兽药残留的酶联免疫吸附实验

畜产品中兽药残留的原因及危害

[摘要] 造成动物性食品兽药残留超标的主要原因是非法使用违禁药物，滥用抗菌药物和药物添加剂，超量用药，不遵守休药期的规定；另外原因有环境污染导致药物残留，法律滞后，监管不力等。动物性食品中药物残留，可能会引起人体的急性中毒、各种慢性中毒、蓄积毒性，如过敏反应、三致作用、免疫毒性、发育毒性以及激素样作用；细菌耐药性增加；给环境造成影响等。

[关键词] 兽药残留、原因及危害。

引言

一、 兽药残留的原因

二、 兽药残留的危害

结束语

参考文献

引言

兽药残留又称药物残留，是指给畜禽等动物使用药物后蓄积或贮存在动物细胞、组织和器官内。发达国家很早就开始关注兽药残留问题。大多数国家在评价和使用添加剂时均以JECFA(食品添加剂联合专家委员会)的建议作为指导原则。JECFA是一个毒理学的国际专家小组，此小组在1987年第32次会议报告了有关兽药残留的毒性评价，并把目前的兽药残留分为7类:抗生素类、驱肠虫药类、生长促进剂类、抗原虫药类、灭锥虫药类、镇静剂类和β-肾上腺素能受体阻断剂。

随着我国经济的快速稳定增长，人民生活水平不断提高，人们对食物消费的档次要求也越来越高。消费无公害的安全食品，已成为21

动物性食品中兽药最高残留限量 发布日期：2002-12-24 实施日期： 2002-12-24 有效状况： 已实施 发布部门： 农业部 代号： 农业

部公告第235号

为加强兽药残留监控工作，保证动物性食品卫生安全，根据《兽药管理条例》规定，我部组织修订了《动物性食品中兽药最高残留限量》，现予发布，请各地遵照执行。自发布之日起，原发布的《动物性食品中兽药最高残留限量》（农牧发〔1999〕17号）同时废止。

二OO二年十二月二十四日

附录1：动物性食品中允许使用，但不需要制定残留限量的药物

药物名称：乙酰水杨酸，氢氧化铝，双甲脒，氨丙啉，安普霉素，阿托品，甲基吡啶磷，甜菜碱，碱式碳酸铋，碱式硝酸铋，硼酸及其盐，咖啡因，硼葡萄糖酸钙，泛酸钙，樟脑，氯己定，胆碱，氯前列醇，癸氧喹酯，地克珠利，肾上腺素，马来酸麦角新碱，乙醇，硫酸亚铁，氟氯苯氰菊酯，叶酸，促卵泡激素（各种动物开然FSH及其化学合成类似物），甲醛，戊二酣，垂体促性腺激素释放激素，绒促性素，盐酸，氢化可的松，过氧化氢，碘和碘无机化合物，碘化钠和钾，碘酸钠和钾，碘附包括；聚乙烯吡咯烷酮碘，碘有机化合物；碘仿，右旋糖酐铁，氯胺酮，乳酸，利多卡因，促黄体激素（各种动物天然FSH及其化学合成类似物

实验九 吸附

一、实验目的

1、 了解吸附剂的吸附性能和吸附原理； 2、 测定吸附等温线。

二、实验水样与吸附剂

水样采用一定浓度的自配有机物溶液（如浓度为100mg/L的苯酚溶液）。选定某有机物之前首先需确定该有机物浓度的分析方法。

吸附剂为活性炭，有粉末、粒状和柱状等多种形式。粉末活性炭的制备过程如下：吸附剂经磨细（一般采用通过0.1mm筛孔以下的粒径）、水洗后，分别配制成80目和200目，在110℃下干燥（烘干1小时）后备用。

三、实验方法

在恒定温度下，于几个烧杯中加入V（L）溶质浓度为C0（mg/L）的水样，在各烧杯中同时投加不同量m（mg）的活性炭，分别进行搅拌，搅拌时间等于接触时间。试验过程中，不断测定各杯水样中的溶质浓度C1，直到溶质浓度不变的平衡浓度Ce（mg/L）为止。由试验结果可以算出单位重量活性炭可吸附的溶质量，即为吸附容量： V(C0?Ce)x?(mg/mg) mm由吸附容量xm和平衡浓度Ce的关系所绘出的曲线为吸附等温线，表示吸附

等温线的公式为吸附等温式。

1x最常用的吸附等温式是弗兰德利希（Freundich）经验公式：?KCen。在

m双对数坐标纸上，以吸附容量为纵坐标，Ce为横坐标，按静态烧杯实验结果绘图，可

食品中农兽药残留快速检测技术研究进展

食品是人类生存的必需品，食品安全关系着人类身体的基本安全。在市场经济的背景下，许多商家为达到利益最大化，不惜采取一些违规违法的手段来降低成本。众多问题食品安全之一的农兽药不规范使用成为重灾区。根据全国食品样品监督抽检通告显示2017年第二季度食品中农兽药残留指标不合格问题占不合格总数的22.0%，比一季度高7.0个百分点，其趋势并不乐观。因此，为了加强食品安全监管，保证食品的质量安全，保护消费者的生命健康，研究快速、简单、高灵敏度、大批量检测食品的农兽药残留检测方法具有重要意义。

快速检测技术概述

食品安全快速检测技术是指在对食品进行检测时，一般实验室快速检测要求包括样品制备在内，能够在2小时以内出具检测结果；现场快速检测能在30分钟内出具检测结果。现有的实验室精密仪器分析方法准确度、灵敏度很高，稳定性好，但是检测成本高，对检测人员要有完整的系统的培训和经验要求，尤其对检测环境要求严苛，检测时间过长，无法满足大批量样品现场快速检测的需求。因此，快速?z测技术以其检测速度快、时间短、成本低、对检测人员要求低等

特点，正逐渐成为食品安全检测中的主流技术。 常用快速检测技术

酶抑

硝基呋喃类兽药残留检测中LC-MSMS技术的应用研究 摘要：目的：运用LC-MS/MS技术对硝基呋喃类兽药——呋喃它酮进行研究分析，探讨其药物残留。方法：采用LC-MS/MS技术检测鸡肉中呋喃它酮代谢物的残留。结论：LC-MS/MS 法的检测限可以达到0.1μg/kg，LC-MS/MS 法的平均回收率为89.5%～92.3%，变异系数为8.0%～10.3%，该方法适用于对筛选样品中呋喃它酮代谢物的确证和精确定量。

关键词：液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS） 呋喃它酮 残留检测

硝基呋喃类药物的毒性和副作用较大，就连其代谢物含有很大的毒性。早在上世纪，都已经禁止在食用动物中添加、使用硝基呋喃类药物。我国农业部也在193号报告中对硝基呋喃类药物（呋喃唑酮和呋喃它酮）做了禁止说明，严禁其在食用动物中的使用。硝基呋喃类药物在动物体内具有代谢快等特点，因此检测难度相当的大。并且此类药物的代谢物能够和动物体内蛋白质发生化学反应，形成结合物，同时结合物会长期的存在于动物体内，情况较稳定，不易发生质变。所以，目前检查硝基呋喃类药物在动物体内是否残留合格，多采用其代谢物进行检测。该文运用LC-MS/MS法对选取的鸡肉样品进行检测，并且检测表明LC-MS

硝基呋喃类兽药残留检测中LC-MSMS技术的应用研究 摘要：目的：运用LC-MS/MS技术对硝基呋喃类兽药——呋喃它酮进行研究分析，探讨其药物残留。方法：采用LC-MS/MS技术检测鸡肉中呋喃它酮代谢物的残留。结论：LC-MS/MS 法的检测限可以达到0.1μg/kg，LC-MS/MS 法的平均回收率为89.5%～92.3%，变异系数为8.0%～10.3%，该方法适用于对筛选样品中呋喃它酮代谢物的确证和精确定量。

关键词：液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS） 呋喃它酮 残留检测

硝基呋喃类药物的毒性和副作用较大，就连其代谢物含有很大的毒性。早在上世纪，都已经禁止在食用动物中添加、使用硝基呋喃类药物。我国农业部也在193号报告中对硝基呋喃类药物（呋喃唑酮和呋喃它酮）做了禁止说明，严禁其在食用动物中的使用。硝基呋喃类药物在动物体内具有代谢快等特点，因此检测难度相当的大。并且此类药物的代谢物能够和动物体内蛋白质发生化学反应，形成结合物，同时结合物会长期的存在于动物体内，情况较稳定，不易发生质变。所以，目前检查硝基呋喃类药物在动物体内是否残留合格，多采用其代谢物进行检测。该文运用LC-MS/MS法对选取的鸡肉样品进行检测，并且检测表明LC-MS

低温物理吸附实验

1．实验目的

（1）了解2020型物理吸附仪的功能、原理及用途 （2）掌握仪器的实际操作过程、软件使用方法 （3）学习分析实验结果和数据 2． 方法原理

低温吸附法测定固体比表面和孔径分布是依据气体在固体表面的吸附规律。在恒定温度下，在平衡状态时，一定的气体压力，对应于固体表面一定的气体吸附量，改变压力可以改变吸附量。平衡吸附量随压力而变化的曲线称为吸附等温线，对吸附等温线的研究与测定不仅可以获取有关吸附剂和吸附质性质的信息，还可以计算固体的比表面和孔径分布。 一．比表面的计算与测定

1．Langmuir吸附等温方程――单层吸附 理论模型：

三点假设：吸附剂（固体）表面是均匀的；吸附粒子间的相互作用可以忽略；吸附是单分子层。

吸附等温方程（Langmuir）

pv?1Vm?b?pVm ------ (1)

式中：v 气体吸附量

Vm 单层饱和吸附量

P 吸附质（气体）压力 b 常数

p以v对p作图，为一直线，根据斜率和截距可求出b和Vm，只要得到单分子层饱和吸附量Vm即可求出比表面积Sg 。用氮气作吸附质时，Sg由下式求得

Sg?4.36?VmW ------ (2)

2. 实验部分

2.1 实验原料和试剂

2.1.1 实验原料

实验所用的凹凸棒粘土原矿产地为甘肃靖远，原矿经烘干水洗，再烘干后研磨，过200目筛，外观呈砖色粉状，其主要成分为非晶质SiO2。 2.1.2 实验试剂

实验所用药品有苯酚(1.0g/L)、4-氨基安替比林、铁氰化钾、氨水(NH3·H2O) 、氯化铵、氢氧化钠、盐酸、溴代十六烷基吡啶、十二烷基磺酸钠、四丁基溴化铵。实验所用主要试剂见表2.1。

表2.1试验试剂

药品名称 溴代十六烷基吡啶 盐酸（HCL） 苯酚 氨水(NH3·H2O) 4-氨基安替比林 氢氧化钠 铁氰化钾 氯化铵 规 格 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 分析纯(AR) 生产厂商 天津市化学试剂第六二厂三分厂 天津市化学试剂六厂三分厂 北京化学试剂二厂 天津市化学试剂六厂三分厂 上海试剂一厂 天津市化学试剂六厂三分厂 天津市化学试剂四厂 天津市大茂化学试剂厂 2.1.3 实验所用药品的配置 所用药品配置方法如下：

(1)苯酚标准储备液：称取0.5g无色苯酚溶于蒸馏

实验一 活性炭吸附实验

一、实验目的：

（1）加深理解吸附的基本原理。

（2）掌握活性炭吸附公式中常数的确定方法。

二、实验原理：

当活性炭对水中杂质吸附时，会同时发生吸附和解吸现象，当吸附和解吸处于平衡状态时，称之为吸附平衡，这是活性炭和水之间的溶质浓度具有一定的分布比值，描述吸附容量qe与吸附平衡时溶液浓度C的关系常用Fruendlich吸附等温式来表达：

qe=kC1/n

qe：吸附容量（mg/g）

k：与吸附比表面积、温度有关的系数 n：与温度有关的系数 n＞1 C：吸附平衡时溶液浓度（mg/L）

这是一个经验公式，通常用图解方法来求k、n值，方法是将上式取对数变成线

性关系：lgqe=lg

c0?c1= lgC + lgk nmC0：水中被吸附物质原始浓度（mg/L） C：被吸附物质的平衡浓度（mg/L） m：活性炭投加量（g/L）

三、实验设备及仪器仪表：

1、振荡器或摇床 2、pH计 pHS型 3、活性炭、甲基橙 4、分光光度计、

5、温度计、三角烧杯、漏斗、1000mL烧杯、50mL容量瓶等。 四、实验步骤：

（1）甲基橙标准曲线制作：用吸量管分别吸取0.3、0.4 、0.5、0.6、0.7、0.8m

免疫层析实验

1．原理

金免疫层析试验（dot immunogold chromatographic assay，DICA）是用胶体金标记技术和蛋白质层析技术结合的以微孔滤膜为载体的快速的固相膜免疫分析技术。本项技是将各种反应试剂分点固定在试纸条 上，检测标本加在试纸条的一端，通过毛细血管作用使样品溶液在层析材料上泳动，样本中的待测物与层析材料中的反应试剂发生特异性结合反应，形成的复合物被 富集或固定在层析条上的特定区域（检测线），通过标记免疫技术显色。本项技术的特点是可进行单份标本检测且简便、快速、不需任何仪器设备，因此，发展非常 迅速。

DICA也是GICA（goldimmunochromatography assay）GICA试剂为试纸条形式。在以塑料条上依次黏贴上以下几种组分，1--吸水纸，2--破璃纤维膜，抹上固定着干燥的金标抗体，3--硝酸纤维素膜，膜上包被着线条状抗体，4--吸水纸。

因为1，4都是吸水纸，由于吸水作用， 一，使样品液从1端向4端移动

二，当样品液达到2时，金标抗体被溶解，同时与标本中的抗原反应形成复合物 三，样品液继续移动至3 时，金标记的抗体复合物与膜上的抗体结合，呈现红色的线条

四，多余的金条抗体继