拟南芥突变体鉴定的原理

本科生文献综述

题 目

拟南芥突变体的筛选综述

系 别

林学与园艺学院

班 级

姓 名

园艺102班

唐辉

学 号 103231228

答辩时间 年 月

新疆农业大学 林园 学院

拟南芥突变体的筛选综述

唐辉 指导老师：王燕凌

摘要：本文归纳了拟南芥抗旱、抗氧化、耐低钾、耐硒、耐盐、晚花突变体筛选的研究内容。在拟南芥抗旱突变体筛选中将用到甘露醇模拟干旱胁迫来进行试验。在抗氧化、耐低钾、耐硒中将用到Na2SeO3、钾、硒、NaCl等化合物或者化学元素对拟南芥突变体的生长发育影响来进行拟南芥突变体的筛选。概括了拟南芥突变体在甘露醇模拟干旱中的生长影响以及

RMD水稻突变体信息及基因型鉴定

1. 背景介绍：

突变体对于遗传学研究有着重要作用，随着拟南芥和水稻等物种全基因组测序的开展，人类积累了前所未有的基因序列信息，为了弄清这些基因序列的生物学信息，寻找该基因区段序列发生变异的突变体是阐释基因功能最直接最有效的方法。

植物在自然的环境条件下也会产生突变性状，早期普通正向遗传学研究往往通过寻找与某种生物学特性相关的突变体来发掘或定位某个特定基因。为配合植物功能基因组研究高通量的策略，构建水稻等物种的大型突变体库已成为必然，借助水稻全基因组测序信息、通过反向遗传学的手段大规模地筛选突变体库，理论上可以获得基因组中任一基因的突变体，最终实现阐释基因功能的目的。

2. 原理：

2.1农杆菌介导的T-DNA 插入

农杆菌是寄主范围非常广泛的土壤杆菌，它能通过伤口侵染植物导致冠瘿瘤 和毛状根的发生。1974从根癌农杆菌中分离出一种与肿瘤诱导相关的质粒，称为致瘤质粒（Tumor-inducing plasmid），简称Ti 质粒。Ti 质粒上存在一段DNA，能够转移并整合到植物基因组中，称为Transferred DNA，简称T-DNA。 研究发现，T-DNA 两端存在非常保守的同向重复的25bp 序列，

作物学报,农作物,期刊,一级学报

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2011, 37(4): 629 634

ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9

/zwxb/

E-mail: xbzw@

DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.00629

水稻颖壳和浆片异常突变体ahl的基因定位

王 增 李云峰** 马 娇 任德勇 王德仲 游小庆 桑贤春 何光华*

西南大学水稻研究所 / 转基因植物与安全控制重庆市重点实验室, 重庆400716

摘 要: 研究水稻花发育基因对于水稻相关性状的分子育种具有十分重要的意义。本研究报道了一个水稻颖壳和浆片异常突变体ahl (abnormal hull and lodicule), 来源于优良恢复系缙恢10号的EMS诱变群体。该突变体内外稃变小并发生严重扭曲, 浆片顶端伸长。内外稃异常导致灌浆后米粒变小、畸形, 千粒重下降。该性状遗传稳定, 受1对隐性基因控制, 利用群体分离分析法 (bulked segregation analysis, BSA)将AHL基因定位在第2染色体上的SSR标记RM14153与RM14167之间, 遗传

利用不同理化条件诱变获得果蝇突变体的研究

赵 颖，马志红，赵航渊，马雅钦，李承贤，赵宝存，齐志广

（河北师范大学 生命科学学院，河北 石家庄 050024）

摘 要：以野生型黑腹果蝇和白眼突变体为材料，采用紫外线、热激和EMS的方法分别在幼虫、蛹、成虫等发育阶段进行诱变处理，结果表明，紫外线照射白眼果蝇的蛹2h，可使羽化当代出现无翅果蝇，其子二代可出现纯合致死的残翅突变型和可遗传的双焦翅突变型；而紫外线照射成蝇虽使果蝇有突变体出现，但突变体要么死亡要么其后代性状恢复正常。热激白眼果蝇幼虫2h可引起遗传突变，并能得到稳定遗传的突变体，4h、8h可引起不能稳定遗传的突变；热激果蝇蛹和成蝇也能引起遗传突变。用含0.5%EMS的培养基培养对果蝇雌蝇的卵细胞影响较大，其后代的突变体较多，而对雄蝇的精子影响则相对较小，后代几乎没有突变体出现。

关键词：果蝇 紫外线 热激 EMS 突变体

The research of fruit flies’ mutants which are produced by different physical and chemical methods

ZHAO Ying，MA Zhihong，ZHAO Han

中国农业科学 2010,43(2):223-229 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.02.001

两个新的水稻叶色突变体形态结构与遗传定位研究

1

2

1

2

1

2

1

2

1

张力科，李志彬，刘海燕，李如海，陈满元，陈爱国，钱益亮，华泽田， 高用明，

11,3

朱苓华，黎志康

（1中国农业科学院作物科学研究所，北京 100081；2辽宁省稻作研究所，沈阳 110101；3 International Rice Research Institute, DAPO Box7777,

Metro Manila, Philippines）

摘要：【目的】对2个新的水稻叶色突变体进行形态结构与遗传分析，并且初步定位这2个突变基因。【方法】在水稻育种材料中分别发现了一株白色条纹叶突变体和一株黄叶突变体，经多代自交已形成稳定的突变系。对突变体的主要形态特征与叶绿素组分等进行分析，观察叶绿体的超微结构，并以这2个突变系杂交产生的F2群体作为定位群体，应用SSR标记对突变基因进行初定位。【结果】与

农药学学报　2008,10(3):3032310

C h inese J ourna l of Pesticide Science

?研究论文?

番茄叶霉病菌异菌脲抗药性突变

体的诱导与生物学性状

张传清31,2,　马忠华2,　朱国念2

(1.浙江林学院农业与食品科学学院,杭州311300;2.浙江大学农业与生物技术学院,杭州310029)

摘　要:测定了苯并咪唑类杀菌剂敏感2乙霉威抗性(B en S2D ie R)、苯并咪唑类杀菌剂抗性2乙霉威敏感(B en R2D ie S)和苯并咪唑类杀菌剂抗性2乙霉威抗性(B en R2D ie R)3种类型的番茄叶霉病菌

C ladospo rium fulvum菌株对不同类型药剂的敏感性。结果表明,蕃茄叶霉病菌对供试药剂的敏感

性与其对苯并咪唑类杀菌剂及乙霉威的敏感性无关。根据药剂对3类菌株EC

值的平均值,

50 16种杀菌剂抑制菌丝生长的活性依次为腐霉利>乙烯菌核利>异菌脲>戊唑醇>百菌清>嘧霉胺>醚菌酯>代森锰锌>82羟基喹啉铜>丙环唑>苯醚甲环唑>嘧菌酯>灭锈胺>烯酰吗啉>烟酰胺>三唑酮;抑制孢子萌发的活性依次为醚菌酯>腐霉利>百菌清>乙烯菌核利>灭锈胺>82羟基喹啉铜>异菌脲>代森锰锌>嘧菌酯>烟酰胺>嘧霉胺

拟南芥（Arabidopsis thaliana），是一种广泛分布于亚洲、欧洲以及北非地区的小型开花植物。从分类地位上讲，它属于十字花科(Brassicaceae) 鼠耳芥属(Arabidopsis)。作为近年来最为广泛应用的模式植物，拟南芥在分子遗传学、植物学以及农业科学的研究中发挥了重要的作用，被称为植物中的果蝇，是目前公认的五大模式生物之一。拟南芥基因组测序已于2000年由国际合作完成，也是第一种完成全基因组测序和分析的植物。

拟南芥是二年生草本植物，高7～40厘米。基生叶有柄呈莲座状，叶片倒卵形或匙形；茎生叶较小，无柄，披针形或线形。叶片表面覆盖有单细胞表皮毛。总状花序顶生，花朵直径约3mm，花瓣4片，白色，匙形。长角果线形，长0.5～2厘米，每个含20～30粒种子。根分为主根和侧根，可容土壤细菌共生。春型拟南芥萌发后3周左右就可开花，能在6周内完成一个世代。严格自花传粉（图1）。

拟南芥生活史与一般的开花植物无异：减速分裂形成的大小孢子分别形成雌雄配子体，即胚囊和花粉。胚囊经过双受精的过程，受精卵与受精极核分别发育成胚和胚乳。

2 拟南芥研究的主要策略

在拟南芥研究中，使用最多的是遗传学研究策略，包括正向遗传学和反向遗传学。正向

遗传

1农杆菌感受态细胞的制备

挑取根癌农杆菌GV3101单菌落于5 ml含100 μg/ml利福平(Rifampicin)，50 μg/ml卡那霉素(Kanmycin)和50 μg/ml庆大霉素(Genmycin)的LB液体培养基中，28℃振荡培养过夜；取过夜培养菌液500 μl接种于 50 ml LB(含相应抗生素)液体培养基中，28℃振荡培养4-8小时(OD600为0.5-0.8)；冰浴30分钟，4,000 rpm，4℃离心10分钟，加入10 ml预冷的 20 mM CaCI2悬浮农杆菌细胞，4000 rpm，4℃离心10分钟；加入2 ml预冷的 20 mM CaCl2悬浮细胞，冰浴，分装成每管100 μl，液氮中速冻后，置-80℃保存备用。 2.质粒转化农杆菌 GV3101

将构建的带有目的基因的质粒pCAMBIA-1304-plc转化 (冻融法) 根癌农杆菌GV3101，步骤如下：

1) 从-80℃冰箱中取出 GV3101 感受 态细胞 (100 μl)，置于冰上解冻；

2) 加入 5 μl 含目的基因的质粒，轻轻混匀；冰水浴 5 min； 3) 液氮冷冻 8 min； 4) 37℃水浴热激 5 min；

5) 加入 900 μl LB/

原版拟南芥规范种植手册

HANDLING ARABIDOPSIS PLANTS AND SEEDS

Methods used by the Arabidopsis Biological Resource Center

GROWTH OF PLANTS Planting on soil

Growth conditions

Control of pests

Plant isolation and harvesting

SEED HANDLING AND PRESERVATION

The methods used by the ABRC for handling plants and seeds are outlined below. These procedures are designed to generate healthy plants that give maximum set of pure seeds and to preserve these in the safest and most convenient manner. Many other approaches may be equally as good, especia

篇一：亲子鉴定原理

1.单基因遗传

单纯由某一对等位基因控制，与环境条件等无关，称为单基因遗传特征。靠这种遗传特征的检查，发现被检查者之间有与遗传规律矛盾时，便能断然否定其亲生关系。这种遗传特征包括血型，DNA多态性、染色体多态性等。 根据基因所在的染色体把单基因遗传方式分为常染色体显性遗传(Autosomal dominant inheritance，AD)、常染色体隐性遗传(Autosomal recessive inheritance，AR)和伴性遗传(Sex—linked inheritance)。因此，把单基因遗传规律又称之为单基因孟德尔方式的遗传规律。

2.复杂遗传或多基因遗传

是由若干多基因和环境等条件共同作用后形成的，称为复杂的遗传特征。身材高矮、面貌肤色等特征均属这一类。这些只能作为亲子鉴定的参考。

3.孟德尔遗传定律

孟德尔(Mendel，1865年)在研究性状遗传时，用豌豆进行杂交试验，找出了遗传规律，称为孟德尔遗传定律，有两条重要规律，即分离律和自由组合律。 1．分离律 染色体及基因在体细胞中都是成对的，体细胞通过减数分裂形成配子时，成对的基因随着染色体彼此分离，各自进入一个配子中，每个配子只含亲代一对基因中的一个，即不同遗传性状