生化实验报告思考题

1. 氨基酸的纸层析分离

1. 什么是纸层析技术

是利用混合物中各组分物理化学性质差异，使其以不同速度移动的一种物理分离方法。

2. 什么是分配系数

分配系数是指溶质在固定相中的浓度和溶质在流动相中的浓度的比值。 3. 层析技术的种类

1 吸附层析 2 分配层析

3 离子交换层析 4 凝胶过滤层析 5 亲和层析 6 气象层析 7 固相层析 8 柱层析 9 纸层析 10 薄层层析

11 高效液相层析

4. 影响Rf值的因素有哪些

1 纸层析时纸层析时要在密闭仪器中加入平衡试剂使纸层析上吸附的溶剂达到

饱和.

2 滤纸要保持洁净,点样时要适量斑点不能过大. 3 样品物分子结构和极性

4 滤纸的厚薄和纤维松紧度不一样，结合的水量也不一样。

2. 酵母RNA的提取和分离

1. 试验中为什么选择干酵母做实验材料？

酵母中RNA含量较高（2.67%~10.0%），DNA含量少 2. 提取RNA的方法有几种？

稀碱法和浓盐法

3. 加入酸性乙醇的目的？

在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可使解聚的核糖核酸沉淀，由此得到RNA的粗制品。

4. 如何鉴定RNA的组分？现象如何？

RNA中含有核糖，碱基，磷酸各组分。核糖与浓盐酸和苔黑酚共热产生绿色；嘌呤碱与银铵络离子共

多练出技巧 巧思出硕果

生化实验讲义思考题参考答案

实验一 淀粉的提取和水解 1、实验材料的选择依据是什么？

答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。

2、材料的破碎方法有哪些？

答：(1) 机械的方法： 包括研磨法、组织捣碎法；

(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等； (3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。

实验二 总糖与还原糖的测定

1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？ 答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。

实验五 粗脂肪的定量测定─索氏提取法

（1）本实验制备得到的是粗脂肪，若要制备单一组分的脂类成分，可用什么方法进一步处

第七章、代谢调控 1、什么是新陈代谢？

新陈代谢简称代谢，是细胞中各种生物分子的合成、利用和降解反应的总和。一般来说，新陈代谢包括了所有产生和储藏能量的反应，以及所有利用这些能量合成低分子量化合物的反应。但不包括从小分子化合物合成蛋白质与核酸的过程。 生物新陈代谢过程可以分为合成代谢与分解代谢。

2、什么是代谢途径？代谢途径有哪些形式。 新陈代谢是逐步进行的，每种代谢都是由一连串反应组成的一个系列。这些一连串有序反应组成的系列就叫做代谢途径。在每一个代谢途径中，前一个反应的产物就是后一个反应的底物。所有这些反应的底物、中间产物和产物统称为代谢中间产物，简称代谢物。 代谢途径具有线形、环形和螺旋形等形式。有些代谢途径存在分支。

3、简述代谢途径的特点。

生物体内的新陈代谢在温和条件下进行：常温常压、有水的近中性环境。

由酶催化，酶的活性受到调控，精密的调控机制保证机体最经济地利用物质和能量。 代谢反应逐步进行，步骤繁多，彼此协调，有严格顺序性。 各代谢途径相互交接，形成物质与能量的网络化交流系统。 ATP是机体能量利用的共同形式，能量逐步释放或吸收。

4、列表说明真核细胞主要代谢途径与酶的区域分布。 代谢途径（酶或酶系） 细胞内分布 糖酵

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

第一章 概论

生物分子提取和纯化的一般过程？ 细胞破碎的方法？

抽提有效成分的影响因子：

生物大分子常用的浓缩纯化方法？ 纯化方案的评价指标是什么？

生物分离技术（纯化方案）设计的基本原则是什么？ 纯化生物产品的总收率是如何计算的？

第二章 沉淀法

1. 蛋白质沉淀方法有哪些？ 2. 盐析的概念及机理是什么？ 3. 硫酸铵饱和度：

4. 影响盐析的因素有哪些？ 5. 硫酸铵盐析的方法有哪几种？ 6. 盐析常数（Ks）： 7. 常用的脱盐方法： 8. 透析法注意事项：

9. 有机溶液能降低蛋白质溶解的原理： 10. 用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？

第三章 吸附层析

1. 吸附层析分离物质的基本原理： 2. 吸附层析常用的吸附剂的种类： 3. 吸附剂的选择： 4. 羟基磷灰石(HA) ： 5. 硅胶吸附剂： 6. 洗脱剂符合条件： 7. 柱层析的设备：

8. 柱层析操作的一般过程：

9. 核酸在HA层析柱上分离的次序是双链RNA、杂链RNA、双链DNA，为什么？ 10. 薄层层析(TLC)：

第四章 离子交换层析

1.离子交换剂有哪几部分组成？何为阳离子和阴离子交换剂

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

第一章 概论

生物分子提取和纯化的一般过程？ 细胞破碎的方法？

抽提有效成分的影响因子：

生物大分子常用的浓缩纯化方法？ 纯化方案的评价指标是什么？

生物分离技术（纯化方案）设计的基本原则是什么？ 纯化生物产品的总收率是如何计算的？

第二章 沉淀法

1. 蛋白质沉淀方法有哪些？ 2. 盐析的概念及机理是什么？ 3. 硫酸铵饱和度：

4. 影响盐析的因素有哪些？ 5. 硫酸铵盐析的方法有哪几种？ 6. 盐析常数（Ks）： 7. 常用的脱盐方法： 8. 透析法注意事项：

9. 有机溶液能降低蛋白质溶解的原理： 10. 用乙醇沉淀蛋白质时应注意哪些事项？

第三章 吸附层析

1. 吸附层析分离物质的基本原理： 2. 吸附层析常用的吸附剂的种类： 3. 吸附剂的选择： 4. 羟基磷灰石(HA) ： 5. 硅胶吸附剂： 6. 洗脱剂符合条件： 7. 柱层析的设备：

8. 柱层析操作的一般过程：

9. 核酸在HA层析柱上分离的次序是双链RNA、杂链RNA、双链DNA，为什么？ 10. 薄层层析(TLC)：

第四章 离子交换层析

1.离子交换剂有哪几部分组成？何为阳离子和阴离子交换剂

1.为什么直流电动机要进行零励磁保护？

答：因为直流电动机在运行中，若失去励磁电流或励磁电流减小很多，则轻载时将产生超速运行甚至发生飞车；重载时则使电枢电流迅速增加，电枢绕组会因发热而损坏，所以要采用零励磁保护。

2.（1）为什么要求直流他励电动机磁场回路的接线要牢靠？ 答案同上

（2）起动时电枢回路必须串联起动变阻器？

答：启动时，电枢是静止的，此时E＝0，所以启动电流Ia＝U/Ra，又因Ra很小，所以启动电流

大，必须串联电阻限制启动电流。

3.什么对调直流电源的正负极，可以改变直流他励电动机的转向，而不可以改变直流并励电动机的转向？

答：对于直流他励电动机来说，改变对调直流电源的正负极只会改变电枢电流方向，而不会改变励磁电流方向，所以可以改变电机转向。对于直流并励电动机来说，改变对调直流电源的正负极不仅会改变电枢电流方向，而且会改变励磁电流方向，所以转向不改变。 4.为什么交流电动机直接启动时，启动电流很大？

答：异步电动机启动时，由于转子处于静止状态，定子旋转磁场以最快的相对速度切割转子导体，在转子绕组中感应出很大的转子电势和转子电流，从而引起很大的定子电流，一般启动电流可达额定电流的5～7倍。

5.三相异步电动机断了一根电源线后，为

课程设计(综合实验)报告

( 2015 -- 2016 年度第 1 学期)

名 称：题 目：院 系：班 级：学 号：学生姓名：指导教师：设计周数：

成 绩：日期： 操作系统综合实验 oslab综合实验 计算机系

分散进行 2015 年 10 月 29 日

实验1 实验环境的使用

一、 综合实验的目的与要求

? 熟悉操作系统集成实验环境OS Lab 的基本使用方法。 ? 练习编译、调试EOS 操作系统内核以及EOS 应用程序。 二、实验正文

1.启动 OS Lab 2.1 执行项目

Windows 控制台窗口内容显示2.2 调试项目

2.2.1 使用断点中断执行 2.2.2 单步调试

2.2.2 .3单步调试 结果显示：

练习使用“逐语句”功能和“跳出”功能 2.2.3 查看变量的值 快速监视 添加监视2.2.4 调用堆栈 调用堆栈显示内容进入Func 函数

双击 main 函数所

1.为什么直流电动机要进行零励磁保护？

答：因为直流电动机在运行中，若失去励磁电流或励磁电流减小很多，则轻载时将产生超速运行甚至发生飞车；重载时则使电枢电流迅速增加，电枢绕组会因发热而损坏，所以要采用零励磁保护。

2.（1）为什么要求直流他励电动机磁场回路的接线要牢靠？ 答案同上

（2）起动时电枢回路必须串联起动变阻器？

答：启动时，电枢是静止的，此时E＝0，所以启动电流Ia＝U/Ra，又因Ra很小，所以启动电流

大，必须串联电阻限制启动电流。

3.什么对调直流电源的正负极，可以改变直流他励电动机的转向，而不可以改变直流并励电动机的转向？

答：对于直流他励电动机来说，改变对调直流电源的正负极只会改变电枢电流方向，而不会改变励磁电流方向，所以可以改变电机转向。对于直流并励电动机来说，改变对调直流电源的正负极不仅会改变电枢电流方向，而且会改变励磁电流方向，所以转向不改变。 4.为什么交流电动机直接启动时，启动电流很大？

答：异步电动机启动时，由于转子处于静止状态，定子旋转磁场以最快的相对速度切割转子导体，在转子绕组中感应出很大的转子电势和转子电流，从而引起很大的定子电流，一般启动电流可达额定电流的5～7倍。

5.三相异步电动机断了一根电源线后，为

Shaonanlee 黑暗舞者DID

生化实验思考题总结

1. 蛋白质定量测量的方法有哪些？简要说明其原理。

答：a.紫外吸收，在280nm处有最大吸收峰。

b.定氮法，利用蛋白质中氮元素含量为16%固定比例来测定。

c.分光光度计法，利用OD值和蛋白质浓度成正比的原理。显色剂为考蓝。 d.双缩脲法。也是利用显色反应。 e.Folin酚法。

2. 如果凝胶过滤层析分离的蛋白质样品中含有多种蛋白质，在各蛋白质分子量已知的情况下，如何判断哪一种蛋白质时所想要的？

答：现在假设有三种蛋白质a b c，分子质量a>b>c。

那么，a最先流出，在体积V1处有一个洗脱体积，对应的a的溶液浓度在 V1处也最高，就会有一个OD值的峰值。b c同理。由不同的OD峰值， 对应不同的洗脱体积，就可以筛选出想要的蛋白质。如果想要b，那么在第 二个吸收峰的时候，找到相应的洗脱体积，然后在其附近的所接到的溶液 进行选取。就会得到想要的蛋白质。

3. 如果盐析后的样品不经脱盐处理便上样电泳，对其结果有何影响？

答：如果没有去除清蛋白里面的盐分，则会使电泳速度下降。原因在于溶液离子 强度太大，蛋白质表面的电荷减少，所以导致电泳速度下降，甚至无法泳

本科生化思考题

一、名词解释

1． 肽键平面2

多肽链中肽键结构中C—N键具有部分双键性质不能自由旋转，即使肽键(CO—NH)中相关的6个原子处于—个平面称肽键平面。

2． 结构域2

蛋白质在形成三级结构时，肽链中某些局部的二级结构汇集在一起，形成发挥生物学功能的特定区域称为结构域。

3． 模体3

在一些蛋白质分子中，常发现几个(多为2～3个)具有二级结构的肽段相互靠近，形成具有特定功能的空间构象；或者仅是一个具有特定功能的很短的肽段。这种结构称为模体。常见的有锌指模体、螺旋-转角-螺旋模体等。

4． 蛋白质分子的四级结构3

两个或两个以上独立存在并具有三级结构的多肽链通过次级键结合在一起的特定构象称为蛋白质分子的四级结构。

5． 蛋白质的等电点1

蛋白质分子所带正负电荷相等时，溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。

6． 蛋白质的变性2

在某些物理因素或化学因素的作用下，蛋白质分子内部的非共价键断裂，天然构象被破坏，从而引起理化性质改变，生物活性丧失，这种现象称为蛋白质变性。

7． Tm值1

在DNA变性时，A260达到最大值一半时的温度，即DNA变性一半时的温度，称为解链温度。

8． 酶的专一性3

一种酶只能作用于一种或一类作用物，或一定的化