日本生化实验

生产日期：

生产日期是指商品在生产线上完成所有工序，经过检验并包装成为可在市场上销售的成品时的日期和时间。

生产：

生产，指人类从事创造社会财富的活动和过程，包括物质财富、精神财富的创造和人自身的生育，亦称社会生产。狭义生产仅指创造物质财富的活动和过程。也指动物的繁衍后代。

日本：

日本国（日语：にほんこく；英语：Japan），简称“日本”，位于东亚的岛屿国家，领土由北海道、本州、四国、九州四个大岛及6800多个小岛组成，总面积37.8万平方公里。主体民族为大和族，通用日语，总人口约1.26亿。日本三大都市圈是东京都市圈、大阪都市圈和名古屋都市圈。

日本生产日期对照表：

第一个数字是年份（8就是18年，5就是15年以此类推），后面的数字是月份或日期。

1、日本生产日期是很少见的，列举的一般是生产批号，所以日期会打乱，一些生产批号中后面的数字也用来表示的是这一年的第几天生产而不是按日期顺序打码。

2、看日期的时候要注意，尽量参照店家给出的生产日期为准，生产批号中出现的数字排列顺序是不尽相同的，不同种类的商品生产批次的代码构成也是不同的，这一点是要注意的。

3、根据日本药事法61条，只有“通常保存条件在3年内会变质的产品”才标明保质期。如果没有标明就说明这款产品在未

日本生态工业园规划和机制研究

日本是个岛国，国土面积小，资源非常贫乏。随着日本工业的不断发展，面临着庞大城市生活垃圾和资源稀少的严峻挑战。资源问题的不断严重迫使日本工业和整个日本社会不得不改变传统的生产方式。日本领导者认识到生态工业可以作为实现可持续发展的途径之一，从1997年就从“零排放”的构想出发，开始规划和建设生态工业园。

一、日本生态工业园区产生的背景 1、资源环境问题

日本一直面临资源环境问题。目前，日本每年消耗近195亿吨自然资源。日本的国土面积狭小，日益增长的生产和生活垃圾无处可倒，环境污染非常严重外，经济发展也没有足够的空间，后劲不足。虽然《空气污染保护法》的颁布和末端治理的推行，使日本的环境污染治理大大得到改善，但它的环境问题仍然严峻，尤其是焚烧垃圾造成的CO2及其他二氧化物的排放，使日本的空气污染严重。

2、政策法规变化

日本政府提出，到2010年垃圾要减少一半。怎样处理垃圾，从源头上减少污染气体的排放成了迫切需要解决的问题。经济泡沫的破灭给日本敲了一记警钟，日本人开始考虑新的经济发展方式。日本企业界达成共识:先污染后治理的方式成本太高，废物交换和实行零排放是一种潜在的经济资源。日本政府通过大量的研究和实践也认识到，要建立

※ 实验一 糖的性质实验

糖的颜色反应

※ 实验一（1）

【实验目的及要求】

1. 掌握莫式（Molisch）试验鉴定糖的原理和方法。 2. 掌握塞式（Seliwanoff）试验鉴定酮糖的原理和方法。 【实验原理】

1．莫式试验：糖经无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用下，能与а-萘酚生成紫红色缩合物。

2．塞式试验：酮糖在浓酸的作用下，脱水生成5-羟甲基糠醛，后者与间苯二酚作用，呈红色反应；有时亦同时产生棕红色沉淀，此沉淀溶于乙醇，成鲜红色溶液。 【实验仪器及用品】

仪器：水浴锅。 器皿：吸管、试管。

实验药品：蔗糖、葡萄糖、淀粉、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、а-萘酚、浓硫酸、95%乙醇、间苯二酚、盐酸、间苯三酚。 【实验试剂】

莫式试剂：а-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀释至100ml。现用现配，并贮于棕色试剂瓶中。 塞式试剂：间苯二酚50mg，溶于100ml盐酸（VH2O：VHCl=2:1），现用现配。 【实验内容及步骤】

一、莫式实验

于4支试管中，分别加入1 ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少许纤维素（棉花或滤纸浸在1 ml水中），然后各加莫式试剂2滴，摇匀，将试管倾斜

生物化学实验指导

海洋学院生物化学课程组编

2008年7月22日

目 录

实验室守则 ???????????????????????????????? 2 实验一 糖类的定量测定 ???????????????????????? 4 实验二 薄层层析法分析氨基酸 ????????????????????? 7 实验三 氨基酸含量的测定 ??????????????????????? 9 实验四 酪蛋白的制备 ????????????????????????? 11 实验五 考马斯亮蓝G-250 法测定蛋白质含量 ????????????? 13 实验六 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法 ????????????????? 17 实验七 DNA的提取制备 ???????????????????????? 29 实验八 酶活性的测定 ????????????????????????? 33 实验九 过氧化物酶同工酶分析 ????????????????????? 37 海洋学院实验记录的基本要求 ???????????????????????42 实验报告撰写要求 ????????????????

实 验 讲 义

基础实验

生物科学与工程学院1

生 化

实验一 实验基本操作技能培训

一、 仪器的洗涤与干燥 1. 仪器的洗涤

化学实验中经常使用的玻璃仪器和瓷器，常常由于污物和杂质的存在而得不出正确的 结果。因此，在进行化学实验时，必须把仪器洗涤干净。玻璃仪器的洗涤方法很多，应根据实验的要求、污物的性质、沾污程度来选择。常用的洗涤方法如下：

(1)用水刷洗

用水和毛刷刷洗，再用自来水冲洗几次，可除去附在仪器上的尘土、可溶性和不溶性杂质。注意洗刷时不能用秃顶的毛刷，也不能用力过猛，否则会戳破仪器。

(2)用去污粉、肥皂洗、洗衣粉、洗涤剂洗

去污粉由碳酸钠、白土、细砂等组成，它与肥皂、合成洗涤剂一样，能去除油污和一些有机物。由于去污粉中细砂的摩擦和白土的吸附作用，使得洗涤的效果更好。洗涤时，可用少量水将要洗的仪器润湿，用毛刷蘸取少量去污粉刷洗仪器的内外壁，最后用自来水冲洗。 用去污粉、洗衣粉、洗涤剂洗这些洗涤剂可以洗去油污和有机物质。若油污和有机物质仍然洗不干净，可用热的碱液洗。 (3)用铬酸洗液洗

铬酸洗液是由浓硫酸和重铬酸钾配制而成的，具有很强的氧化性，对有机物和油污的去污能力特别强。使用铬酸洗液时要注意被洗涤的仪器内不宜有水，

实验一 糖的颜色反应及还原性检验

A. 莫氏试验①

一、目的

掌握莫氏（Molisch）试验鉴定糖的原理和方法。

二、原理

糖经浓无机酸（浓硫酸、浓盐酸）脱水产生糠醛或糠醛衍生物，后者在浓无机酸作用

②

下，能与α-萘酚生成紫红色缩合物。利用这一性质可以鉴定糖。

三、实验器材

棉花或滤纸；吸管1.0ml（×5）、2ml（×1）；试管1.5cm×15cm（×5）；容量瓶50ml（×5）；烧杯50ml（×5）；棕色瓶50ml（×5）；玻璃棒多根、电炉（配石棉网）多个。

四、实验试剂

莫氏试剂：称取α-萘酚2.5g，溶于95％乙醇并稀释至50ml。此试剂需新鲜配制，并贮于棕色试剂瓶中。

1％蔗糖溶液：称取蔗糖0.5g，溶于蒸馏水并定容至50ml。

1％葡萄糖溶液：称取葡萄糖0.5g，溶于蒸馏水并定容至50ml。 1％果糖溶液：称取果糖0.5g，溶于蒸馏水并定容至50ml。

1％淀粉溶液：将0.5g可溶性淀粉与少量冷蒸馏水混和成薄浆状物，然后缓缓倾入沸蒸馏水中，边加边搅，最后以沸蒸馏水稀释至50ml。

五、操作

于5支试管中，分别加入1％葡萄糖溶液、1％蔗糖溶液、1％果糖溶液与1％淀粉溶

①

液1 mL和少许纤维素（棉花或滤纸少量浸在1ml水中），然后各加莫

生物化学检验技术 课程学习指南

（适用于医学检验专业专科使用）

生化检验课程学习指南

生物化学及检验教研室编

一、课程简介

《生物化学检验》(临床生物化学检验、临床生化检验、生化检验、生化检验学、临床生物化学和生物化学检验、临床生物化学及生物化学检验、临床生物化学、临床化学等)是对人体健康和患病时化学状态的研究以及用于诊断、治疗和预防疾病的化学试验方法的应用。它的主要任务是研究人体器官、组织、体液的化学组成和进行着的生化过程，以及疾病、药物对这些过程的影响，为疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供信息和理论依据。因此，《生物化学检验》既是一门研究人体健康和疾病时生理生化过程的医学基础理论学科，又是一门应用各种技术和方法分析机体健康和疾病时体液或组织样品中各种化学成分的医学应用技术学科，它在医学理论和医学实践中均具有相当重要的地位，是高等医学检验专业的一门主干学科和必修课程。

（一）课程目标

通过本课程的学习，要求学生掌握生物化学检验的基础理论、基本知识和基本技能，能够从事检验医学的生化实验诊断操作、评价和应用，培养成为医学检验技术专业高级专门人才。具体归纳为：

1、掌握生物化学检验的基本理论、基本知识； 2、具有娴熟

实 验 讲 义

基础实验

生物科学与工程学院1

生 化

实验一 实验基本操作技能培训

一、 仪器的洗涤与干燥 1. 仪器的洗涤

化学实验中经常使用的玻璃仪器和瓷器，常常由于污物和杂质的存在而得不出正确的 结果。因此，在进行化学实验时，必须把仪器洗涤干净。玻璃仪器的洗涤方法很多，应根据实验的要求、污物的性质、沾污程度来选择。常用的洗涤方法如下：

(1)用水刷洗

用水和毛刷刷洗，再用自来水冲洗几次，可除去附在仪器上的尘土、可溶性和不溶性杂质。注意洗刷时不能用秃顶的毛刷，也不能用力过猛，否则会戳破仪器。

(2)用去污粉、肥皂洗、洗衣粉、洗涤剂洗

去污粉由碳酸钠、白土、细砂等组成，它与肥皂、合成洗涤剂一样，能去除油污和一些有机物。由于去污粉中细砂的摩擦和白土的吸附作用，使得洗涤的效果更好。洗涤时，可用少量水将要洗的仪器润湿，用毛刷蘸取少量去污粉刷洗仪器的内外壁，最后用自来水冲洗。 用去污粉、洗衣粉、洗涤剂洗这些洗涤剂可以洗去油污和有机物质。若油污和有机物质仍然洗不干净，可用热的碱液洗。 (3)用铬酸洗液洗

铬酸洗液是由浓硫酸和重铬酸钾配制而成的，具有很强的氧化性，对有机物和油污的去污能力特别强。使用铬酸洗液时要注意被洗涤的仪器内不宜有水，

一 蛋白质提取、纯化及分析技术

实验一 多酚氧化酶（PPO）的分离提取

一、材料与试剂

（1）马铃薯（大约每小组200-300g） （2）试剂：

0.03M磷酸缓冲液PH6.0(内含0.02m巯基乙醇，0.001m EDTA，5%甘油，1%的聚乙烯吡咯烷酮)配制时配×10倍的浓缩液1000ml；固体硫酸铵；0.03M磷酸缓冲液PH6.0（内含0.02m巯基乙醇，0.001m EDTA，0.005m MgCL2）配置时配。 （3）实验器械与仪器设备：

试管与试管架；烧杯、玻璃搅棒；移液管、滴管等；试剂瓶；透析袋；过滤纱布；植物组织匀浆器；PH计和PH试纸；GL-20C高速冷冻离心机； DL-7A大容量低速冷冻离心机 二、操作步骤

1：粗酶提取：

马铃薯组织按1：1（W/V）比例与0.03m磷酸缓冲液PH6.0（内含0.02M巯基乙醇，0.001m EDTA，5%甘油，1%聚乙烯吡咯烷酮）混合，匀浆4层后纱布过滤，滤液以6000rpm离心10min，弃除沉淀获得酶提取液。 2：盐析分级沉淀：

在酶提取液中加入固体硫酸铵使其达到40%饱和度（边加边搅拌达到充分溶解），然后6000rpm离心20min弃除沉淀；离心上清液在加入固体硫酸铵达到70%饱和

实验一 植物组织游离氨基酸含量测定—茚三酮试剂显色法 P199

原理：游离氨基酸与茚三酮共热时能定量生成二酮茚-二酮茚胺，产物呈蓝紫色，称Rubemans紫。其吸收峰在570nm，且在一定范围内吸光度与游离氨基酸浓度成正比，因此可用分光光度法测定其含量。 ①微酸、90℃：氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛，茚三酮被还原成还原型茚三酮。

②脱水：还原型茚三酮与另一分子茚三酮和一分子氨进行缩合脱水，生成二酮茚-二酮茚胺。

材料：清水浸种吸涨的水稻、清水浸种萌发两天的水稻。

实验步骤：

分别取1g萌发、未萌发水稻于研钵中，加入5ml醋酸（使蛋白质变性，沉淀），研磨成匀浆后，用无氨蒸馏水稀释至100ml。用干燥滤纸过滤到三角瓶中。如下操作 试管编号 试剂 样品提取液ml 无氨蒸馏水ml 0.1抗坏血酸ml 水合茚三酮ml 570nmOD值 每管含氮量 0 0 空白1 0 2.0 0.1 3 0.130 1.26 样品1（未萌发） 2 2 0 0.1 3 0.123 1.19 3 2 0 0.1 3 0.188 1．83 样品2（萌发） 4 2 0 0.1 3 0.168 1.83 5 2 0 0.1 3 置于沸水中加热15min，取出用