花色苷含量测定原理

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

摘 要

论文题目：牡丹花色与花色苷的研究

摘 要

牡丹为我国著名花卉，被称为“万花一品”、“冠绝群芳”的“花王”。花色是牡丹重要的观赏性状，花色素则是牡丹花色形成的物质基础，又因多种生理活性而具有潜在的应用价值。本文主要研究了中原牡丹品种群的花色、花色苷及二者的相关性，确定了大孔吸附树脂法纯化牡丹花色苷的工艺条件，测定了牡丹花提取液与花色苷的抗氧化活性。具体研究内容及结果如下：

1．利用色差仪按国际照明委员会（International Commission on Illumination，CIE）表色系统对94个中原牡丹品种的花色进行测定，并在此基础上，通过CLUSTER过程将花色三刺激值（明度L*、 色相a* 和b*）采用Ward离差平方和法进行了聚类分析。结果表明：94个中原牡丹品种花色在CIE表色系统坐标系上的分布广泛，聚类分析将其分为9个色系：白（20种）、绿（1种）、浅粉（8种）、粉红（13种）、粉蓝（12种）、红（14种）、紫（11种）、红紫（7种）、红黑（8种），不同色系牡丹的L*、 a* 和b*值特征明显。白、浅粉、粉红和红色系以及粉蓝、紫和红紫色系的L*与a*、L*与彩度（C*）均表现出显著的负相关性（L*与a*的相关

吸附树脂在中药产业化生产中已有广泛应用!吸附树脂柱在使用一定周期后!需要再生处理!可以去除树脂柱上堆积的杂质!使得树脂柱保持正常工作流速"存放后需重新使用的树脂柱!也

应再生处理"生产中常用的处理方法为碱水#

酸水#盐酸乙醇洗涤!水冲洗至中性即可"

本实验研究利用淫羊藿总黄酮$%&%

大孔吸附树脂上吸附#洗脱#再生过程!考察树脂再生后提取物残留量和再生后吸附容量的变化!作为吸附树脂再生效果的评价指标"

在本实验的操作条件下!得出如下结论’再生后吸附树脂柱上淫羊藿总黄酮的残留量为该产物再生前吸附洗脱平均收得率

的&()*!再生后树脂的吸附容量为+,(-&./0.12%

!与前%&批树

脂平均吸附容量+-(34./0.1

2%

相比较!变化不大"本实验研究的结论为’$%&%大孔吸附树脂可连续多批次地用于淫羊藿总黄酮的提取分离!从上述结论可以认为!再生后树脂柱上有淫羊藿总黄酮残留!再生后吸附容量变化不大!但可通过

改善吸附洗脱过程的流动性提高工作效率"

以上实验提供的数据和结论!可作为吸附树脂法工艺流程设计中再生效果评价的参考依据!但是完整的工艺流程设计尚需考虑多种因素"

参考文献’

5%6胡军!周跃华(大孔吸附树脂在中药成分精制纯化中的应用57

6(中成药!+&&+!+,8+

2 0 1 3年1 2月第 2 O卷第 1 2期

中国中医药信息杂志

5 9

H P L C测定药用芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量彭贵龙，周光明，秦红英西南大学化学化工学院，发光与实时分析教育部重点实验室，重庆 4 0 0 7 1 5

摘要：目的

以离子液体 1一丁基一 3一甲基咪唑溴化盐 ([ B M I M] B r )为萃取剂超声辅助萃取，高效液相色谱法同时分采用 P h e n o m e n e x C色谱柱 ( 2 5 0 m i l l× 4 . 6 m m, 5 p m );流动相：甲醇一 O . 3%

离测定芦荟中的芦荟苷和芦荟大黄素。方法

冰醋酸水溶液 ( 6 5: 3 5 );流速：0 . 8 0 m L/ m i n;紫外检测波长：3 6 0 n m;柱温： 3 5℃。结果为0 . 0 5 0 6、0 . 2 6 2 n g/ m L,平均加样回收率分别为 9 5 . 9 9%、9 5 . 8 0%。结论

芦荟苷和芦荟大黄素

分别在 0 . 0 0 0 3 3 6—1 . 6 8 P g (,=0 . 9 9 9 9 6 )、0 . 0 0 0 6 0 8~3 . O 4 g (,=0 . 9 9

-相当于标示量%的计算公式

片剂：V×F×T/W×平均片重/标示量×100% 针剂： V×F×T/W/标示量（g/ml） ×100%

-以重量/片计的计算公式：V×F×T/W×平均片重=重量/片 例1

司可巴比妥钠胶囊含量测定：精密称取内容物0.1385g，置碘量瓶中，加水10mL，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25 mL，再加盐酸5 mL，立即密塞并振摇1分钟，暗处静置15分钟后，加碘化钾试液10 mL，立即密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L，F=0.992）滴定，至近终点时加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。已知：样品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）17.05 mL，空白试验消耗25.22mL，每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相当于13.01mg的司可巴比妥钠。计算本品相当于标示量的百分含量（规格0.1g，20粒胶囊内容物重2.7506 g）？ (p.90－生成物滴定法) 司可巴比妥钠的滴定度计算 HHNaONaOOBrBrONN CH2CH2+Br2 (过量定量)NN OOCH3CH3CH3CH3 2KBr+I2Br2+2KI (剩余) 2NaI+Na2s4o

第八章 设计性实验

实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。

学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。

一、实验设计的目的

学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种

第八章 设计性实验

实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。

学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。

一、实验设计的目的

学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种

目的：测定三七中人参皂苷Rg1含量,优化三七皂苷的超声提取工艺。方法：高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1的含量,色谱条件为：C18柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以乙腈-蒸馏水(24∶76)为流动相,检测波长为203 nm,流速为1.0 ml/min。以人参皂苷Rg1为指标,正交试验优化三七皂苷的提取工艺。结果：人参皂苷Rg1进样量在0.312～2.496μg范围内呈良好线性关系,平均回收率为100.8%,三七的最

药品鉴定

20 l第卷 3 0年2 7第4 1月期

三七中人参皂苷 R g的提取及含量测定谢清春，燕忠，陈吕竹芬，惠丹黄 (广东药学院药物研究所/东省药物新剂型重点实验室，东广州 5 0 0 )广广 10 6【要】目的：摘测定三七中人参皂苷含量，化三七皂苷的超声提取工艺。方法：优高效液相色谱法测定人参皂苷

Rg的含量，谱条件为：柱 (. mm￣ 0 m, m)以乙腈一 色 c 46 2 0 m 5t, x蒸馏水 (47 )流动相，测波长为 2 3n流 2:6为检 0 m,速为 1 / n . ml。以人参皂苷欺 指标，交试验优化三七皂苷的提取工艺。结果： 0 mi为正人参皂苷 Rg进样量在03 2 , .1~ 2 9

1.试剂和溶液

1.实验室用蒸馏水（GB 6682）； 2.三氯甲烷（GB 682）； 4.碘（GB 675）；

5.碘化钾（GB 1272）溶液，150g/L;

6.盐酸（GB 622）溶液：1+1溶液，将浓盐酸用等量水稀释；

7.硫代硫酸钠（GB 637）标准滴定溶液c(Na2S2O3)=0.1mol/L,按GB 601中4.6条规定配制； 8.淀粉指示液：称0.5g淀粉，用少量水混合后加到100mL沸水中煮沸3min.

? 2. 仪器

1.碘量瓶：250ml

? 2.量筒：10ml （3只） 3.滴定管：50ml. ? 3.分析结果的表述

1.碘值一X表示，按式（2）计算： X(gI2/100g)=c(V0-V)*0.1269*100/m ?

4. 测定步骤

1.韦氏试剂的制备：将19g一氯化碘溶解在1L冰乙酸（GB 676）中，搅匀后置于棕色小口玻璃瓶内，在25℃以下保存 2.试样的称量

根据预计的碘值的不同称取试样的质量 ?

3.试样的测定

称取的试样放入干燥的250ml碘量瓶中，加入6ml三氯甲烷，使试样完全溶解。精确吸取1ml韦氏试剂加入瓶中，瓶塞用碘化钾溶液湿润后，立即将瓶盖紧，摇动碘量瓶，使瓶中溶液充分混合，并置于