实验室常用溶液的配制方法

实验室常用溶液的配制

1．30%丙烯酰胺溶液（100ml） 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂（MB-1Mallinckrodt），搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸，因此大于1年的溶液应该被丢弃。 2．40%丙烯酰胺（用于DNA测序，1L） 【配制方法】把380g丙烯酰胺（DNA测序级）和20g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足 至终体积为1L。置棕色瓶中保存于室温

实验室常用溶液及试剂配制

实验室常用溶液、试剂的配制 表一 普通酸碱溶液的配制

名 称 （分子式） 比重 （d） ） ） 盐 酸 （HcL） 硝 酸 （HNO3） 硫 酸 （H2SO4） 冰醋酸 （Hac） 磷 酸 （H3PO4） 氨水（NH3·H2O） 氢氧化钠（NaOH） 氢氧化钾（KOH） 9） 表二 常用酸碱指示剂

指示剂 In 百里酚蓝 （麝香草酚蓝） 甲基橙 3.4 3.1～4.4 红 黄 溴甲酚绿 4.9 3.8～5.4 黄 蓝 0.1%的20%乙醇溶液或0.1g指示剂溶于2.9ml 0.05mol/L NaOH加水稀释至100ml 橙0.05%水溶液 1.65 PKHpH 12.～2.8 变色范围色 红 酸色 黄 0.1%的20%乙醇溶液 碱配 制 方 法 0.90～0.91 0） （330） （240） （173） （12） （11.5） （80） （56（4028 15 400 200 134 77 1.69 85 15 39 19 12 6 1.05 99.9 17 253 177 118 59 1.83～1.84 95～98 18 84 42 28 14 1.39～1.40 65～6

实验室常用溶液及试剂配制

一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1

表一 普通酸碱溶液的配制 表二 常用酸碱指示剂配制 表三 混合酸碱指示剂配制

表四 容量分析基准物质的干燥 表五 缓冲溶液的配制

1、 氯化钾-盐酸缓冲溶液

2、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、 乙酸-乙酸钠缓冲溶液

5、 磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、 硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、 氨水-氯化铵缓冲溶液 8、 常用缓冲溶液的配制

二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4

1、硝酸银（CAgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（CI2=0.1mol/L）标准溶液的配制

3、硫代硫酸钠（CNa2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（CHClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（

分子实验室常用的培养基配方,和SDS-PAGE缓冲液配方。

五、实验室常用培养基的配制方法

Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)

组份浓度 100 mg/ml Ampicillin

配制量 50 ml

配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1 ml/份)后，-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)

组份浓度 24 mg/mL IPTG

配制量 50 mL

配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。

4小份分装(1 ml，份)后，-20℃保存。

X-Gal (20 mg/ml)

组份浓度 20 mg/ml X-Gal

配制量 50 ml

配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺)，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3.小份分装(1 ml/份)后，-20℃避光

蛋白质常用buffer

实验室常用溶液配方

PBS(1×)(1L) 8.0g NaCl

0.2g KCl

1.44g Na2HPO4

(3.6283g Na2HPO4.12H2O

2.716g Na2HPO4.7H2O)

0.24g KH2PO4

80ml H2O

调至pH 7.4, add Milli-Q to 1L

Running Buffer(1×)(1L)

3g Tris

14.4g Gly

1g SDS

Add ddH2O to 1L

Transfer Buffer(1×)(1L)

5,8g Tris

2.9g Gly

0.37 SDS

200ml Methanol

Add ddH2O to 1L

TBE (5×)(1L)

54g Tris

27.5g Boric acid

20ml 0.5M EDTA (pH 8.0)

Add ddH2O to 1L

NP40 Lysis Buffer

5ml 3M NaCl

2.5ml 1M Tris-HCl (pH 6.8)

2.5ml 1M Tris-HCl (pH 8.0)

1ml NP40

Add ddH2O

总RNA的提取（Trizol法提取）

在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。

1. 提取组织RNA时，每50～100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞；

2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放臵5分钟； 3. 在上述EP管中，按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量加入氯仿，盖上EP管盖子，在手中用力震荡15秒，在室温下（15℃～30℃）放臵2～3分钟后，12000g（2℃～8℃）离心15分钟；

4. 取上层水相臵于新EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.5ml异丙醇的量加入异丙醇，在室温下（15℃～30℃）放臵10分钟,12000g（2℃～8℃）离心10分钟； 5. 弃上清，按照每1ml TRIZOL加1ml 75%乙醇进行洗涤，涡旋混合，7500g（2℃～8℃）离

生物实验常用溶液的配制

一、DNA电泳相关：

1、DNA电泳缓冲液：

（1）Tris-乙酸（TAE）缓冲液：TAE较为常用，且价格低，但其缓冲能力较弱。所以TAE电泳需要蠕动泵使两极贮液槽进行液体循环，而且TAE需要经常更新；且要加入EDTA，目的在于鳌合二价离子，抑制DNase，以保护DNA。

① TAE使用液：

1×：40mmol/L Tris-乙酸 1mmol/L EDTA ② TAE贮存液（每L）： 50×：242g Tris碱 57.1ml 冰乙酸

100ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（2）Tris-硼酸（TBE）缓冲液：

① TBE使用液：

0.5×：0.045mol/L Tris-硼酸 1mmol/L EDTA ② TBE贮存液（每L）： 5×： 54g Tris碱 27.5ml 硼酸

20ml 0.5mol/L EDTA（pH8.0）

（3）Tris-磷酸（TPE）缓冲液：

① TPE使用液：

1×：90mmol/L Tris-磷酸 2mmol/L EDTA ② TPE贮

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

1、1M Tris-HCl □组份浓度 1 M Tris-HCl （pH7.4，7.6，8.0） □配制量 1L

□配置方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值 浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL

一.常用贮液与溶液

1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小

份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无

DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存

于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到

100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.

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常用缓冲溶液的配制方法

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1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升

甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）

X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升

邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升

3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液

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Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。

Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，

再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）

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柠檬酸C6H8O7·H