肠道菌群的分离与鉴定实验报告

三级学科 微生物学及检验 项目编号码_______________

项目——导师制实验报告

实验名称: 肠道菌群分离培养、鉴定及药敏分析 学生姓名: 曾正勇 年 级: 2013医检1班 专 业: 医学检验学 指导教师: 王健 教授 实验日期: 2015年11月4日

安徽理工大学医学院 二O一五 年 十一 月

一、实验概述

细菌:广义的细菌即为原核生物。是指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作拟核区（nuclear region)（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方

肠道菌群的组成及作用

在微生物学诞生后不久，人们就发现，在动物的消化道中存在有不少微生物。随着医学的发展，人们也注意到，在人类的肠道，尤其是结肠（也就是平常所说的大肠）中，也存在着大量微生物。这些以细菌为主的微生物种类极多，数量极大。

——摘要

在微生物学诞生后不久，人们就发现，在动物的消化道中存在有不少微生物。例如在牛、羊、兔等食草动物的胃或盲肠中，就存在大量以细菌为主的微生物群体。由于食草动物摄入的植食性饲料中，纤维素、半纤维素等多糖难以依靠动物体自身分泌的酶液消化，而微生物群体中包含的纤维素消化菌、半纤维素消化菌等可以较好的将多糖转化为低聚糖和寡糖，从而促进对这些营养物质的吸收。

随着医学的发展，人们也注意到，在人类的肠道，尤其是结肠（也就是平常所说的大肠）中，也存在着大量微生物。这些以细菌为主的微生物种类极多，数量极大。据推测，一个正常成人体内，肠道内的细菌总重量可达1-1.5千克，包含的细菌数量则可以达到1014个[1]。而一个成年人自身的细胞数量为1013个，也就是说，居住在我们肠道内的细菌数量，是人体细胞总数的10倍！我们每天排出的粪便中，干重量的50%以上是由这些细菌及其“尸体”构成的。因此有人风趣的说，从数量上来看，我们人类

肠道菌群的组成及作用

在微生物学诞生后不久，人们就发现，在动物的消化道中存在有不少微生物。随着医学的发展，人们也注意到，在人类的肠道，尤其是结肠（也就是平常所说的大肠）中，也存在着大量微生物。这些以细菌为主的微生物种类极多，数量极大。

——摘要

在微生物学诞生后不久，人们就发现，在动物的消化道中存在有不少微生物。例如在牛、羊、兔等食草动物的胃或盲肠中，就存在大量以细菌为主的微生物群体。由于食草动物摄入的植食性饲料中，纤维素、半纤维素等多糖难以依靠动物体自身分泌的酶液消化，而微生物群体中包含的纤维素消化菌、半纤维素消化菌等可以较好的将多糖转化为低聚糖和寡糖，从而促进对这些营养物质的吸收。

随着医学的发展，人们也注意到，在人类的肠道，尤其是结肠（也就是平常所说的大肠）中，也存在着大量微生物。这些以细菌为主的微生物种类极多，数量极大。据推测，一个正常成人体内，肠道内的细菌总重量可达1-1.5千克，包含的细菌数量则可以达到1014个[1]。而一个成年人自身的细胞数量为1013个，也就是说，居住在我们肠道内的细菌数量，是人体细胞总数的10倍！我们每天排出的粪便中，干重量的50%以上是由这些细菌及其“尸体”构成的。因此有人风趣的说，从数量上来看，我们人类

23

综述

肠道感染和肠道菌群与肠易激综合征

刘　方　王承党

摘要:肠易激综合征(IBS)是一种常见的胃肠功能性疾病。近年来,肠道感染、肠道菌群与IBS关系的研究已成为热点。此文探讨IBS与肠道感染、肠道菌群的关系以及微生态制剂治疗IBS的效果。

关键词:肠易激综合征;肠道感染;肠道菌群;微生态制剂

Intestinalinfectionandintestinalfloraandirritablebowelsyndrome　LIUfang,WANGChengdang.DepartmentofGastro2enterology,theFirstAffiliatedHospitalofFujianMedicalUniversity,Fuzhou(350005),http://www.77cn.com.cnboratoryofGastroen2terology,FujianMedicalUniversity,Fuzhou(350005),China.

Abstract:Irritablebowelsyndrome(IBS)isacommongastrointestinalfunctionaldisease.Inthisarticle,therelatio

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综述

肠道感染和肠道菌群与肠易激综合征

刘　方　王承党

摘要:肠易激综合征(IBS)是一种常见的胃肠功能性疾病。近年来,肠道感染、肠道菌群与IBS关系的研究已成为热点。此文探讨IBS与肠道感染、肠道菌群的关系以及微生态制剂治疗IBS的效果。

关键词:肠易激综合征;肠道感染;肠道菌群;微生态制剂

Intestinalinfectionandintestinalfloraandirritablebowelsyndrome　LIUfang,WANGChengdang.DepartmentofGastro2enterology,theFirstAffiliatedHospitalofFujianMedicalUniversity,Fuzhou(350005),http://www.77cn.com.cnboratoryofGastroen2terology,FujianMedicalUniversity,Fuzhou(350005),China.

Abstract:Irritablebowelsyndrome(IBS)isacommongastrointestinalfunctionaldisease.Inthisarticle,therelatio

食用菌母种的制作 ——组织分离法实验报告

实验目的：

学习和掌握食用菌的组织分离法； 一、 实验原理：

食用菌的母种一般是采用孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物。利用食用菌子实体内部组织进行分离，是获得母种最简便的方法。 二、 实验器材：

1. 食用菌：香菇、平菇。2. 培养基：PDA培养基斜面。3. 仪器或其他用具： 75%酒精棉球、接种针记号笔等。 三、 实验方法：

1. 选择种菇：选择肥壮菇体作种菇；

2. 种菇消毒：取1张菇片，用 70%的酒精轻擦表面进行消毒； 3. 菇肉接种：将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇柄与菌盖的交界处取一米粒大小的菇肉组织接于PDA试管斜面上； 4. 培养：将试管斜面置于15～30℃下培养； 五、注意事项

1. 在整个操作过程中都要注意无菌操作，一切用具都要消毒。 2. 要等刀片冷却后再切取组织块。 六、实验结果与记录

第一次实验：10月16日上午进行接种，两试管都以肥壮的双孢菇为种菇，10月13日观察培养基

结果分析：本次实验全班只有一人成功，大部分都被杂菌污染，最有可能的原因就是制作的PDA培养

杂菌

没有菌落产生

基本身受到污染，但是又有培养基根

?１７２??临床研究?尿毒症患者肠道菌群变化的研究王尊松崔美玉【摘要】唐利军李文斌魏勇贾晓妍孔祥雷许冬梅目的研究尿毒症患者肠道菌群变化的特点及其与炎性状态的关系。方法选择尿毒症非透析患者和透析患者各６０例分为非透析组和透析组，另选择３０例健康查体志愿者作为对照组，用实时荧光定量ＰＣＲ（ｒｅａｌ—ｔｉｍｅＰＣＲ）检测粪便长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、大肠杆菌的表达，细菌浓度以每克粪便中该菌种基因拷贝数的对数表示，免疫散射比浊法测量患者超敏ｃ反应蛋白（ｈｓ—ＣＲＰ）。结果与对照组相比，尿毒症透析组和非透析组粪便长双歧杆菌（８．１６±０．５６和８．２５＿＋０．５１比８．９４±０．５２，均Ｐ＜０．０１）和嗜酸乳杆菌（７．２２±０．６２和７．４２＿＋０．５９比８．１１＋０．６１，均Ｐ＜Ｏ．０１）浓度均明显降低。透析组略低于非透析组，但差异无统计学意义。与对照组相比，尿毒症透析组和非透析组粪便大肠杆菌（９．４０±０．５７和９．４７±０．５０比９．１１±０．５４，均Ｐ＜０．０５）和粪肠球菌（８．０７±０．５７和８．０６＿＋０．５５比７．７５±０．５５，均Ｐ＜０．０５）浓度均明显升高。透析组与非透析组差异无统计学意义。以患者ｈｓ—ＣＲＰ为因变量Ｙ，４种肠

福建农业学报２７（５）：５２４～５３２，２０１２

Ｆ旬ＪａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅｓ

文章缩号：１００８－－０３８４（２０１２）０５—５２４一０９

臂凤贞，钟少杰，邱宏螬，辱．紫云英根瘸菌的分离与鉴定［Ｊ３．福建农业学报。２０１２，２７（５）；５２４－－５３２．

ＧＵＡＮＦ－Ｚ。ＺＨＯＮＧＳ－Ｊ．ＱＩＵＨ—Ｄ，ｅｔ８１．ＩｓｏｌａｔｉｎｇａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＲｈｉｚｏｂｉａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｔ２０１２，２７（５）Ｉ

５２４—５３２．

ｓｔｒａｉｎＪ

ｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｌｋ

Ｖｅｔｃｈ［刀．ＦｕｊｉａｎＪｏｍ＇ｍａｌｏｆ

紫云英根瘤菌的分离与鉴定

管凤贞１’２，钟少杰３，邱宏端２，林戎斌１，张

（１．福建省农业科学院土壤肥料研究所，福建福州

福建福州

辉１，陈济琛１，林新坚１

３５０００３｝ｚ．福州大学生物科学与工程学院，

３５０１０８；３．福建农林大学生命科学院。福建福州３５０００２）

摘要：从采自福建各地紫云英的根瘤中分离出具有一般根瘤菌特征的菌株１８株，在对其进行初步细菌学特性鉴定的基础上，利用１６ＳｒＤＮＡ进行序列分析，确定其系统发育地位。鉴定结果为。ＹＸ、７．３、ＧＺ与ＺＫｌ为中慢生根

福建农业学报２７（５）：５２４～５３２，２０１２

Ｆ旬ＪａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ，Ｓｃｉｅｎｃｅｓ

文章缩号：１００８－－０３８４（２０１２）０５—５２４一０９

臂凤贞，钟少杰，邱宏螬，辱．紫云英根瘸菌的分离与鉴定［Ｊ３．福建农业学报。２０１２，２７（５）；５２４－－５３２．

ＧＵＡＮＦ－Ｚ。ＺＨＯＮＧＳ－Ｊ．ＱＩＵＨ—Ｄ，ｅｔ８１．ＩｓｏｌａｔｉｎｇａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＲｈｉｚｏｂｉａｌＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｔ２０１２，２７（５）Ｉ

５２４—５３２．

ｓｔｒａｉｎＪ

ｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｉｌｋ

Ｖｅｔｃｈ［刀．ＦｕｊｉａｎＪｏｍ＇ｍａｌｏｆ

紫云英根瘤菌的分离与鉴定

管凤贞１’２，钟少杰３，邱宏端２，林戎斌１，张

（１．福建省农业科学院土壤肥料研究所，福建福州

福建福州

辉１，陈济琛１，林新坚１

３５０００３｝ｚ．福州大学生物科学与工程学院，

３５０１０８；３．福建农林大学生命科学院。福建福州３５０００２）

摘要：从采自福建各地紫云英的根瘤中分离出具有一般根瘤菌特征的菌株１８株，在对其进行初步细菌学特性鉴定的基础上，利用１６ＳｒＤＮＡ进行序列分析，确定其系统发育地位。鉴定结果为。ＹＸ、７．３、ＧＺ与ＺＫｌ为中慢生根

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集

上册

! 年河南新乡

活菌制剂在体内定植是极为复杂的,

,

要保持定植能力,

,

活菌制剂的生产菌种应从同种属宿土分,

离尽最选用来白该动物的正常菌群即一著菌群菌群进入动物体内要较易存活值较低皮粘附制作用,,

这样才能最大限度地发挥其益生作用,

而且正常#

并能与致病菌抢夺附着点

具有很强的竞争优势,

。

鸽肠道中的,

还存在胆盐等物质

,

因此益生菌必须有良好的耐酸能力和耐胆盐能力

才能在肠道钻膜上、

、

增殖并发挥作用

。

我们筛选的鸽源嗜酸乳杆菌,,

&%,

、

&%

(

具有耐胆盐。

耐酸等特点

可保

证微生态制剂中有足够的活菌克服动物胃环境,

通过胃到达肠道发挥作用

对畜禽常见致病菌有抑。

对动物体安全无毒编者略

预期可作为益生素生产菌

其应用效果有待在生产实践中检验

参考文献

健康成年种鸽肠道正常菌群的调查研究易力程相朝’王淑芳’ 河南科技大学动物科技学院河南洛阳+ ! ,洛阳师范学院生命科学系河南洛阳+ !,)

汪洋

)’

,

,

)

,

,

摘要 .本实验采用定童分析方法对成年种鸽肠道内正常菌群的/类菌属进行测定结果表明 .双歧杆菌和乳杆菌数童最高大肠杆菌和芽袍杆菌次之肠球菌和葡萄球菌的数 最低乳杆菌和双歧)

,

,

)

杆菌的数 极显著地高于