透析袋浓缩法

生 物 化 学 实 验 指 导

第一部分 常用生物化学实验技术及原理

第一章 透 析(Dialysis)

透析是利用小分子能通过,而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开的一种重要手段。通常的做法是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋里并沉没在大量的水中。袋内的小分子就不断通过膜进入外部溶剂中待达到平衡为止。如果对流水透析或不断更换透析袋的溶剂可以做到袋内的混合物几乎不含小分子。透析的速度受一些因素的影响。下面就粗略地讨论这些因素。 一、膜

1、材料 火棉胶是最常用的透析袋材料。各种规格的火棉胶袋已做成商品出售。也可用玻璃纸代替火棉胶。

2、制备 先将一适当大小和长度的透析管放在碱性EDTA溶液中沸腾30分钟以避免待透析的分子损失活性。然后，用蒸馏水洗涤透析管。结扎管的一端并将所研究的材料充满透析管（袋），然后结扎顶部。透析最好在新制备的管中进行，因为湿的透析袋非常容易受微生物感染。如果必须保存透析袋，则应有溶液中加入痕量的苯甲酸。

3、通透性 透析袋的通透性因袋的大小和预处理的方法不同而异。但透析过夜时，半透膜大体可以允许相对分子质量（Mr）30000以下的化合物通过。实际上没有严格的界限，透析时间延长时稍大的分子也透过膜

生 物 化 学 实 验 指 导

第一部分 常用生物化学实验技术及原理

第一章 透 析(Dialysis)

透析是利用小分子能通过,而大分子不能通过半透膜的原理把它们分开的一种重要手段。通常的做法是将小分子和大分子的混合物放进用半透膜制成的透析袋里并沉没在大量的水中。袋内的小分子就不断通过膜进入外部溶剂中待达到平衡为止。如果对流水透析或不断更换透析袋的溶剂可以做到袋内的混合物几乎不含小分子。透析的速度受一些因素的影响。下面就粗略地讨论这些因素。 一、膜

1、材料 火棉胶是最常用的透析袋材料。各种规格的火棉胶袋已做成商品出售。也可用玻璃纸代替火棉胶。

2、制备 先将一适当大小和长度的透析管放在碱性EDTA溶液中沸腾30分钟以避免待透析的分子损失活性。然后，用蒸馏水洗涤透析管。结扎管的一端并将所研究的材料充满透析管（袋），然后结扎顶部。透析最好在新制备的管中进行，因为湿的透析袋非常容易受微生物感染。如果必须保存透析袋，则应有溶液中加入痕量的苯甲酸。

3、通透性 透析袋的通透性因袋的大小和预处理的方法不同而异。但透析过夜时，半透膜大体可以允许相对分子质量（Mr）30000以下的化合物通过。实际上没有严格的界限，透析时间延长时稍大的分子也透过膜

滤袋法测粗纤维的含量

实验目的：掌握滤袋法测粗纤维方法。

实验原理：将试样用0.13mol/l预热硫酸和0.26mol/l预热氢氧化钠溶液煮沸消化一定时间。再用丙酮和石油醚除去溶物，经高温灼烧扣除矿物质的剩余物为粗纤维。

当用稀酸处理时，淀粉、果胶和部分半纤维素被溶解；

当用稀碱处理时，可除去蛋白质和部分半纤维素、木质素、脂肪；

当用丙酮和石油醚处理时，可除去单宁、色素、脂肪、蜡质以及部分蛋白质和戊糖；

实验仪器：分析天平；电热板；高脚烧杯（带冷凝球）；电热式恒温箱；干燥器；高温炉；古氏坩埚；小型洗衣机；封口机。 实验试剂：硫酸；氢氧化钠；丙酮；石油醚。 实验步骤：

一、 纤维袋105℃烘干1h后，取出于干燥器冷却30min，准确称重，记录纤维

袋的重量。

二、 将准确称好的样品（0.5***g左右）放入纤维袋中，用封口机封口，用2B

铅笔给纤维袋编号。

三、 往900ml高脚烧杯中加入0.13mol/L硫酸溶液（每个纤维袋加约50ml）

600ml，盖上冷凝球，接通自来水，用电热板加热硫酸溶液至即将微沸，将纤维袋放入，用重物压在纤维袋上，要求溶液在10min内微沸，微沸处理30min。

四、 将处理完的纤维袋先放在甩衣机内甩干2min，放入90－

2020年血液透析常规肝素抗凝

法（课件）

血液透析常规肝素抗凝法

１、肝素生理盐水浸泡透析器和血路管:血液透析开始前先以肝素生理盐水(生理盐水５０0ｍL+肝素125０—187５IU）浸泡和循环15－20分钟。

2、持续给药法

⑴体内首剂肝素：于血透开始前５-１５分钟,肝素２000IU(50ＩU／ｋg即0。４mｇ/kg)从内瘘静脉端一次推注。

⑵维持给药:肝素500－２0０0 IＵ/h从内瘘动脉端持续滴注。

⑶必要时监测有关凝血试验，并酌情调整剂量,使凝血学指标维持在相应的目标范围.

⑷血透结束前30-60分钟停止使用肝素。

3、间歇给药法

⑴体内首剂肝素：于透析开始前5-15分钟,从内瘘静脉端一次推注肝素4０0０IＵ（75IU/kg）

⑵维持用药：病情稳定的维持性血透患者，维持用药常可

1 / 1...... 感谢聆听 ......

每０.5-1小时推注肝素500－1５００IU.

下列情况应酌情减少肝素剂量:①基础的凝血指标显著延长,血小板功能减退;②短时间透析，主要指间歇肝素给药法。

４、停止给药时机：血透患者肝素的半衰期为０。5-2小时，平均50分钟。假设寒素的半衰期为1小时，某一时间的WBＰTT为135秒（基础值为85秒)，WBPTT延长5０秒，1小时后肝素血浓度

附件

浓缩果蔬汁（浆）加工行业准入条件

为规范浓缩果蔬汁（浆）加工行业投资行为，防止盲目投资和低水平重复建设，引导生产企业合理布局，节约和有效利用资源，保护生态环境，促进浓缩果蔬汁（浆）加工与原料生产协调发展，根据《中华人民共和国食品安全法》及其实施条例、《清洁生产法》、《国务院关于发布实施<促进产业结构调整暂行规定>的决定》、《产业结构调整指导目录（2011年本）》等国家有关法律法规和产业政策要求，制定本准入条件。

本准入条件中浓缩果蔬汁（浆）包括如下类别水果、蔬菜的浓缩汁（浆）：

大宗加工水果类：包括苹果、柑橘、梨等。

其他加工水果类：包括菠萝、荔枝、芒果等热带水果；草莓、蓝莓、树莓、黑加仑等小浆果；其他未列及的水果类。

大宗加工蔬菜类：包括番茄、胡萝卜、红薯等。 其他加工蔬菜类：包括芹菜、黄瓜、姜等。

浓缩果蔬汁（浆）是指采用物理方法从果蔬汁（浆）中除去一定比例的水分，加水复原后具有果蔬汁应有特征的制品。果蔬原浆为果蔬经压榨或破碎后，不去除水分、不经过酶处理的含果肉的汁液。

一、企业布局、设立条件及规模 （一）企业布局

1

1.新建、改扩建加工企业（项目）选址

新建、改扩建浓缩果蔬汁（浆）加工企业（项目）选址必须符合国家法律法规、产业

一、简答题

1简述国家经济主权原则的主要内容。（1）各国对本国内部以及本国涉外的一切经济事务，享有完全、充分的独立自主权利，不受任何外来干涉（总体现）（2）各国对境内一切自然资源享有永久主权（3）各国对境内的外国投资以及跨国公司的活动享有管理监督权（4）各国对境内的外国资产有权收归国有或征用（5）各国对世界性贸易大政享有平等的参与权和决策权

2．如何确定国际经济组织的法律人格？（1）国际经济组织的法律人格可以通过归纳方式或客观方式来确定。（2）前者指通过国际经济组织基本文件来考察，后者指通过国际法原则来考察。（3）运用客观方式确定时，国际经济组织应具备下述条件才具备法律人格：具有比协调各国行动的中心更高级的组织；建立本身的机构；具有特定的任务；独立于其成员，能表达自己的意志

3. 简述1958年《纽约公约》调整的事项以及我国对该公约所作的保留。1958年《纽约公约》全称为《承认及执行外国仲裁裁决公约》；该公约要求各缔约国应承认当事人双方订立的书面仲裁协议的法律效力，并应相互承认和执行在另一缔约国领土内所作出的仲裁裁决。1986年我国加入该公约时，对其作出了“互惠保留”和“商事保留”。

4. 简述国际技术许可合同的特点。（1）许可贸易合同是一种

实验七 减压蒸馏法浓缩甘草中的黄酮

一、实验目的与要求

1. 学习减压蒸馏的原理及其应用

2. 掌握旋转蒸发仪的安装和操作方法

二、实验原理

1. 浓缩

通过索氏提取法采用有机溶剂萃取甘草中的黄酮，由于其浓度较低，无论是保存、运输都会增加费用。另外，有机溶剂乙醇在工业生产中通过减压蒸馏后，可以被重新用来作为萃取剂，因而浓缩的过程十分必要。

2. 减压蒸馏

减压蒸馏是分离可提纯有机化合物的常用方法之一。它特别适用于那些在常压等于外界压力时的温度，因此液体的沸点是随外界压力的变化而变化的，如果借助于真空泵降低系统内压力，就可以降低液体的沸点，这便是减压蒸馏操作的理论依据。传统的减压蒸馏装置主要由蒸馏、抽气（减压）、安全保护和测压四部分组成。 现在的实验室和工业生产中往往采用旋转蒸发仪来代替传统的减压蒸馏装置。

3. 旋转蒸发仪

旋转蒸发仪主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂。尤其对萃取液的浓缩和色谱分离时的接收液的蒸馏，可以分离和纯化反应产物。 内蒙古科技大压蒸馏时未达沸点即已受热分解、氧化或聚合的物质。液体的沸点是指它的蒸气学

旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏，也就是在减压情况下，当溶剂蒸馏时，蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口

透析手册

第一章 总 则

血液透析是治疗急、慢性肾衰竭的有效方法。近年来，随着血液透析技术的普及，血液透析治疗的急、慢性肾衰竭病人的数量逐年增加，病人的生活质量和生存率也有了逐步提高。为了规范本市医疗机构开展血液透析治疗的行为，进一步提高血液透析质量，以提供安全、有效的血液透析治疗，制定本市血液透析质量控制总则。

一、本市设置血透室的单位必须是本市卫生行政部门批准的医疗机构(取得《医疗机构执业许可证》)，非医疗机构不得开展血液透析业务。

二、本市医疗机构新设置血透室或改(迁)建血透室，必须按程序申报，经上海市卫生局批准后，方可实施。

三、新设置(改、迁建)血透室的审批程序 (流程图见附件四)

1、医疗机构报上级主管部门，由上级主管部门初审同意后报上海市卫生局，并附血透室平面布局流程图。

2、上海市卫生局根据医疗机构所在地区的血液透析布局和需求，结合医疗的功能定位进行审批，对同意新设置（改、迁建）的单位，将血透室平面布局流程图批转至上海市疾病预防控制中心，并通知医疗机构领取、填写《上海市医院新设置（改、迁建）血液透析室审核表》（见附件五）。

3、上海市疾病预防控制中心根据有关消毒隔离规定对血透市平面布局流程图进行审定，并将审定意见书面反馈至医疗机构。

4、医疗机

血液透析患者透析器过敏的防治

【摘要】目的 探讨对血液透析器过敏患者的防治措施.方法 对20例发生透析器过敏患者采用自身前后对照,分为三组(其中A组和B组属常规组,C组属研究组),A组:血液透析前予0.9%氯化钠注射液500Ml循环管路10分钟,血液透析开始时予静脉壶中静脉推注地塞米松注射液5Mg.B组:血液透析前予0.9%氯化钠注射液500Ml循环管路30分钟.C组:血液透析前予地塞米松5Mg加入0.9%氯化钠注射液500Ml中循环管路10分钟,观察三组治疗过程中患者病情变化.结果 常规组出现透析器过敏41例次,其中A型反应32例,B型反应9例,使用血液透析前予地塞米松5Mg加入0.9%氯化钠注射液500Ml中循环管路10分钟出现过敏反应3例,两组发生率比较,差异有显著意义.结论 血液透析前予地塞米松5Mg加入0.9%氯化钠注射液500Ml中循环管路10分钟有预防血液透析器过敏的发生. 【关键词】血液透析 透析器过敏 防治

透析器过敏是透析患者在使用透析器时出现的一组临床征候群,临床上可表现为胸痛、胸闷、背痛、呼吸困难、畏寒、皮肤瘙痒等,严重者可导致患者死亡[1].透析器过敏虽不是很常见的严重并发症,但反复发生,即使轻微也常

方法一超速离心沉淀法

1. 取6个Ultra-clear SW28离心管，用70%乙醇消毒后，放在超净工作台中打开紫外灯继续消毒30分钟。

2. 每个Ultra-clear SW28离心管中加入约32ml的预先处理的病毒上清液。

3. 取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%的蔗糖溶液。将移液管一直插入到离心管的底部，缓慢将蔗糖溶液打出4 ml。同样地，将剩下8 ml的蔗糖溶液分别加入到另两个离心管中。另取一支干净的移液管，对剩下3管进行同样处理。

4. 用PBS调整各管的重量，使对应的离心管之间的重量相差不超过0.1g。

5. 按次序将所有6个离心管放入Beckman SW28 超速离心转头中。

6. 4℃，25，000 rpm. (82，700g) 离心2小时。

7. 小心将管子从转头中取出。倒掉上清，将离心管倒扣在纸巾上放置10分钟使剩余的上清流干。吸掉剩余的液滴。在管底应当有可见的沉淀。

8. 每管中加入100ml 不含钙和镁的PBS洗下沉淀。

9. 将SW28超速离心管插入到50ml锥底离心管中，盖上盖子。

10. 在4℃溶解2小时，每隔20分钟轻轻震荡。

11. 4℃，500g离心1分钟，使溶液集中于管