋白。
IL-2在抗体刺激引起的不同反应阶段的T细胞,自然杀伤细胞和B细胞的细胞增殖方面起重要的作用,此外,IL-2还可调节γ干扰素、主要组织相容性抗原的表达,刺激活化的B细胞的增殖和分化,提高自然杀伤细胞的活性和抑制粒细胞/巨噬细胞的的增殖。IL-2还可诱导少胶突细胞的增殖和分化。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-2的浓度。小鼠IL-2捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠IL-2会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-2抗体后,抗小鼠IL-2抗体与小鼠IL-2接合,形成夹心的免
试剂盒DNA提取详细操作步骤
一、试剂盒打开后需要准备的工作
1、Proteinase K(蛋白酶K)的溶解
①取4.5ml双蒸水加入蛋白酶K粉中使其充分溶解
②将溶解好的蛋白酶K溶液分装进小离心管,每管100ul~200ul
③将分装好的Proteinase K放入-20℃冰箱中保存,使用期限为12个月 2、组织抑制剂(Inhibitor Removal buffer)的调配
加入20ml无水乙醇(absolute ethanol)颠倒混匀并在空白方框处打钩 3、洗液(wash buffer)的调配
加入80ml无水乙醇(absolute ethanol)颠倒混匀并在空白方框处打钩
二、组织DNA提取(试剂盒)
1、组织样品处理与消化
①将采集来的样品剪碎(≤0.1cm)洗净保存液。
②加入组织破解液Tissue-lysis 200ul 蛋白酶K 40ul然后放入55℃水浴锅内3
个小时使其充分消化。
2、DNA提取
①在消化好的组织样品中加入结合液binding buffer 200ul 然后放入70°水浴
锅中10分钟。
②再加异丙醇100ul 混合均匀吸取上清液放入柱体中,然后离心8000g一分钟。 ③倒掉底液,加500ul组织抑制剂Inhibitor
EMSA试剂盒使用方法介绍
基因结构和功能系列
CAT#:131039-100 低温运输,-20℃保存 即用型EMSA试剂盒 Electrophoretic Mobility Shift Assay Kit
使用手册V1.0
产品及特点 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay),也称gel shift,是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通过EMSA可以研究目的蛋白和特定的DNA序列的结合情况,从而可以研究细胞内一些转录因子的激活水平。其原理如下: 本产品具有下列特点: 1. 一站式,使用方便,本试剂盒提供了进行EMSA实验的探针标记、蛋白和DNA结合以及EMSA上样液等主要试剂,使EMSA实验变得简单方便。 2. 非特异性结合低,EMSA结合缓冲液中含有poly(dI-dC)等有效成分,其中poly(dI-dC)的浓度经过优化,可以很好的消除蛋白和标记探针
小鼠_IL-2_Elisa试剂盒
产品详细说明书
小鼠IL-2定量分析酶联免疫检测试剂盒
本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-2浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分是否完整,如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮助。
如您有其它需求,请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。
IL-2简介:
IL-2是一种主要由T淋巴细胞产生的多效性的细胞因子,成熟的鼠IL-2是149个氨基酸的糖蛋白,由169个氨基酸的前体蛋白通过剪切而成为成熟的蛋白。
IL-2在抗体刺激引起的不同反应阶段的T细胞,自然杀伤细胞和B细胞的细胞增殖方面起重要的作用,此外,IL-2还可调节γ干扰素、主要组织相容性抗原的表达,刺激活化的B细胞的增殖和分化,提高自然杀伤细胞的活性和抑制粒细胞/巨噬细胞的的增殖。IL-2还可诱导少胶突细胞的增殖和分化。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-2的浓度。小鼠IL-2捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠IL-2会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-2抗体后,抗小鼠IL-2抗体与小鼠IL-2接合,形成夹心的免
胎球蛋白A检测试剂盒(ELISA酶联免疫法)简介说明书
人胎球蛋白A检测试剂盒(酶联免疫法)
(德国DRG EIA4522)
预期用途
此试剂盒可用于血清,血浆,细胞上清,组织提取物和尿液中人胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白的定量的检测;血清或血浆中胎球蛋白A的检测可作为某些癌症及基因遗传缺陷的血清蛋白诊断的辅助工具;此试剂盒仅供实验室专业人士使用 简介
胎球蛋白A也称之为α-2-HS糖蛋白,是由两个氨基末端抑制域和一个较小的羧基末端域组成的59 kDa 分子量的糖蛋白;由肝脏合成,分泌至血流,成年哺乳动物体内的浓度范围在0.5-1.0g/L;婴儿期的血清胎球蛋白A含量高,参与蛋白酶抑制活性,与钙代谢和骨生成调节相关;累积于骨和牙齿内,作为生物学上非胶原骨蛋白的主要部分,研究表明,胎球蛋白A是循环中主要的钙化抑制剂;干涉钙盐沉淀;近期研究显示低水平胎球蛋白A的慢性肾脏衰竭患者与心血管病的高死亡率显著相关;另一方面,糖尿病老年人血清胎球蛋白A含量比正常人高,这是独立于胰岛素抑制剂的其他标记物;另外,高胎球蛋白A水平还可作为心血管疾病的的危险标记物
实验原理
此试剂盒可用于血清样本中人胎球蛋白A的定量检测;采用双位点夹心法,羊抗人胎球蛋白A多抗结合人胎球蛋白A的不同位点
将含人胎球蛋白A的试