环境微生物检测

环境中微生物的检测

微生物体积小、重量轻，因此可以到处传播以致达到“无孔不入”的地步。微生物种类繁多，对外界环境的适应能力又很强，只要生活条件合适，它们就可以迅速繁殖起来。因此，它们是自然界分布最广的一群生物。无论是南极、北极、高山、海洋、陆地、淡水，还是土壤、空气、动植物体内外，几乎到处都有它们的踪迹。

空气、水是维持人类生命不可或缺的物质。它们直接进入人体或与人接触。如果带有病原微生物，将成为传染疾病的媒介。通过空气和水中微生物的检验，对环境质量进行控制。

1.1 土壤中的微生物

1.1.1 土壤是微生物生活的良好环境

在自然界，土壤是微生物生活的良好环境。因为土壤具有微生物生长繁殖所必需的各种环境条件。 1.1.1.1 营养

土壤中有大量动植物残体、植物根系的分泌物、人和动物的排泄物，这些有机物为微生物提供了良好的碳源、氮源和能源；土壤中丰富的矿质元素可以满足微生物对矿质营养的要求。 1.1.1.2 水分和渗透压

土壤中具有一定的持水性，可为微生物提供水分；土壤的渗透压对微生物是等渗或低渗环境，有利于微生物摄取营养。 1.1.1.3 空气

土壤团粒结构中的小孔隙充满空气，土壤中氧的含量比大气少，平均为土壤空气体积的7%-8%。通气良好的

《环境微生物检测——采样方法》场景剧本

题目：环境微生物检测——采样方法

主题曲、插曲 待定 影片主要角色：

男1号 梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号 小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号 小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女）

男3号 ** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号： 小王，19岁，某学校的顶岗实习生

第一场：

场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水）

时间：上午

人物：前台靓女、客户，前台靓女 以及同事两三个。

从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。

客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？

客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。

前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。

前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。

客户：对水质都监测什么呀？

前台靓女：《建筑给水排水及采暖

1、如何从粪便污染的水体中将大肠杆菌群中的四种菌逐一鉴别出来？

答：使用鉴别培养基，大肠埃希氏菌，枸橼酸盐杆菌，产气杆菌，副大肠杆菌均能在远藤氏培养基上生长，但它们对乳糖的分解能力不同：前三者能分解乳糖，但分解能力有强有弱，大肠埃希氏菌分解能力最强，菌落呈紫红色带金属光泽；枸橼酸盐杆菌次之，菌落呈紫红或深红色；产气杆菌第三，菌落呈淡红色，副大肠杆菌不能分解乳糖，菌落无色透明。这样，这四种菌被鉴别出来了。

2、专性厌氧微生物为什么不需要氧？氧对专性厌氧微生物有什么不良影响？

答：因为专性厌氧微生物一遇到氧就会死亡。在氧气存在时，专性厌氧微生物代谢产生的NADP2和O2反应生成H2O2和NAD，而专性厌氧微生物没有过氧化氢酶，它将被生成的过氧化氢杀死。O2还可以产生游离O-2，由于专性厌氧微生物没有破坏O-2的超氧化物歧化酶而被O-2杀死。耐氧的厌氧微生物虽具有超氧化物歧化酶，能耐O2然而它们缺乏氧化氢酶，仍会被氧化氢杀死。

3、蓝细菌与其他光合细菌的代谢特征和特点有什么不同？各自在富营养池塘中的可能作用是什么？

答：（1）蓝细菌是一类含有叶绿素a、类胡萝卜素及藻胆蛋白等光合色素，进行光合作用并产生氧的原核微生物。光合细菌是又一类含有光合色素，进

第一篇 微生物学基础

第一章 非细胞结构的超微生物——病毒

1 病毒是一类什么样的微生物？它有什么特点？

答：病毒没有合成蛋白质的机构——核糖体，也没有合成细胞物质和繁殖所必备的酶系统，不具独立的代谢能力，必须专性寄宿在活的敏感宿主细胞内，依靠宿主细胞合成病毒的化学组成和繁殖新个体。其特点是：病毒在活的敏感宿主细胞内是具有生命的超微生物，然而，在宿主体外却呈现不具生命特征的大分子物质，但仍保留感染宿主的潜在能力，一旦重新进入活的宿主细胞内又具有生命特征，重新感染新宿主。

2病毒的分类依据是什么？分为哪几类病毒？

答：依据是：病毒是根据病毒的宿主、所致疾病、核酸的类型、病毒粒子的大小、病毒的结构、有或无被膜等进行分类的。根据转性宿主分类：有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）、放线菌病毒（噬放线菌体）、藻类病毒（噬藻体）、真菌病毒（噬真菌体）。按核酸分类：有DNA病毒和RNA病毒。

3病毒具有什么样的化学组成和结构？

答：病毒的化学组成有蛋白质和核酸。还含有脂质和多糖。整个病毒体分两部分：蛋白质衣壳和核酸内芯，两者构成核衣壳。蛋白质衣壳是由一定数量的衣壳粒按一定的排列组合构成的病毒外壳。核酸内芯有两种：核糖核酸（RNA）和脱氧核糖核酸（

《微生物学检验》习题集

绪论部分

一、名词解释

微生物、病原微生物、原核细胞型微生物。 二、填空题

1.按照结构、化学组成不同将微生物分成 、 、 三型。

原核细胞型微生物包括 、 、 、 、 和 ； 属于非细胞性微生物。 2.发明显微镜的人是 。

3．微生物学的创始人是 和 。 三、选择题 A型题

1.非细胞型微生物是

A.支原体 B.放线菌 C.衣原体 D.细菌 E.以上都不是 2.原核细胞型微生物和真核细胞型微生物的不同主要是

A.单细胞 B.原始核，细胞器不完善 C.在人工培养基能上生长 D.有细胞壁 E.对抗生素敏感 B型题

A.Louis Pasteur B.Joseph

空气中微生物检测

一、 实验目的

本实验用灭菌后的培养皿在空气中采样后并培养一段时间，测定空气中的微生物，其实验意义在于：

(1)了解空气中微生物的分布状况。

(2)比较普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和种类。 (3)验证无菌操作法在微生物学实验中的重要性。 二、 实验原理

空气是人类保持正常活动的物质条件，并与人类键康有着极为密切的关系，随着社会进入信息时代，空气微生物采样检测也得到了飞速发展，已研制出快速、敏感、特异，自动化程度高的各类仪器，为保持高质量的空气环境，应使用正确先进的空气监测方法。

在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。

空气中微生物的采集方法很多，主要有用空气微生物采样器采样监测和用自然沉降采样法进行采样。本文就各类采样方法的性能做了介绍，使能正确选用各类采样方法。空气微生物采样主要涉及采样器、采样介质、采样方法及检验程度 4 个方面。 空气微生物采样器主要有：撞击式采样器、过滤式空气采样器、离心式空气采样器、气旋式采样器、静电沉降采样器等等。

当空气中个体微小的微生

《环境微生物的检测与分析》实验指导

编者：吴方丽 李欧

浙江理工大学生命科学学院

二零一四年十二月 中国 浙江 杭州

1

目 录

实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数 ..................................... 3 实验二 拮抗菌的鉴定与保藏 .............................................. 14 实验三 变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析技术及其在微生物种群多样性研究中的应用 29 附录 各种培养基、试剂的配制 .............................................. 39

2

实验一 土壤微生物拮抗菌的分离与测数

一、实验目的

1、熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。 2、初步掌握从土壤中分离微生物和测数的基本方法。 3、了解培养基的配制原理，掌握其配制过程和方法。 4、掌握实验室几种灭菌方法及技术。 5、掌握无菌操作技术。 6、了解平板菌落计数的原理。

7、识别土壤中几大类微生物的菌落特征。

8、学习拮抗作用的试验方法，观察微生物间的拮抗现象及抗生素的抗菌作用。

二、实验原理

自然条件

.

;.. 一、空气中微生物的检测

一、实验目的

1了解空气中微生物的分布状况，学习空气采样方法

2掌握空气中微生物的检测方法

二实验原理

空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。测定的细菌指标有细菌总数和绿色链球菌，在必要时则测病原微生物。

空气并非微生物的繁殖场所，空气中缺乏水分和营养，紫外线的照射对微生物也有致死作用。微生物产生的孢子本身也可以飘浮到空气中，形成“气溶胶”，借风力传播。

空气中的微生物中，真菌的孢子数量最多，细菌较少。而且藻类、酵母菌、病毒都会存在于空气中。

目前，还无统一的关于空气的卫生学指标

第一章 绪论

1.生物分类的主要学说(六界学说、三域学说)

六界学说：病毒界（病毒）、原核生物界（细菌、放线菌、蓝细菌）、真核原生动物界（原生动物、藻类）、真菌界（酵母菌、霉菌）、植物界（低等、高等植物）、动物界（后生动物）

其中，病毒是不具有细胞结构的。

三域学说：古细菌域、真细菌域、真核生物域 2. 生物命名（双命名法）

生物的学名都是用拉丁文书写的，其中属名用名词，第一个字母大写；种名用形容词，第一个字母小写。如果打印，需用斜体。 学名=属名+种名 用拉丁文书写 3. 真核与原核（主要生物）

真核生物特点：细胞核发育完善，有核膜包裹的成形的细胞核，有核仁、染色体，进行有丝分裂

主要生物：除原核生物以外的生物，包括真核原生生物、真菌、后生动物、植物 原核生物特点：细胞核发育不完善，没有核膜包裹的成形的细胞核，没有核仁、染色体，进行无丝分裂。

主要生物：细菌、放线菌、蓝细菌 第二章 病毒——非细胞结构的超微生物 1.病毒的特点

⑴没有细胞结构，大多有蛋白质和一种核酸（DNA/RNA）组成，有的含有类脂和多糖 蛋白质：主要保护作用，决定特异性，致病性、毒力及抗原性 核酸：决定遗传、变异和对宿主细胞的感染能力

⑵专性寄生——没有核糖体和酶

病原微生物应急检测

柯昌文广东省疾病预防控制中心

一、病原微生物引起的传染病

我国传染病法规定的法定报告传染病分类：甲、乙、丙3类，从数量上共有39种，主要由病毒、细菌和寄生虫引起。

（一）甲类传染病主要鼠疫和霍乱。

（二）乙类传染病

（1）病毒引起的：传染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感、新型甲型H1N1流感、麻疹、病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、流行性出血热、狂犬病、流行性乙型脑炎。

（2）细菌引起的：伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、肺结核、新生儿破伤风。

（3）寄生虫和细菌：疟疾、血吸虫病、细菌性和阿米巴性痢疾。

（三）丙类传染病

（1）病毒引起的主要有：流行性感冒、流行性腮腺炎、急性出血性结膜炎、手足口病、风疹及除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。

（2）细菌和寄生虫引起的：麻风病、流行性和地方性斑疹伤寒、黑热病、丝虫病、包虫病。 （四）病原微生物引起的综合征 1、急性腹泻综合征

（1）细菌性腹泻：霍乱弧菌、志贺氏菌、大肠杆菌（肠毒素性和肠出血性）、沙门菌、空肠弯曲菌、小肠结肠耶尔森菌、艰难梭菌等。

（2）病毒性腹泻：轮状病毒、诺如病毒、腺病毒、埃博拉和其