蛋白浓度测定标准曲线

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双缩脲法测定蛋白质浓度标准曲线的绘制

标签:文库时间:2024-10-04
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双缩脲法测定蛋白质浓度——标准曲线的绘制 管号 试剂 2mg/ml卵清蛋白液/ml 蒸馏水/ml 双缩脲试剂/ml 蛋白质浓度/(mg/ml) A 0 0.0 3.0 2.0 0.0 0.000 1 0.3 2.7 2.0 0.2 0.245 2 0.6 2.4 2.0 0.4 0.345 3 0.9 2.1 2.0 0.6 0.398 4 1.2 1.8 2.0 0.8 0.488 5 1.5 1.5 2.0 1.0 0.574

充分混匀,在540nm比色

考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度——标准曲线的绘制 管号 试剂 标准蛋白液/ml 0.9% Nacl/ml 考马斯亮蓝染液/ml 蛋白质浓度/(微克/ml) A 0 0.0 1.0 4.0 0 0.000 1 0.1 0.9 4.0 10 0.009 2 0.2 0.8 4.0 20 0.041 3 0.3 0.7 4.0 30 0.077 4 0.4 0.6 4.0 40 0.083 5 0.6 0.4 4.0 50 0.123

充分混匀,在595nm比色

绘制 样液2样液2加3ml

卵清蛋白卵清蛋白加3ml

(A540nm)0.700

双缩尿法测定蛋白质浓度--标准曲线

A 线性

2.0 ? 0.927

2.

蛋白浓度测定(完成)

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蛋白浓度测定

蛋白质的定量分析是生物化学和其它生命学科最常涉及的分析内容,是临床上诊断疾病及检查康复情况的重要指标,也是许多生物制品,药物、食品质量检测的重要指标。在生化实验中,对样品中的蛋白质进行准确可靠的定量分析,则是经常进行的一项非常重要的工作。

蛋白质是一种十分重要的生物大分子:它的种类很多,结构不均一,分子量又相差很大,功能各异,这样就给建立一个理想而又通用的蛋白质定量分析的方法代来了许多具体的困难。目前测定蛋白质含量的方法有很多种,下面列出根据蛋白质不同性质建立的一些蛋白质测定方法: 物理性质:紫外分光光度法

化学性质:凯氏定氮法、双缩脲法、Lowry 法,BCA法,胶体金法 染色性质:考马氏亮蓝染色法、银染法 其他性质:荧光法

蛋白质测定的方法很多,但每种方法都有其特点和局限性,因而需要在了解各种方法的基础上根据不同情况选用恰当的方法,以满足不同的要求。例如凯氏定氮法结果最精确,但操作复杂,用于大批量样品的测试则不太合格;双缩脲法操作简单,线性关系好,但灵敏度差,样品需要量大,测量范围窄,因此在科研上的应用受到限制;而酚试剂法弥补了它的缺点,因而在科研中被广泛采用,但是它的干扰因素多;考马氏亮兰染色法因其灵敏而又

如何测定标准工时

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标准工时与工厂管理

生产效率改善讲座生产效率改善讲座-01

如何测定标准工时

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标准工时与工厂管理

时间分析的重要性: 时间分析的重要性: 时间的脚步永不停息,明天 时间的脚步永不停息, 在叹息中走近, 在叹息中走近,今天犹如离弦之 箭,昨天永远静止。 昨天永远静止。 -------希拉 -------希拉

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标准工时与工厂管理

时间分析的鼻祖: 时间分析的鼻祖:达。芬奇

画家、雕刻家、科学家、 画家、雕刻家、科学家、军 事家、土木工程师、 事家、土木工程师、音乐家时间分析与音乐的关系: 时间分析与音乐的关系: 3000拍子------一个小时 拍子------一个小时; 3000拍子------一个小时; 一个拍子------一个全音符------1.2秒 ------一个全音符------1.2 一个拍子------一个全音符------1.2秒.

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标准工时与工厂管

儿童体质测定标准 - 图文

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北京市3—6岁儿童体质测定标准

北京市体育运动委员会 北京市教育委员会 北京市卫生局 一九九八年十月

目录

关于颁布《北京市3—6岁儿童体质测定标准》的通知··························(1) 北京市3—6岁儿童体质测定标准············································(3) 第一部分 年龄分组、测定项目及评价方法····································(3) 一、年龄分组·····························································(3) 二、测定项目·····························································(4) 三、评价标准·····························································(4) 第二部分 测定规则························································(5) 一、身高·············

碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒

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碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒

BCA蛋白浓度测定试剂盒 产品编号 产品名称 包装

蛋白浓度测定试剂盒次

产品简介:

¾

¾

¾

¾ BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而 成,实现了蛋白浓度测定的简单,高稳定性,高灵敏度和高兼容性。 灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml,最小检测蛋白量达到0.5µg,待测样品体积为1-20µl。 在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。 BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的

Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。

BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性,请参见碧云天如下网页:

/Compatibility Chart For B

旋光度测定标准操作规程

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旋光度测定标准操作规程

1. 目的:

建立旋光度测定标准操作规程。

2. 依据:

《中华人民共和国药典》2000年版二部。 3. 范围:

本标准适用于药品旋光度的测定。 4. 职责:

QC检验员对本标准的实施负责。 5. 程序: 5.1. 简述:

旋光度测定法是利用直线偏振光,通过含有某些光学活性化合物的液体或溶液时, 能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转,此种旋转在一定条件下有一定度数,称为旋光度。使偏振光向右旋转者(顺时针方向)称为右旋物质,常以“+”号表示。使偏振光向左旋转者(反时针方向),称为左旋物质,常以“—”号表示。

影响物质旋光度的因素很多,除化合物特性外,还有偏振光通过供试品液层的浓度和厚度,通过光线的波长和测定时的温度。当偏振光通过长1dm、每1ml中含有旋光性物质1g的溶液,使用光线波长为钠光D线(589.3nm),测定温度为20℃时,测得的旋光度称为该物质的比旋度,以[α]20

D表示。比旋度是物质的物理常数。因此可用以区别

或检查某些药品的光学活性和药品的纯杂程度。由于旋光度在一定条件下与浓度呈线性关系,故而还可以用来测定含量。

直线偏

国民体质测定标准手册(幼儿部分)

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1 国民体质测定标准手册(幼儿部分)

本文概要:国民体质测定标准手册(幼儿部分)第一部分适用对象的分组与测试指标一、适用对象的分组 1.分组和年龄范围《国民体质测定标准》(幼儿部分)的适用对象为3-6周岁的中国幼儿。按年龄、性别分组,3-5岁每岁为一组;6岁为一组。男女共计14个组别。2.年龄计算方法

国民体质测定标准手册(幼儿部分)

第一部分适用对象的分组与测试指标

一、适用对象的分组

1.分组和年龄范围

《国民体质测定标准》(幼儿部分)的适用对象为3-6周岁的中国幼儿。按年龄、性别分组,3-5岁每岁为一组;6岁为一组。男女共计14个组别。

2.年龄计算方法

(1)3-5岁者

测试时已过当年生日,且超过6个月者:

年龄=测试年-出生年+

测试时已过当年生日,且不满6个月者:

年龄=测试年-出生年

测试时未过当年生日,且距生日6个月以下者:

年龄=测试年-出生年

测试时未过当年生日,且距生日6个月以上者;

年龄=测试年-出生年-1

(2)6岁者

测试时已过当年生日者:年龄=测试年-出生年

测试时未过当年生日者:年龄=测试年-出生年-1

二、测试指标

类别测试指标

形态

素质

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第二部分测试方法

受试者测试前应保持安静状态,不要

VFA的测定方法及标准曲线

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VFA的测定方法及标准曲线

VFA的测定方法及标准曲线

VFA测定的方法

指 标

检测方法

分析仪器

检测条件 挥发性脂肪酸VFA,包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸 液相色谱法 高效液相色谱仪,HPLC (Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司,美国) 流动相:0.05%稀磷酸,流速0.7 mL min-1;

检测器:紫外检测器,波长=210 nm;

分析柱:Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱(6 μm, 8× 300 mm) + KC-G 保护住(10 μm, 6× 50 mm),柱温箱恒定55℃;

进 样:自动进样器进样,进样量 20 μL;

定 量:基于峰面积的外标法。

样品处理: 过0.45 μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。

注:乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为15.15、17.30、19.18、20.64、23.43、28.00min。

实验仪器

高效液相色谱仪(Agilent 1200,)

应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样本浓度

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应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样本浓度

整体思路:在ELISA实验结束后,我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样本的OD值。其中,标准品的浓度已知,我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度,以OD值为横坐标,浓度为纵坐标,做一条标准曲线,并用公式表示出来。这样,我们把样本的OD值以X值代入,便可求出Y值,即样本浓度。 下面我们就一步步来实现这个目标:

1. 首先,将数据整理好输入Excel,分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。

2. 拖动鼠标选取完成的数据区,并点击图表向导,在图表类型中选“XY散点图”,并选择子

图表类型的“散点图”(第一个没有连线的)。如下图所示。

3. 点击“下一步”,出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如

果是纵向列表就改选“列”。

在做ELISA标准曲线,并通过此曲线求样本浓度时,因样本OD值是已知的,因此,我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到,横坐标X值为OD值,纵坐标Y为标准品浓度,这正是我们想要的。

4.有时需要我们手动选择X值,这时可以点击“系列”来更改,如下图。

如果要对横坐标和纵坐标进行掉换,我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标,结果如下图:

出现上图后,拖动鼠标选

四种化学需氧量测定标准方法的比较

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化学需氧量测定

第2 6卷

第 1期

Vo . 2 NO 1 1 6 .

21 0 0年 2月

F b 2 l e . OO

四种化学需氧量测定标准方法的比较杨彤,李雪梅,程晓菁,何政 (北京市城市排水集团有限责任公司水质检测中北京 1 1 )心, 0 2 04

摘要:对国内外四种测定低浓度化学需氧量 ( O )的方法进行了比对分析。从精密度、确度、确定度等方面对 C D准不这四种方法进行了系统对比。结果表明,测定低浓度 C D的样品时,准确度方面, H/ 3 9 2 0”之外的其它在 O在除 JT 9 - 07 三种方法中的任何一种都可以得到稳定可靠的回收率;精密度方面,2 0 . b3和 I0175 2 0 _的数据与标准在 52B4【 s 5 O— O 24 文本中的参考数据具有一致性;不确定度方面,在四种方法相差不大,主要影响因素均为样品重复测定引起的不确定度; 在方法间的差异及相关性上,用 H/ 39 2 0采 JT 9 - 0 7和其他三种方法得到的结果存在显著差异,采用其它三种方法测定而低 O得并 52B 4、中 .浓度 C D样品时,到的结果没有显著差异,且三种方法之间具有很好的相关性。在实际应用中,20 . b n V c IO17