pcr核酸检测测试题

新冠病毒核酸检测培训测试

单选题:1. 根据目前掌握的新型冠状病毒生物学特点、流行病学特征、致病性、临床表现等信息，该病原体暂按照病原微生物危害程度分类中（）类病原微生物进行管理？

A. 第一

B. 第二

C. 第三

D. 第四

单选题:2. 可以进行新型冠状病毒检测标本采集人员为

A. 经过生物安全培训，培训合格且具备采样技能的人员

B. 医生

C. 研究所科研人员

D. 实验室管理人员单选题:3. 新型冠状病毒检测标本首选?

A. 呼吸道标本

B. 便标本

C. 尿液

D. 结膜拭子标本

单选题:4. 新型冠状病毒感染的特异性检测不包括

A. 核酸检测

B. 病毒分离

C. 抗体检测

D. 生化检测单选题:5. 抗体检测最好选用?

A. 发病早期血清

B. 空腹血

C. 恢复期血清

D. 发病早期、恢复期双份血清

单选题:6. 新型冠状病毒核酸检测技术不包括

A. 高通量测序

B. 荧光RT-PCR

C. 数字PCR技术

D. 病毒分离

单选题:7. 以下哪个条件不能确认新型冠状病毒感染? D

A. 同一份标本中新型冠状病毒2 个靶标（ORF1ab、N）实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性

B. 两种标本实时荧光RT-PCR检测同时出现单靶标（ORF1ab 或N）阳性

C. 同种类型标本两次采样检测重

核酸提取对临床荧光PCR检测质量的影响因素

中国人民解放军第302医院 王海滨

一、临床分子生物学检验面临的问题与挑战

（一）国家药监局审评中心新行规：核酸提取是关键！ 1. HBV DNA 敏感性报告 <30IU/ML ，防止实验室污染问题！ 2. 标本加样量不少于 200 微升；干扰与敏感性的矛盾！ 3. 核酸加样量不少于 20 微升、反应体积不少于 40 微升！ 4. 磁珠法应用的挑战！血站核酸筛查？ 5. 定量内标漂移对结果的影响

6. 试剂盒考核：增加抗污染和敏感性能评价指标！ （二）不同核酸提取方法对检测质量的影响

影响核酸提取的因素有很多，以磁珠法、层析柱法、碱性裂解法及生物合成材料进行比较。 标本： 200 微升血清

方法：磁珠法：市场销售试剂盒，介质为胍盐、乙醇； 层析柱法：市场销售试剂盒，介质为胍盐、乙醇； 碱性裂解法： PEG 介导； 生物合成材料：无胍、无醇。

PCR 扩增：取等体积提取核酸或磁珠悬液（ 10 微升），同一 PCR 扩增液。

我们采用四种方法材料进行同一样本核酸提取，然后采用统一试剂对相同提取核酸进行 PCR 扩增，结果差别非常大，磁珠法和层析柱法基本差不多，层析柱法稍微滞后于磁珠法，碱性裂解法最差，而且 100IU 无结果。复合材料的敏感性，是磁珠法或层析柱法的 30 倍左右。

过去，我们对荧光 PCR 试剂或分子生物学试剂，往往关注扩增部分，而把提取部分忽视了，现在来看，提取部分也非常重要。 二、临床实验室核酸制备方法分类 （一）临床

核酸提取对临床荧光PCR检测质量的影响因素

中国人民解放军第302医院 王海滨

一、临床分子生物学检验面临的问题与挑战

（一）国家药监局审评中心新行规：核酸提取是关键！ 1. HBV DNA 敏感性报告 <30IU/ML ，防止实验室污染问题！ 2. 标本加样量不少于 200 微升；干扰与敏感性的矛盾！ 3. 核酸加样量不少于 20 微升、反应体积不少于 40 微升！ 4. 磁珠法应用的挑战！血站核酸筛查？ 5. 定量内标漂移对结果的影响

6. 试剂盒考核：增加抗污染和敏感性能评价指标！ （二）不同核酸提取方法对检测质量的影响

影响核酸提取的因素有很多，以磁珠法、层析柱法、碱性裂解法及生物合成材料进行比较。 标本： 200 微升血清

方法：磁珠法：市场销售试剂盒，介质为胍盐、乙醇； 层析柱法：市场销售试剂盒，介质为胍盐、乙醇； 碱性裂解法： PEG 介导； 生物合成材料：无胍、无醇。

PCR 扩增：取等体积提取核酸或磁珠悬液（ 10 微升），同一 PCR 扩增液。

我们采用四种方法材料进行同一样本核酸提取，然后采用统一试剂对相同提取核酸进行 PCR 扩增，结果差别非常大，磁珠法和层析柱法基本差不多，层析柱法稍微滞后于磁珠法，碱性裂解法最差，而且 100IU 无结果。复合材料的敏感性，是磁珠法或层析柱法的 30 倍左右。

过去，我们对荧光 PCR 试剂或分子生物学试剂，往往关注扩增部分，而把提取部分忽视了，现在来看，提取部分也非常重要。 二、临床实验室核酸制备方法分类 （一）临床

第二章 核 酸

一．填空：

1.无论DNA还是RNA都是由许许多多（ ）通过（ ）连接而成的。 2.（ ）是RNA中才有的含氮碱基。 3.（ ）是DNA中才有的含氮碱基。 4.核酸的结构单位是（ ）。

5.tRNA上的（ ）可以识别mRNA上的密码子。 6. ( )是分子量最小的一类RNA。 7. DNA中( )与胞嘧啶以1?1的比例存在。

8. DNA能形成双螺旋的作用力是( )。 9.1953年( )和( )提出DNA的双螺旋结构模型。 10.双螺旋的每一转有( )对核苷酸.每转高度为( )nm.。 11.tRNA的3′一端都含有( )三个核苷酸具有（ ）作用。 12.在左旋DNA中主链呈Ｚ字形左向盘绕.直径约为（ ）埃．螺距（ ）埃。 螺旋的每一转含（ ）个碱基对.整个分子比较细而伸。．

13.Ｔm值常用于DNA的碱基组成分析.在标准条件下(pH7.0 0.165M ?L ΝаCl中)(G-C)%=(

核酸的分子杂交技术

一、核酸分子杂交

用标记的已知DNA或RNA片段（探针）来检测样品中未知核酸序列，通过核苷酸间碱基互补的原则发生异源性结合，再经显影或显色的方法，将结合核酸序列的位置或大小显示出来。

待测的核酸序列，可以是克隆的基因片段，也可以是未克隆化的基因组DNA和组织细胞的RNA。

二、核酸分子杂交的分类

液相杂交

核算分子杂交 印记杂交

固相杂交

原位杂交

1.固相杂交：将需要杂交的一条核酸链先固定在固体支持物上，另一条核酸链游离在液体中。 2.液相杂交：参与反应的两条核酸链都游离在液体中。

常用固相杂交类型：Southern印迹杂交、Northern印迹杂、菌落原位杂交、斑点杂交、狭

缝杂交、组织原位杂交、夹心杂交等。

三、核酸分子杂交的基本原理 1、变性：

在某些理化因素的作用下，核酸双链分子碱基对的氢键断裂，疏水作用被破坏，双链螺旋或发夹结构被拆开，有规则的空间结构被破坏，形成单链分子，称为核酸的变性。

﹡引起核酸变性的因素：热、酸、碱、化学试剂（如：尿素、甲酰胺、甲醛等）。 ﹡加热变性是最常用的方法，一般加热80-100℃数分钟即可使核酸分子氢键断裂，双链分开。

﹡变

试验检测试题（矿物掺合料试验）

一、填空题（15题）

1、混凝土的总碱含量包括水泥、矿物掺合料、外加剂及水的碱含量之和。其中，矿物掺合料的碱含量以其所含可溶性碱计算。粉煤灰的可溶性碱量取粉煤灰总碱量的1/6，矿渣粉的可溶性碱量取矿渣总碱量的1/2，硅灰的可溶性碱量取硅灰总碱量的1/2。

2、按TB10424规范中要求，预应力混凝土中粉煤灰的掺量不宜大于30%。 3、拌制混凝土和砂浆用的粉煤灰一般分为F类粉煤灰和C类粉煤灰。 4、胶凝材料是指用于配制混凝土的水泥与粉煤灰、磨细矿渣粉和硅灰等活性矿物掺和料的总称。水胶比则是混凝土配制时的用水量与胶凝材料总量之比。 5、测定试验样品和对比样品的流动度，两者流动度之比评价矿渣粉的流动度比。 6、矿渣粉活性指数试验是分别测定对比胶砂和试验胶砂的7d和28d抗压强度。 7、粉煤灰用于混凝土中有四种功效 火山灰效应、形态效应、微集料效应、稳定效应。

8、粉煤灰的需水量比对混凝土影响很大除了强度外，还影响流动性和 早期收缩，因此做好需水量比为混凝土试配提供依据。

9、测定试验样品和对比样品的抗压强度，采用两种样品同龄期的抗压强度之比来评价矿渣粉的活性指数。

10、矿渣粉28d活性指数计算，计算结果保留至整数。

试验检测试题（路基检测）

一、填空题

1、高速铁路路基的设计理念由原来的以( 强度 )控制逐步转变为以( 变形 )控制,严格控制路基( 沉降 )。

2、土颗粒分析试验常用的方法包括（筛析法）、（密度计法）、（移液管法）。

3、搓条法塑限试验中，当土条直径搓成（ 3mm ）时产生裂缝，并开始断裂，表示试样的含水率达到塑限含水率。

4、库仑公式s=c+σtgφ中，c指土的（粘聚力），φ指土的（内摩擦角）。

5、一般情况下，土是由（土粒）、（水）、（空气）三相组成。

6、液限是土的可塑状态的(上限)含水量, 塑限是土的可塑状态的(下限)含水量。

7、击实试验的目的是求取土的（最大干密度）和（最佳含水量）。 8、评价土的级配指标有（不均匀系数）和（曲率系数），前者的定义式为（Cu=d60/d10 ），后者的定义式为（Cc=d230/(d60·d10)）。

9、填料改良应通过试验提出最佳（掺合料）、最佳（配合比）及改良后的（强度）等指标。

10、现场原位测试常用的方法有：静力载荷试验、（静力触探试验）、（动力触探试验）、（标准贯入试验）、十字板剪切试验。

11、K30作为一种抗力指标，能够直观地表征路基（刚度）和（承载能力）。

12、反映土体动态特性的

一、 实验室的基本情况

医院是一间二级综合医院， 在 2020 年 6 月 16 日取得 临床基因扩增实验室资质， 本实验室具有生物安全二级以上实验室。 在 2020 年 6月 30 日在病原微生物实验室信息管理系统进行二级实验室的备案。目前实验室检测人员共 6 人， 其中副高职称有 2 人， 中级职称有 2 人，初级职称有 2 人， 有 2 人用两周时间到肇庆市疾病预防控制中心学习PCR 检测技术， 有 4 人用一周时间到肇庆市第一人民医院学习 PCR 检测技术。 实验室检测人员 6 人当中， 肇庆市鼎湖区人民医院有 4 人，外院 2 人， 全部都参与了国家和广东省核酸检测技术线上培训的课程并通过线上考核取得了 PCR 上岗证。 目前共检测 7105 例样本， 单日最大核酸检测人数 300 人， 每天分三班次检测， 分别为早上一班， 下午一班， 晚上一班。 实验的仪器设备有—25 度医用冰箱一台， —86度超低温冰箱一台， 荧光定量 PCR 仪器一台， 全自动核酸提取仪一台，B2 型生物安全柜一台， 冷冻离心机 24 孔一台， 高速离心机 24 孔一台， 移动紫外消毒车三台， 电热恒温振荡水槽一台， 迷你八联管离心机一台。 立式灭菌器一台，

卷号试学 准 标 院 学 子 电 与 理 物 名 姓 线 业 专 封 级 年 密

河南大学物理与电子学院200 -200 学年第 学期期末考试 光电检测技术题库试卷（一）参考答案 考试方式：闭卷 考试时间：120分钟 卷面总分：100分 题 号 一 二 三 四 总成绩 合分人 得 分 题 号 一 二 三 总成绩 合分人 一. 单项选择题（每题只有一个正确选项，每小题21. 分 分,共40分） 任何温度下对任何波长的入射辐射能的吸收比都等于1，称为（ A ）. A ．黑体分 B．灰体C．黑洞 D．绝对黑体 2．半导体中施主能级的位置位于（ A ）中. A. 禁带 B. 价带C. 导带 D. 满带

3．在给定λl～λ2波长范

卷号试学 准 标 院 学 子 电 与 理 物 名 姓 线 业 专 封 级 年 密

河南大学物理与电子学院200 -200 学年第 学期期末考试 光电检测技术题库试卷（一）参考答案 考试方式：闭卷 考试时间：120分钟 卷面总分：100分 题 号 一 二 三 四 总成绩 合分人 得 分 题 号 一 二 三 总成绩 合分人 一. 单项选择题（每题只有一个正确选项，每小题21. 分 分,共40分） 任何温度下对任何波长的入射辐射能的吸收比都等于1，称为（ A ）. A ．黑体分 B．灰体C．黑洞 D．绝对黑体 2．半导体中施主能级的位置位于（ A ）中. A. 禁带 B. 价带C. 导带 D. 满带

3．在给定λl～λ2波长范