抗氧化活性测定方法及原理

叶绿体的提取

一、试剂配置

1、PBS提取液：每L水依次加入MES(195.2×0.05=9.76g)、山梨糖醇(0.33×182.2=60.126g)、NaCl（0.010×58.5=0.585g）、MgCl（0.002×95=0.19g）、EDTA（292.25×0.002=0.5845g）、KH2PO（0.0005=0.1g）；4200×使用时加入ASA-Na（198.1×0.002=0.3962g）; 2、悬浮液：将PBS提取液中的MES换为238.3×0.05=11.915g的HEPES（238.3×0.05=11.915g）； 3、80%Percol：80ml原液+20ml水；40%Percol：40ml原液+60ml水；

实际配制：

PBS提取液2000ml(3个处理*2个品种*3个重复*20ml*3次=1080ml),

悬浮液100ml（3个处理*2个品种*3个重复*1ml*3次=54ml）;

80%Percol 200ml; 40%Percol 200ml.（3个处理*2个品种*3个重复*3ml*3次=162ml）

二、提取步骤

1、10g鲜样加20ml提取PBS（50mM MES PH6.1，含0.33M山梨糖醇，10

抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法

一、 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法） 1、试剂的配制

（1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：

A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g； B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。

0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。加入10gPVP（聚乙烯吡咯烷酮）

参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。

（2）130mmol/L甲硫氨酸溶液：取1.399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。网上说定容到100ML我也不懂。拜托

（3）100μmol/L EDTA-Na2溶液：取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml； （4）100μM核黄素溶液：取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100m

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抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法

一、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法）

1、试剂的配制

（1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：

A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g；

B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。

分别用蒸馏水定容到1000ml。

0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。加入10gPVP（聚乙烯吡咯烷酮）

参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。

（2）130mmol/L甲硫氨酸溶液：取1.399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。网上说定容到100ML我也不懂。拜托

（3）100μmol/L EDTA-Na2溶液：取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml；

（4）100μM核黄素溶液：取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100ml，避光保存，随用随配

β-胡萝卜素漂白法测定莲子心粗多糖抗脂质

过氧化的活性 30 mL 试管中加入0. 5 mLβ-胡萝卜素(β2caro2

毛头牛蒡子醇提物抗氧化活性研究

目的", 研究毛头牛蒡子提取物的抗氧化活性。方法",将毛头牛蒡子乙醇提取物采用溶剂萃取法, 分成极性不同的

4 个部分, 并采用DPPH 法和邻苯三酚自氧化法测定各部分的清除DPPH 自由基和超氧阴离子自由基的能力, 以测定其抗氧化活性, 并与抗坏血酸进行比较

DPPH 法抗氧化活性分析", DPPH 自由基是一种很稳定的以氮为中心的自由基, 在517 nm 处有强吸收, 其乙醇水溶液呈很深的蓝紫色, 加入受试物后,517 nm 处可以动态监测DPPH 自由基被清除的效果, 这种效果通常用对DPPH 的清除率来表示。清除率越大, DPPH 自由基清除越彻底, 受试物的抗氧化活性越强[ 6",7] 。计算清除率的公式为:

其中, A0 为未加样DPPH 溶液的原始吸

光度; A为加样后DPPH 液的吸光度; A 样为样品溶液自身的吸光度。公式中引入A0 是为了消除样品溶液本身颜色对实验结果的影响。A 0 的测定: 用移液器取2. 0 mL95% 乙醇, 再取2. 0 mL 已配制好的DPPH

研究黑蒜的抗氧化活性。对144只老龄小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(Vc组)、黑蒜低剂量组(65mg/kg)、黑蒜中剂量组(260mg／kg)、黑蒜高剂量组(650mg／kg)、白蒜低剂量组(65mg/kg)、白蒜中剂量组(260mg／kg)、白蒜高剂量(650mg／kg)组等9组,干预30d后,以溴化苯油灌喂小鼠,制造氧化损伤模型后,分别测定小鼠血液、肝脏组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物

5 8

2 0第9第期卷1 0

食B研究与开发氏口盯 n叼丌扶 l

科研学究

黑蒜抗氧化活性研究祝炳俏’吴海歌。刘媛媛。囤景鑫姚子昂 。,。。

(. 1上海小林制药商贸有限公司，上海 2 0 3;. 00 1 2大连大学生物工程学院，辽宁大连 16 2 ) 16 2

摘

要：究黑蒜的抗氧化活性。对 14只老龄小鼠随机分为空白组、型组、研 4模阳性对照组( )黑蒜低剂量 V组、

m(5m#g、 6 e )黑蒜中剂量. 2 0/s、￣ 6 mg )黑蒜高剂量￣ ( 5 g s、 g( k g 6 0m/ )白蒜低剂量￣ ( 5 s s、 k g 6 m/ )白蒜中剂量组 (6 s k 2 om/ k )白蒜高剂量 (5/ g .. 9组， g、 6 0ms )

鹿仙草活性成分提取纯化及抗氧化护肝活性研究

筒鞘蛇菰（Balanophora involucrata Hook.f.）为蛇菰科蛇菰属植物，别名鹿仙草，蛇菰为寄生性草本植物，一年或多年生，无叶绿素和气孔，叶退化呈鳞片状或不存在，无正常根，靠根茎上的吸盘寄生于寄主植物的根上，根茎粗，通常分枝，表面常有瘤或星芒状皮孔，顶端具开裂的裂鞘。其全草入药, 寄主分布于海拔500-2600m的多种林木, 植株大多在中秋前后露出地面, 生长季节性强, 生长期短, 故资源稀少。《本草纲目》将蛇菰以葛菜花之名列入菜部第28卷, 别名葛乳。蛇菰资源分布：分布于福建、湖北、广东、广西、四川、云南等地。具有壮阳补肾，理气健脾，止血生肌，清热解毒的功效。民间常用于治疗阳痿，慢性肝炎，消化道出血，月经过多，遗精，肿瘤等症。

蛇菰的品种来源较多, 采用不同的提取方法和检测手段, 得到的化学成分不尽相同。蛇菰属植物中所含化学成分有很大一部分是三萜类。另外甾醇类、多酚类含量也较多，酚类有许多药理作用。1919年Simon等人从蛇菰中分离出蛇菰素；到1998年，刘锡葵等人正式提出蛇菰素分为蛇菰素A(balanophorin A)和蛇菰素B(balanophorin B)。含

DPPH法测定胡萝卜素的抗氧化活性 毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明

原创性声明

本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得 及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。

作 者 签 名： 日 期： 指导教师签名： 日 期：

使用授权说明

本人完全了解 大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。

作者签名： 日 期：

学位论文原创性声明

本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成

海 南 师 范 大 学

本 科 生 毕 业 论 文

题目：海南热带兰花的抗氧化活性研究

系 别： 化学系 学 院： 化学与化工学院

本科生毕业论文（设计）独创性声明

本人声明所呈交的毕业论文（设计）是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文（设计）中没有抄袭他人研究成果和伪造数据等行为 。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文（设计）中作了明确的说明并表示谢意。

论文（设计）作者签名： 日期：

本科生毕业论文（设计）使用授权声明

海南师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交毕业论文（设计）的复印件和磁盘，允许毕业论文（设计）被查阅和借阅。本人授权海南师范大学可以将本毕业论文（设计）的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存、汇编毕业论文。

论文（设计）作者签名： 日期：

指 导 教 师 签 名： 日期：

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目 录

1 引言

桑枝总黄酮提取分离及抗氧化活性研究

中文摘要

桑树为灌木或落叶乔木，桑属植物体的各个部分在传统医学上均可入药，历代中国药典均收载了桑叶、桑枝、桑白皮、桑椹的药用功效。

桑枝是桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥茎，含有很多生物活性的物质，如黄酮、生物碱、甾体、香豆素、二苯乙烯、萜类化合物等，其中黄酮类化合物具有抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤等广泛的生物活性，但尚未得到有效利用。本文以桑枝为原料，对桑枝总黄酮的提取分离纯化及抗氧化活性等方面作了较为系统的研究，主要研究内容和实验结果如下：

1 桑枝皮总黄酮提取工艺的研究

本实验考察了提取时间、乙醇浓度、料液质量浓度及温度对总黄酮提取效果的影响，在此基础上利用正交试验，采用极差和方差分析法确定了总黄酮的最佳提取工艺条件：温度为80℃、料液质量浓度33g/L、乙醇体积分数70%、浸提时间2h。在该条件下，其提取率可达1.01%。

2 桑枝总黄酮的分离纯化

本实验研究了聚酰胺分离纯化桑枝总黄酮的静态吸附和动态吸附的技术参数，聚酰胺树脂静态吸附静态吸附桑枝总黄酮上样量为1：274g/g（净黄酮量：树脂量），动态吸附上样

桑枝总黄酮提取分离及抗氧化活性研究

中文摘要

桑树为灌木或落叶乔木，桑属植物体的各个部分在传统医学上均可入药，历代中国药典均收载了桑叶、桑枝、桑白皮、桑椹的药用功效。

桑枝是桑科桑属植物桑Morus alba L.的干燥茎，含有很多生物活性的物质，如黄酮、生物碱、甾体、香豆素、二苯乙烯、萜类化合物等，其中黄酮类化合物具有抗氧化、抗突变、抗衰老、抗肿瘤等广泛的生物活性，但尚未得到有效利用。本文以桑枝为原料，对桑枝总黄酮的提取分离纯化及抗氧化活性等方面作了较为系统的研究，主要研究内容和实验结果如下：

1 桑枝皮总黄酮提取工艺的研究

本实验考察了提取时间、乙醇浓度、料液质量浓度及温度对总黄酮提取效果的影响，在此基础上利用正交试验，采用极差和方差分析法确定了总黄酮的最佳提取工艺条件：温度为80℃、料液质量浓度33g/L、乙醇体积分数70%、浸提时间2h。在该条件下，其提取率可达1.01%。

2 桑枝总黄酮的分离纯化

本实验研究了聚酰胺分离纯化桑枝总黄酮的静态吸附和动态吸附的技术参数，聚酰胺树脂静态吸附静态吸附桑枝总黄酮上样量为1：274g/g（净黄酮量：树脂量），动态吸附上样