限制性内切酶酶切位点的特点及产生的末端类型是什么?

限制性内切酶酶切位点

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常用的限制性内切酶

内切酶 ApaⅠ BamHⅠ BanⅡ HgiJⅡ BciT130Ⅰ M. EcoRⅡ MvaⅠ BstOⅠ BglⅠ BglⅡ BmgT120Ⅰ AsuⅠ Cfr13Ⅰ Sau96Ⅰ BmeT110 AvaⅠ BseJⅠ BspT104Ⅰ AsuⅡ NspⅤ BstBⅠ Csp45Ⅰ BspT107Ⅰ HgiCⅠ BanⅠ BstPⅠ BstEⅡ EcoO65Ⅰ Eco91Ⅰ DraⅠ AhaⅢ Eco24Ⅰ Eco72Ⅰ Eco88Ⅰ EcoO109Ⅰ DraⅡ 酶切位点 GGGCCC CCCGGG GGATCC CCTAGG G(A/G)GC(TC)C C(T/C)CG(A/G)G CC(A/T)GG GG(T/A)CC GCCNNNNNGGC CGGNNNNNCCG AGATCT TCTAGA GGNCC CCNGG C(T/C)CG(A/G)G G(A/G)GC(T/C)C GATNNNNATC CTANNNNTAG TaKaRa 2000 U/120元 2000 U/120元 500 U/120元 MBI TOYOBO 1500 U/120元 600 U/120元 500 U/120元

常用的限制性内切酶

内切酶 ApaⅠ BamHⅠ BanⅡ HgiJⅡ BciT130Ⅰ M. EcoRⅡ MvaⅠ BstOⅠ BglⅠ BglⅡ BmgT120Ⅰ AsuⅠ Cfr13Ⅰ Sau96Ⅰ BmeT110 AvaⅠ BseJⅠ BspT104Ⅰ AsuⅡ NspⅤ BstBⅠ Csp45Ⅰ BspT107Ⅰ HgiCⅠ BanⅠ BstPⅠ BstEⅡ EcoO65Ⅰ Eco91Ⅰ DraⅠ AhaⅢ Eco24Ⅰ Eco72Ⅰ Eco88Ⅰ EcoO109Ⅰ DraⅡ 酶切位点 GGGCCC CCCGGG GGATCC CCTAGG G(A/G)GC(TC)C C(T/C)CG(A/G)G CC(A/T)GG GG(T/A)CC GCCNNNNNGGC CGGNNNNNCCG AGATCT TCTAGA GGNCC CCNGG C(T/C)CG(A/G)G G(A/G)GC(T/C)C GATNNNNATC CTANNNNTAG TaKaRa 2000 U/120元 2000 U/120元 500 U/120元 MBI TOYOBO 1500 U/120元 600 U/120元 500 U/120元

遗传分子生物学实验

质粒DNA DNA的限制性内切酶酶切 实验二 质粒DNA的限制性内切酶酶切

遗传分子生物学实验

一 实验目的了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒DNA的试验方法 了解限制性内切酶作用的原理、特点和酶切质粒DNA的试验方法 DNA

限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的 限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的 DNA DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具，所以常常与核酸聚合酶、 DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具，所以常常与核酸聚合酶、 水解酶 连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶。 连接酶以及末端修饰酶等一起称为工具酶。限制性核酸内切酶不仅是 DNA重组中重要的工具，而且还可以用于基因组酶切图谱的鉴定。 DNA重组中重要的工具，而且还可以用于基因组酶切图谱的鉴定。 重组中重要的工具

遗传分子生物学实验

第一类( 第一类(I型)限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序，并在识别点 限制性内切酶能识别专一的核苷酸顺序， 附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链，但是切割的核苷酸顺序没 附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的双链， DNA分子中的双链 有专一性，是随机的。这类限制性内切

实验五 DNA的限制性酶切和琼脂糖电泳

一、实验目的

掌握DNA的限制性酶切的基本原理 和琼脂糖凝胶电泳的基本操作技术

二、实验原理 1、DNA的限制性酶切

限制性内切酶是基因操作中不可缺少的工具酶，它能够识别双链DNA的特定位点并切开DNA，这个特定位点是一段具有旋转对称结构的DNA片段。。

绝大多数的限制酶识别长度为4~8个核苷酸且呈二重对称的特异序列。EcoRI的识别序列是G↓AATTC，BmHI的识别序列是G↓GATCC，HindIII的识别序列是A↓AGCTT。

每种限制性内切酶都有特定的反应条件，如特定的pH范围，缓冲液组分，温育温度等，具体的使用也可参考有关的工具书或文献或产品说明。一般温度37℃，pH7.5~8.0对大多数酶来讲是适合的，但缓冲液的组分则变化很大，典型的组分应有Tris、NaCl、MgCl2，和巯基试剂(如巯基乙醇或二硫苏糖醇)。

典型的反应体系中包括lμg或更少的DNA和1单位酶以及合适的反应介质。反应总体积通常控制在20和50μ之间，反应时间在1小时，而反应的终止则由EDTA溶液的加入完成，因为它能鳌合核酸酶活性所必需的金属离子。

2、DNA的琼脂糖电泳

DNA的电泳有琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳，它

1388 第二军医大学学报AcadJSecMil

MedUniv

2005Dec 26 12

论垂直负荷下颈椎前路限制性与非限制性钢板的生物力学比较

李超1!阮狄克1

”

著

!谈诚2!丁宇1

1.海军总医院骨科 北京100037 2.航天员科研与训练中心 北京100094

!摘要"分析比较颈椎前路非限制性钢板与限制性钢板的生物力学差异 方法：6具成人新鲜颈椎标本行C4-5椎间盘目的：每个标本依次在无钢板固定~非限制性钢板固定~限制性钢板固定~限制性钢板固定+植骨块吸收1mm~非限制性钢摘除术

C无钢板板固定+植骨块吸收1mm5种情况下分别采用椎间压力传感器及应变计测量椎间压力负荷与钢板负荷 结果：1>固定~非限制性钢板固定~限制性钢板固定3种情况下 椎间压力递减 且差异显著C;当植骨块出现吸收塌陷1mmP＜0.01>时 非限制性钢板组较限制性钢板组为椎间植骨块分担更多的压力C C无论椎间植骨有无吸收塌陷 限制性钢板P＜0.01>2>均较非限制性钢板传递更多负荷C C在植骨块出现吸收塌陷后 后柱结构分担负荷均有增加 尤以使用非限制性P＜0.01>3> C钢板除了传递压缩应力外 还会产生弯曲应力 无论有无植骨吸收塌陷产生 限制性钢板产生钢板增加明显C

导入练习1

1. — Is that the small company you often refer to?

— Right, just the one _______ you know my father used to work for years. A. that B. which C. where D. As 2. — Where did they fi nish the experiment?

— It was in the lab _______ was taken charge of by Prof. Smith. A. where B. / C. which D. in which

3. Examination compositions, together with most business letters and government reports, are the main situations _______ formal language is used.

A. in which B. in that C. of whic

1388 第二军医大学学报AcadJSecMil

MedUniv

2005Dec 26 12

论垂直负荷下颈椎前路限制性与非限制性钢板的生物力学比较

李超1!阮狄克1

”

著

!谈诚2!丁宇1

1.海军总医院骨科 北京100037 2.航天员科研与训练中心 北京100094

!摘要"分析比较颈椎前路非限制性钢板与限制性钢板的生物力学差异 方法：6具成人新鲜颈椎标本行C4-5椎间盘目的：每个标本依次在无钢板固定~非限制性钢板固定~限制性钢板固定~限制性钢板固定+植骨块吸收1mm~非限制性钢摘除术

C无钢板板固定+植骨块吸收1mm5种情况下分别采用椎间压力传感器及应变计测量椎间压力负荷与钢板负荷 结果：1>固定~非限制性钢板固定~限制性钢板固定3种情况下 椎间压力递减 且差异显著C;当植骨块出现吸收塌陷1mmP＜0.01>时 非限制性钢板组较限制性钢板组为椎间植骨块分担更多的压力C C无论椎间植骨有无吸收塌陷 限制性钢板P＜0.01>2>均较非限制性钢板传递更多负荷C C在植骨块出现吸收塌陷后 后柱结构分担负荷均有增加 尤以使用非限制性P＜0.01>3> C钢板除了传递压缩应力外 还会产生弯曲应力 无论有无植骨吸收塌陷产生 限制性钢板产生钢板增加明显C