高效液相色谱在中药分析中的应用

高效液相色谱在药学中的应用 高效液相色谱法（HPLC）是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术已被广泛用于各个领域，它是以经典的液相色谱为基础，引入气相色谱的理论与实验方法，将流动相改为高压输送，并采用高效固定相及在线检测等手段，发展而成的分析、分离方法。以其灵敏度高、选择性好，可分析微量组成甚至痕量样品等特点，成为医药分析领域应用最广、发展最快的现代分析技术之一。有的已被列入药典，成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。 与经典的液相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①应用了颗粒极细（一般为10μm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高；②采用高压输液泵输送流动相，流速快，一般试样的分析需数分钟，复杂试样分析在数十分钟内即可完成；③广泛使用了高灵敏检测器，大大提高了灵敏度。 与气相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①不受试样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广；②可选用不同性质的各种溶剂作为流动相，而且流动相对分离的选择性有很大作用，因此分离选择性高；③一般在温室条件下进行分离，不需要高柱温。 高效液相色谱的研究应用进展 药物与人类的健康，生活质量的提高关系极大，许多药

分析化学期中论文——浅谈高效液相色谱在食品检测中的应用

浅谈高效液相色谱在食品检测中的应用

摘要:高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，具有高效、高灵敏度、高速、高压、流动相选择范围宽等优点，因此在生物化学、药物及食品卫生领域广泛应用，是现代分离测定的重要手段。本文针对液相色谱在食品检测中的应用进行了总结介绍。

关键字：高效液相色谱食品分析应用

随着经济的快速发展，生活水平的不断提高，人们对食品不再仅仅满足于温饱，而是有了更高的追求——安全健康。近年来食品安全逐渐成为备受关注的焦点，食品的种类越来越丰富，同时新的食品安全问题不断涌现，严重危害人民群众的身体健康。我人口众多，环境保护意识差，生存环境及质量不高；水源污染导致食源性疾患的发生；水质污染直接影响海产品的卫生质量；农畜业种植养殖源头污染对食品安全的威胁越来越严重；农药、兽药滥用，造成食物中农兽药残留问题突出；食品中添加不符合食品卫生要求的物质而引起的食物中毒等事件屡有发生。这就需要有一套完整的监测监督机制，建立快速调查食源性疾病和监测食品污染的措施和方法。目前很多新型专用的HPLC仪不断出现，如氨基酸分析仪、糖分析仪、离子色谱仪等相继出现。本文就高效液相色谱（HPLC）技术在食品安全分析中的应用

2013年4月

第27卷第2期总92期北京联合大学学报

JournalofBeijingUnionUniversityApr．2013

Vol．27No．2SumNo．92

高效液相色谱在我国食品分析与检测中的应用

121

郭卓雨，高丽萍，郭培培

（1．北京联合大学生物活性物质与功能食品北京市重点实验室，北京

2．北京联合大学应用文理学院，北京

100191）

100101；

［摘要］高效液相色谱法（HPLC）是食品成份分离分析的一种极其重要的技术，因其超高的检

测灵敏度和超低的检测限度而逐渐成为目前最热门的食品检测技术之一。HPLC技术在食品中分析各营养成分，食品添加剂、食品霉菌毒素和农兽药成分残留的检测等，以及与其它技术联合检测的应用情况。

［关键词］高效液相色谱；食品分析；检测；应用［中图分类号］TS207．3

［文献标志码］A

［文章编号］1005-0310（2013）02-0055-04

ApplicationofHighPerformanceLiquidChromatographyinFoodAnalysisandTesting

GUOZhuo-yu1，GAOLi-ping2，GUOPei-pei1

（1．BeijingMunicipalKeyLaboratoryo

1、高效液相色谱 仪器设备名称 高效液相色谱仪 数量 1 技术指标四元梯度输液泵：工作模式：相互独立、电子控制的双柱塞直线驱动装 置，双压力传感器反馈回路，无需混合器和阻尼器。溶剂数：1—4。 流速范围：0.010—10.000ml/min, 以 0.001ml/min 为增量。流速精度： ≤0.075%RSD，流速准确度：±1.0%。操作压力：0—5000psi。混合范围： 0.0—100.0% 以 0.1% 增量。梯度曲线：多种梯度曲线，线性、步进、 凸线和凹线。 光电二极管阵列检测器：波长扫描范围：190～800nm。光源：全程氘灯 （190～800nm），不用钨灯。波长准确度：±1nm。测量范围：0.0001～ 2.0000AUFS，可以设定波长范围扫描检测或者定点波长检测。 荧光检测器（2475型）：灯：150W 氙灯，连续弧光。检测限：水的拉 曼光谱 ≥ 1000，激发波长：200—890nm，发射波长：210—900nm， 波长重现性：±0.25nm，波长准确度：±3nm。 色谱软件：原版软件。 仪器组成：四元泵、手动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、荧光检 测器、C18色谱柱、保护柱、原装软件、其它设备运行必须品。

高效液相色谱原理

1、概述

在所有色谱技术中，液相色谱法（liquid chromatography，LC）是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相色谱得到了迅速的发展。特别是填料制备技术、检测技术和高压输液泵性能的不断改进，使液相色谱分析实现了高效化和高速化。具有这些优良性能的液相色谱仪于1969年商品化。从此，这种分离效率高、分析速度快的液相色谱就被称为高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC），也称高压液相色谱法或高速液相色谱法。

气相色谱只适合分析较易挥发、且化学性质稳定的有机化合物，而HPLC则适合于分析那些用气相色谱难以分析的物质，如挥发性差、极性强、具有生物活性、热稳定性差的物质。现在，HPLC的应用范围已经远远超过气相色谱，位居色谱法之首。

2、液相色谱流程图 1、储液罐；2输液泵；3、进样器；4、色谱柱； 5、检测器；6、工作站；7废液灌

3、原理

液相色谱根

华南师范大学实验报告

学生姓名：杨秀琼 学号： 20082401129 专业： 化 学 年级班级：08化二 课程名称：仪器分析实验 实验项目：液相色谱分析混合样品中的苯和甲苯 实验类型：综 合 实验时间：2010/416 实验指导老师 曹立娟老师 实验评分：

一、[实验目的:]

1、掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法 2、了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术 二、[实验原理:]

高效液相色谱法：以液体作为流动相的色谱法。它是在经典液相色谱实验基础上，引入气相色谱的理论，在技术上采用高压输液泵，高效固定相和高灵敏的检测器，而发展起来的快速分离分析技术。具有分离效能高，检出限低，操作自动化和应用范围广的特点。

其基本原理：利用欲分配的诸组分在固定相和流动相间的分配有差异（即由不同的分配系数），当两相做相对运动时，这些组分在此两相中分配反复进行，从几千次到百万次，即使组分的分配系数只有微小差

一般情况下，HPLC分离方法的建立遵循以下步骤：

(1)了解样品的基本情况

所谓样品的基本情况，主要包括样品所含化合物的数目、种类(官能团)、分子量、pKa 值、UV光谱图以及样品基体的性质(溶剂、填充物等)、化合物在有关样品中的浓度范围、样品的溶解度等。

(2)明确分离目的

①是分析组分还是制备样品；

②是否已知样品所有成分的化学特性，或是否需做定性分析；

③是否有必要解析出样品的所有成分(比如对映体、非对映体、同系物、痕量杂质)；

④如需做定量分析，精密度需多高；

⑤建立的方法将适用几种样品分析还是许多种样品分析；

⑥将使用最终方法的常规实验室中已有哪些HPLC设备和技术。

(3)了解样品的性质和需要的预处理

除非样品是适于直接进样的溶液，否则，高效液相色谱分离前均需进行某种形式的预处理。有的样品需加入缓冲溶液以调节pH值；有的样品含有干扰物质或“损柱剂”而必须将其去除。此外，为了保证最终的样品溶液与流动相的成分尽量相近，最好用流动相溶解(或稀释)样品。

(4)检测器的选择

不同的分离目的对检测的要求不同，如测单一组分，理想的检测器应仅对所测成分响应，而其他任何成分均不出峰。另外，如果目的是定性分析或是制备色谱，则最好有通用型检测器，以便能检测到混合物中的各种成分

高效液相色谱分析方法在食 品安全检测中的应用——由青岛“问题西瓜”事件的产生的思考

小组成员：潘子洲、林佳铭、李建聪、 莫如栩、倪铭阳、简丽祥2015年4月21日

新闻原稿近日，山东即墨市、胶州市有市民食用西瓜后出现呕 吐头晕症状，甚至造成一名孕妇胎儿不保。经青岛食 药监部门调查，西瓜来源系海南万宁出产的冰糖黑美 人西瓜，初步判定为“涕灭威”残留超标，该批次 西瓜已销毁。据悉，“涕灭威”为高毒农药，已明令 不得用于蔬果种植。高毒农药具有强渗透性，如果非 法使用，即使西瓜有一层瓜皮保护，也可能农药残留 超标甚至食用后中毒。

涕灭威-概述： 英文名称：Aldicarb;Temek;Carbanolate 化学名称：O-甲基氨基甲酰基-2-甲基-2-甲硫基丙肟 其他名称：铁灭克(Temik);丁醛肟威；神农丹 分子式：C7H14N2O2S 分子量：190.27 结构式：

外观与性状：有硫磺 味的白色结晶 熔点：100℃ 密度：1.195(25/20℃) 蒸汽压：25℃ 溶解性：室温下，水中溶解度为6000ppm(0.6%),几乎 不溶于乙烷，而溶于大多数有机溶剂，如丙酮400g/L,氯仿 350g/L,甲苯100g/L(20℃)

稳定性

高效液相色谱分析实验

一、实验目的

1． 了解HPLC仪器的基本构造和工作原理，掌握HPLC的基本操作 2． 学习苯-甲苯混合物的定性分析方法 3． 评价色谱柱效

4． 了解色谱定量操作的主要方法以及各自特点； 5． 学习未知样品的定量分析方法。 二、实验原理

不同组分因在互不相溶的流动相与固定相中的分配比不同，当两相做相对运动时，组分在两相之间反复进行多次分配，最终实现不同组分的分离。

色谱仪器的构成：包括高压输液系统、进样系统、分离系统，检测系统等 1．色谱定性分析方法

（1）利用保留值与已知物对照定性

A 保留时间定性 b 峰高增量定性 C 其他方法定性（保留值经验规律定性，文献保留数据定性） 2．色谱定量分析方法

⑴校正因子：a绝对校正因子；b 相对校正因子。 ⑵常见的色谱定量分析方法主要有：

a 归一化法。特点：简单、方便、准确，但要求所有组分必须全部出峰。

b内标法。特点：使用相对校正因子定量，结果准确，但操作繁琐，由于需要增加内标物，增大分离的难度。

c 标准曲线法（外标法）。简单、方便，由于采用绝对校正因子定量，结果受到操作技术因素以及具体色谱条件影响较大。

d 内标标准曲线法。 三、仪器与试剂

LC-1000型高效液

高效液相色谱习题

一：选择题

1.在液相色谱法中，提高柱效最有效的途径是（ ）

A.提高柱温 B.降低板高 C.降低流动相流速 D.减小填料粒度 2.在液相色谱中，为了改变柱子的选择性，可以进下列那种操作（ ） A. 改变固定液的种类 B. 改变栽气和固定液的种类 C. 改变色谱柱温 D. 改变固定液的种类和色谱柱温 3.在液相色谱中，范第姆特方程中的哪一项对柱效的影响可以忽略（ ） A.涡流扩散项 B.分子扩散项

C.流动区域的流动相传质阻力 D.停滞区域的流动相传质阻力

4. 在高固定液含量色谱柱的情况下，为了使柱效能提高，可选用 ( ) A.适当提高柱温 B.增加固定液含量 C.增大载体颗粒直径 D.增加柱长 5. 在液相色谱中, 为了提高分离效率, 缩短分析时间, 应采用的装置是 ( )

A. 高压泵 B. 梯度淋洗 C. 贮液器 D. 加温

7. 在液相色谱中, 某组分的保留值大小实际反映了哪些部分的分子间作用力？（ ）

A. 组分与流动相 B. 组分与固