环境工程微生物实验

第一章 微生物学实验常识 第一节 微生物实验操作常识

环境工程微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验，培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力以及实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。

一、实验过程中注意事项

1．每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。

2．认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。

3．实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。

4．实验时细心仔细，全部操作应严格按操作规程进行，万一遇有盛菌液试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。

5．实验过程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险，先关掉火源，再用湿布或砂土掩盖灭火，必要时用灭火器。

6．使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放会原处。

7．每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，将实验室收拾

第一章 微生物学实验常识 第一节 微生物实验操作常识

环境工程微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作技能；了解微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学理论。同时，通过实验，培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力以及实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良好作风。

一、实验过程中注意事项

1．每次实验前必须对实验内容进行充分预习，以了解实验的目的、原理和方法，做到心中有数，思路清楚。

2．认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需记下每次观察的现象和结果，以便分析。

3．实验室内应保持整洁，勿高声谈话和随便走动，保持室内安静。

4．实验时细心仔细，全部操作应严格按操作规程进行，万一遇有盛菌液试管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时，应立即报告指导教师，及时处理，切勿隐瞒。

5．实验过程中，切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇火险，先关掉火源，再用湿布或砂土掩盖灭火，必要时用灭火器。

6．使用显微镜或其他贵重仪器时，要求细心操作，特别爱护。对消耗材料和药品等要力求节约，用毕后仍放会原处。

7．每次实验完毕后，必须把所用仪器抹净放妥，将实验室收拾

《环境工程微生物学》教案

课程名称：主讲教师：

环境工程微生物学

佘秋生

环境工程微生物学绪论

讲 授 人: 佘秋生 学 时：2 教学方法: 讲授

教学手段: 板书、多媒体 教学目的: 1、认识微生物

2、了解环境与环境工程面临的问题 、可持续发展与微生物 3、了解环境工程微生物学的研究对象与任务 4、微生物的发展史

重点难点: 建立环境工程微生物学的基本认识 教 学 内 容:

第一节、微生物概述

一、微生物的概念

一类形态微小.结构简单.单细胞或多细胞的低等生物的通称. 包括病毒、细菌、真菌、原生动物和藻类等．其大小用微米(um)表示．

二、微生物的分类

为了识别和研究微生物，各种微生物按其客观存在的生物属性及它们的亲缘关系，有次序地分门别类排列成一个系统，从大到小，按界、门、纲、目、科、属、种等分类． 种

最小的分类单位，具有一定的自然分布区和一定的生理形态的生物类群，是生物进化和自然选择的产物，同一种中的各个个体具有相同的遗传性状，而且彼此交配可以产生后代．

三、微生物的命名

命名原则：微生物的命名是采用生物学中的二名法，即用两个拉丁文命名一个微生物的种． 命名方法：

这个种的名称是由一

环境工程微生物学实验讲义

实验一 光学显微镜的使用

一、 目的要求

1、 熟悉普通光学显微镜的构造及其使用方法。 2、 了解油镜的原理，并掌握其使用方法。 3、学习生物图的绘制方法

二、 实验内容

学习普通光学显微镜的使用方法，学会判断是否需要使用油镜，学习理解，学习怎样使用和利用光圈，反光镜，调整反差，使视野达到最好的观察效果。学习使用油镜观察微生物标本示范片。

观察的示范片有，细菌三型涂片、葡萄球菌涂片、枯草芽孢杆菌涂片、褐球固氮菌涂片、八叠球菌涂片、猪链球菌涂片，青霉、曲霉示范片等。

三、 实验器材

显微镜、各种示范片、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。

四、 方法步骤

1 用低倍镜对（调）光，使视野明亮。

2 选择要观察的标本片，首先在低倍镜观察（寻找观察目标）。 3 高倍镜观察（选取理想的观察目标）。

4 油镜观察：高倍镜观察后――上升镜筒（或者是下调载物台）――油镜转至正下方，在载玻片上加一小滴香柏油――小心地下降镜筒使镜头浸在油里――用粗螺旋将镜筒（载物台）缓慢上升，寻找目标（物象）――用细螺旋调节，使物象清晰――观察记录。

5 观察完毕。上升镜筒（或者是下调载物台），转动物镜转换器，使油镜物镜偏位。用干净擦镜纸擦去镜头上的油迹，再取一

实验一 光学显微镜的操作及细菌形态观察

1.1 实验目的

(1) 掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养。 (2) 观察几种典型细菌的形态与构造，学会绘制微生物图。

1.2 实验器材

显微镜、二甲苯、香柏油、载玻片、盖玻片、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、球衣菌、假单胞菌、固氮菌标本片。

1.3 显微镜的结构及其操作方法

1.3.1 普通光学显微镜(Light Microscope) 1.3.1.1 光学显微镜的结构和各部件作用

观察、检验微生物通常用光学生物显微镜（见图1-1），显微镜分机械装置和光学系

统两部分。

一 机械装置

(1) 镜筒：镜筒长度一般是160cm。它的上端装目镜，下端装物镜回转板。回转板上一般有三个物镜。

(2) 转换器：位于镜筒的下方，其上有3个孔，有的有4个孔或5个孔。不同规格的物镜分别安装在各孔上。

(3) 载物台：载物台是放置标本的平台，中央有一圆孔，使下面的光线可以通过。两旁有弹簧夹，用以固定标本或载破片。有的载物台上装有自动推物器。

(4) 调节器：镜筒旁有两个螺旋，大的叫粗调节器，小的叫细调节器，用以升降镜筒，调节物镜与被观察物体之间的距离。

二 光学光学系统

（1）目镜：一般使

环境工程微生物学

绪论

1何谓原核微生物？它包括哪些微生物？

答：原核微生物的核很原始，发育不全，只有DNA链高度折叠形成的一个核区，没有核膜，核质裸露，与细胞质没有明显界限，叫拟核或似核。原核微生物没有细胞器，只有由细胞质膜内陷形成的不规则的泡沫体系，如间体核光合作用层片及其他内折。也不进行有丝分裂。原核微生物包括古菌（即古细菌）、真细菌、放线菌、蓝细菌、粘细菌、立克次氏体、支原体、衣原体和螺旋体。

2何谓真核微生物？它包括哪些微生物？

答：真核微生物由发育完好的细胞核，核内由核仁核染色质。由核膜将细胞核和细胞质分开，使两者由明显的界限。有高度分化的细胞器，如线粒体、中心体、高尔基体、内质网、溶酶体和叶绿体等。进行有丝分裂。真核微生物包括除蓝藻以外的藻类、酵母菌、霉菌、原生动物、微型后生动物等。

3微生物是如何分类的？

答：各种微生物按其客观存在的生物属性（如个体形态及大小、染色反应、菌落特征、细胞结构、生理生化反应、与氧的关系、血清学反应等）及它们的亲缘关系，由次序地分门别类排列成一个系统，从大到小，按界、门、纲、目、科、属、种等分类。种是分类的最小

环境微生物学复习题

一、名词解释

1、发酵作用：是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。 2、农药安全系数：

3、硝化作用：氨基酸脱下的氨，在有氧的条件下，经亚硝化细菌和硝化细菌饿作用转化为硝酸。

4、转导： 通过噬菌体的介导，将供体菌DNA片段带入受体菌中，从而使受体菌获得供体菌的部分遗传性状的过程。普遍性转导和局限性转导。

5、培养基：是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 6、好氧活性污泥：好氧微生物和兼性厌氧微生物（兼有少量厌氧微生物）与其上吸附的有机无机固体杂质组成。

7、质粒：是一种独立于染色体外，能自我复制并稳定遗传的环状DNA分子。 8、P/H指数：是水体中光合自养型微生物（P）与异养型微生物（H）密度的比值。反映水体有机污染和自净的程度。水体刚受有机物污染，异养型微生物大量繁殖，自净速率高，P/H指数低。在自净过程中有机物减少，异养型微生物减少，光合自养型微生物增多，P/H指数升高。自净完成后，P/H恢复到原水平。

9、活性污泥与菌胶团：活性污泥：以好氧性细菌为主体的微生物和水中的悬浮物质、胶体物质混杂一起形成的肉眼可见的絮状颗粒

《环境工程微生物》复习题

1、组成病毒粒子核髓的化学物质是（ 核酸 ）。

2、革兰氏染色的步骤顺序是（ 涂片、初染、媒染、脱色、复染 ）。

3、细菌为单细胞生物，其基本结构有（细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核物质 ）等，部分细菌有特殊结构。（细菌的特殊结构：鞭毛、荚膜、芽孢、菌毛） 4、氧化硫杆菌的培养基为：粉末状硫10g ；KH2PO4 4g ；MgSO4 0.5g；CaCl2 0.5g ；(NH4)2SO4 0.4g 、FeSO4 0.01g；水 1000mL（自来水即可），氧化硫杆菌的营养类型是（化能自养型 ）。

5、光合细菌的概念？是一类在厌氧光照条件下进行不产氧光合作用的原核生物。 6、在沼气发酵的三个阶段的产酸阶段中，主要的微生物群是（酸化菌群 ） 7、制备培养基的最常用的凝固剂为（琼脂 ） 8、蓝细菌和藻类属于（光能自养 ）型的微生物。 9、下列代谢方式中，能量获得最有效的方式是（ B ）。

A、发酵 B、 有氧呼吸 C、无氧呼吸 D、化能自养

10、发生在废水生物处理中微生物反硝化作用的主要产物是（有机氮化物 、N2）同化反硝化作用生成有机氮化物NH4，异化反硝化作用生成N2 ＋11、大肠杆

《环境工程微生物》复习题

1、组成病毒粒子核髓的化学物质是（ 核酸 ）。

2、革兰氏染色的步骤顺序是（ 涂片、初染、媒染、脱色、复染 ）。

3、细菌为单细胞生物，其基本结构有（细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核物质 ）等，部分细菌有特殊结构。（细菌的特殊结构：鞭毛、荚膜、芽孢、菌毛） 4、氧化硫杆菌的培养基为：粉末状硫10g ；KH2PO4 4g ；MgSO4 0.5g；CaCl2 0.5g ；(NH4)2SO4 0.4g 、FeSO4 0.01g；水 1000mL（自来水即可），氧化硫杆菌的营养类型是（化能自养型 ）。

5、光合细菌的概念？是一类在厌氧光照条件下进行不产氧光合作用的原核生物。 6、在沼气发酵的三个阶段的产酸阶段中，主要的微生物群是（酸化菌群 ） 7、制备培养基的最常用的凝固剂为（琼脂 ） 8、蓝细菌和藻类属于（光能自养 ）型的微生物。 9、下列代谢方式中，能量获得最有效的方式是（ B ）。

A、发酵 B、 有氧呼吸 C、无氧呼吸 D、化能自养

10、发生在废水生物处理中微生物反硝化作用的主要产物是（有机氮化物 、N2）同化反硝化作用生成有机氮化物NH4，异化反硝化作用生成N2 ＋11、大肠杆

环境微生物学复习题

一、名词解释

1、发酵作用：是指微生物细胞将有机物氧化释放的电子直接交给底物本身未完全氧化的某种中间产物，同时释放能量并产生各种不同的代谢产物。 2、农药安全系数：

3、硝化作用：氨基酸脱下的氨，在有氧的条件下，经亚硝化细菌和硝化细菌饿作用转化为硝酸。

4、转导： 通过噬菌体的介导，将供体菌DNA片段带入受体菌中，从而使受体菌获得供体菌的部分遗传性状的过程。普遍性转导和局限性转导。

5、培养基：是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。 6、好氧活性污泥：好氧微生物和兼性厌氧微生物（兼有少量厌氧微生物）与其上吸附的有机无机固体杂质组成。

7、质粒：是一种独立于染色体外，能自我复制并稳定遗传的环状DNA分子。 8、P/H指数：是水体中光合自养型微生物（P）与异养型微生物（H）密度的比值。反映水体有机污染和自净的程度。水体刚受有机物污染，异养型微生物大量繁殖，自净速率高，P/H指数低。在自净过程中有机物减少，异养型微生物减少，光合自养型微生物增多，P/H指数升高。自净完成后，P/H恢复到原水平。

9、活性污泥与菌胶团：活性污泥：以好氧性细菌为主体的微生物和水中的悬浮物质、胶体物质混杂一起形成的肉眼可见的絮状颗粒