2‰CTAB提取液的配制

胎盘提取液调研报告

胎盘作为维持胎儿在母体内生长发育的临时性器官，因其特殊的屏障功能与内分泌功能，自古以来就为人们所重视。中医将经过简单的加工炮制后的人胎盘称为“紫河车”，《本草纲目》称其具有“安神养血、补气、益精、解毒、补血”的作用，对“疲劳、消瘦、衰弱者”有奇效，“久服者， 耳聪目明， 须发黑， 延年益寿， 有夺造化之功”。此后的中医古籍中均将其作为入药上品，并沿用至今。近年来，人们对胎盘的研究逐步深入，已由过去单一的人胎盘研究扩展到羊、牛、猪、鹿等动物的胎盘，在加工上也由简单的烘干与水煮发展到生物萃取，使人们对胎盘所含的有益成分及生物活性物质有了更深入的了解。刘淑兰等认为，胎盘含有蛋白质、多肽、促性腺激素、催乳素、溶菌酶、多糖、尿激酶及多种矿物元素和维生素等，具有促生长、抗氧化、抗衰老、催乳、提高免疫功能等多种作用。通过对人、动物胎盘中有效成分的对比研究表明，同属于哺乳动物的这两种胎盘无论在治疗上还是在美容、保健食品上的效果均无明显的差异。

目前我国市面上有很多种类的胎盘类提取物（包括羊、牛、猪、鹿等动物的胎盘），主要用在保健食品和美容产品上。我们所说的胎盘提取液一般指人胎盘提取液，主要多用在美容化妆品行业当中。很多资料显示胎盘提取液是

篇一：第2章习题集参考答案

第二章 化妆品的基本知识

一、选择题

1、乳液是（ A）。

A、由二种在正常情况下不能混合的物质称为一种同质混合物

B、由相同浓度的物质或液体形成同质的凝胶团

C、由二种同样浓度的液体混合成一种液体

D、固体混合物被幼细的分解成有如同质的物质

2、水在油中（乳液）的主要成分是（ B）。

A、水

B、油

C、小苏打

D、乳化剂

3、以下哪一项成分具有润滑皮肤的作用（ D）。

A、金缕梅

B、蒸馏水

C、乙基酒精

D、杏仁油

4、以下哪一种物质具有吸引水分的能力（ D ）。

A、金缕梅

B、苯酚

C、硼酸

D、致湿物

5、取自绵羊脂肪的产品的名词是（ B ）。

A、皮脂

B、羊皮脂

C、胆固醇

D、蜂王凝胶精华

6、海藻应用在美容品内，因为它（ A）。

A、对皮肤有滋润的效果

B、增加皮肤的色素

C、减轻炎症

D、用在皮肤有消毒效果

7、氨基酸使用在化妆品上，因为它能（ A ）。

A、滋润皮肤

B、增加皮肤的色素

C、有除臭的作用

D、减少皮肤色素

8、尿囊素应用在化妆品上，因为（ C ）。

A、它能去除皮肤上多余的油脂

B、它是一种除臭剂

C、给于皮肤光泽的效果

D、它有治愈的作用

9、天然保湿因子（ A）。

A、含有氨基酸

B、从胎盘素取得

C、含山梨醇

D、含二羟丙酮

10、金缕梅应用在化妆

CTAB法提取DNA法试剂配制方法

1、1M Tris-HCl 1L配制量

配制方法 称量121.1g Tris 置于1L烧杯中。

加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓盐酸

7.4 70ml

7.6 60ml

8.0 42ml

将溶液定容到1L。

高温高压灭菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却后加调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、10×TE Buffer 1L配制量

配制方法 量取下列溶液，置于1L 烧杯中

1M Tris-HCl Buffer (pH= ) 100ml 500mM EDTA (pH 8.0)

2×CTAB法植物总DNA提取

1. 液氮研磨1g左右的植物组织，转移到离心管中。改用研磨枪在冰上研磨，不加β-巯基乙醇

研磨时可加入适量的PVP、β-巯基乙醇。若CTAB准备2-3天内用完，则可将PVP、β-巯基乙醇直接加入其中。

2. 加入500μl的2*CTAB (60℃或65℃预热) ,颠倒混合均匀后在60℃或65℃水浴30m-1h小时,其间要上下颠倒混匀数次。

3.取出离心管，加入等体积的24：1（三氯甲烷：异戊醇），上下颠倒充分混合。 若量多，则可以直接侧立于摇床上晃动10分钟。

4.12000转速离心5-10min。将离心管动作轻缓的取出转子，放置于离心管架上。 a.离心后溶液分三层：上层为水相；中层为碎片和蛋白相；底层为氯仿 b.迅速进入下一步，以免各相混合

5.用移液枪吸取管中上层水相，动作一定要轻缓，不可搅动其它两层。 a.此步骤要宁舍不贪多，尽量避免吸取到下层液体。

b.若上步骤中中间层较厚，则继续加入等体积24：1，再次抽提一次，直至中间层较薄。 6. 在抽提出的水相中加入1/3体积的5M的KAc及等体积的异丙醇（4℃预冷），轻轻晃动混合均匀后在-20℃沉淀。沉淀至少15分钟至过夜。

6-1 在抽提出的水

CTAB方法提取RNA

叶片RNA的提取

（1）取叶片材料两克，液氮中研磨成细粉末。

（2）每管加入10ml65℃预热的CTAB提取液和500 l β-巯基乙醇，剧烈涡旋匀浆，65℃水浴温育30min。

（3）每管加入10ml氯仿：异戊醇（24：1），涡旋混匀，冰浴10min。4℃，12000rpm离心10min。

（4）取上清，加入1∕3体积的8M LiCl和500 l β-巯基乙醇，-20℃沉淀过夜。

（5）4℃，12000rpm离心20min。

（6） 弃上清，沉淀用4ml异硫氰酸胍变性液溶解，加入120 l β-巯基乙醇和880 l 2M Na Ac (pH4.0),混匀后加入5ml的酚：氯仿：异戊醇（25：24：

1）， 涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（7）取上清，加入等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（8）取上清，加入等体积氯仿：异戊醇（24：1），涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（9）取上清，加入1∕10体积的3M NaAc(pH5.2)和2.5倍体积的无水乙醇，-20℃放置过夜。

（10）4℃，14000rpm离心

主要试剂的配制

参考（美）萨姆布鲁克（Sambrook，J.）等.分子克隆实验指南（下册）配置如下[94]：

（1）0.5 mo1/L EDTA(pH 8.0)：称取EDTA-Na2 18.61 g，加80 mL双蒸水，磁力搅拌器上剧烈搅拌。加入7 mL 10 mo1/L NaOH调至pH 8.0再用双蒸水定容到100 mL，在1.03×105Pa下高压灭菌20 min。

（2）5 mol/L NaCl溶液：称取NaCl 29.22 g，溶解于90 mL的双蒸水，加热到80℃溶解，冷却，再用双蒸水定容100 mL，在高压灭菌20 min。

（3）10 mol/L NaOH溶液：称取40.00 g NaOH溶于80 mL的双蒸水，搅拌，定容到100 mL。 （4）1 mol/L Tris-HC1溶液(pH 8.0)：称取12.114 gTris碱，溶于80 mL的双蒸水，加入浓HC1 4.2 mL，调整PH值到8.0，加水定容到100 mL，高压灭菌20min。 （5）10%CTAB（m/v）：称取CTAB 10.00 g，溶解于80 mL的双蒸水，加热促进溶解，加双蒸水定容到100 mL，室温保存。

（6）5 mo1/L KAc溶液(pH 4

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起 草： 日期： 批 准： 日期： 拷贝号： 变更记载： 修订号 00 01 02 批准日期 2001年5月2日 审 核： 日期： 生效日期： 签字： 制定（变更）原因及目的： 生效日期 2001年5月10日 公司更名。 生产技术部 [ ]份 质量部QA [ ]份 质量部QC [ ]份 一 车 间 [ ]份 二 车 间 [ ]份 三 车 间 [ ]份 分发部门 设备动力科 [ ]份 物 控 部 [ ]份 总 经 办 [ ]份 综 合 部 [ ]份 滴定液与标准液配制SOP

1. 适用范围：滴定液、标准液配制 2. 职责

检验员：严格按SOP进行操作。 3. 滴定液与标准液配制通则

3.1.仪器与用具：十万分之一电子分析天平、恒温干燥箱、滴定管（经校正）、移液管（经校正）、容量瓶（经校正）。

3.2.基本要求：室温为10～30℃，称量与计算时有效数保留5位，但最终保留4位有效数， 滴定时滴定液消

标准滴定液配制与标定讲义

1目的:制定滴定液的配制、标定、使用、储存等方法，规范滴定液的管理。

2 范围:所有在容量分析中用于滴定被物质含量的标准溶液的配制、标定、使用、储存 等。

3责任人:滴定液配制人员。 4内容: 4.1简述

4.1.1滴定液系指在容量分析中用于滴定被测物质含量的标准溶液，具有准确的浓度。 4.1.2滴定液的浓度以“mol/L”表示，其基本单元应根据药典规定。

4.1.3滴定液的浓度值与其名义值之比，称为“F”值常用于容量分析中的计算。 4.1.4本法适用于中国药典2000年版二部附录“滴定液”的配制与标定。 4.2仪器与用具 4.2.1分析天平

其分度值应为0.1mg或小于0.1mg;毫克组砝码需经校正,并列有校正表备用。 4.2.2滴定管

10、25和50ml滴定管应经校正。 4.2.3移液管

10、15、20和25ml移液管应经校正。 4.2.4量瓶

250ml和1000ml量瓶应符合国家A级标准，或附有校正值。 4.3试药与试液

4.3.1均应按照中国药典附录“滴定液”项下的规定取用。 4.3.2基准试剂应有专人负责保管与领用。 4.4配制

滴定液的配制方法有间接配制法与直接配制法两种，应根据规定选用，并应遵循下

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起 草： 日期： 批 准： 日期： 拷贝号： 变更记载： 修订号 00 01 02 批准日期 2001年5月2日 审 核： 日期： 生效日期： 签字： 制定（变更）原因及目的： 生效日期 2001年5月10日 公司更名。 生产技术部 [ ]份 质量部QA [ ]份 质量部QC [ ]份 一 车 间 [ ]份 二 车 间 [ ]份 三 车 间 [ ]份 分发部门 设备动力科 [ ]份 物 控 部 [ ]份 总 经 办 [ ]份 综 合 部 [ ]份 滴定液与标准液配制SOP

1. 适用范围：滴定液、标准液配制 2. 职责

检验员：严格按SOP进行操作。 3. 滴定液与标准液配制通则

3.1.仪器与用具：十万分之一电子分析天平、恒温干燥箱、滴定管（经校正）、移液管（经校正）、容量瓶（经校正）。

3.2.基本要求：室温为10～30℃，称量与计算时有效数保留5位，但最终保留4位有效数， 滴定时滴定液消

标准缓冲液的配制及常用数据 2004.11

标准缓冲液的配制及常用数据

一、标准缓冲液pH值与温度对照表

温度 四草酸氢钾 邻苯二甲酸氢钾 混合磷酸盐 硼砂 ℃ 0.05M 0.05M 0.025M 0.01M 5 1.67 4.00 6.95 9.39 10 1.67 4.00 6.02 9.33 15 1.67 4.00 6.90 9.28 20 1.68 4.00 6.88 9.23 25 1.68 4.00 6.86 9.18 30 1.68 4.01 6.85 9.14 35 1.69 4.02 6.84 9.11

二、常用缓冲溶液的配制方法

1． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）

X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 2.0 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mo