kcl对神经干复合动作电位的影响

课程名称：动物生理学实验

实验项目：实验二 神经干复合动作电位的记录和观察

[目的]

1、学习电生理学实验方法。

2、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生原理。 3、测量神经干动作电位产生的阈强度和顶强度。 [原理]

1、两栖类一些基本的生命活动和生理功能与温血动物类似，而离体组织器官所需的生活条件比较简单，并且易于控制和掌握，因此在生理实验中常用两栖类离体组织器官作为实验标本。

2、神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。

3、神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随着刺激强度的变化而变化的。

[实验材料]蛙 常用手术器械 蛙板 任氏液 培养皿 烧杯 神经屏蔽盒 Medlab生物信号采集系统

[实验流程] 神经干标本制备→仪器联接和调试→测定参数→测定神经干的刺激阈值→观察记录双相动作电位→观察记录单相动作电位 [实验步骤]

课程名称：动物生理学实验

实验项目：实验二 神经干复合动作电位的记录和观察

[目的]

1、学习电生理学实验方法。

2、观察蛙坐骨神经干复合动作电位的波形，并了解其产生原理。 3、测量神经干动作电位产生的阈强度和顶强度。 [原理]

1、两栖类一些基本的生命活动和生理功能与温血动物类似，而离体组织器官所需的生活条件比较简单，并且易于控制和掌握，因此在生理实验中常用两栖类离体组织器官作为实验标本。

2、神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。

3、神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随着刺激强度的变化而变化的。

[实验材料]蛙 常用手术器械 蛙板 任氏液 培养皿 烧杯 神经屏蔽盒 Medlab生物信号采集系统

[实验流程] 神经干标本制备→仪器联接和调试→测定参数→测定神经干的刺激阈值→观察记录双相动作电位→观察记录单相动作电位 [实验步骤]

徐州医学院学报　ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　XUZHOU　2006,26(6) 507

亡增加,有利于肿瘤细胞的清除。本研究结果支持

[9]

Baretton等的结果,即Bcl-2表达变化与大肠癌的临床病理特征不相关。

既往免疫组化研究大多采用半定量检测方法,由于肉眼对细胞计数、染色深浅存在人为差异,故可能造成偏倚。我们采用自动化图像分析技术与免疫组化技术相结合的方法,可以精确地定量检测,排除人为因素,更为准确地测定PCNA、Bcl-2在大肠癌中的表达,为判断预后、指导临床提供更加可靠的客观依据。

参考文献:

[1]　FearonER,VogelsteinB.Ageneticmodelforcolorectaltumorigenesis

[J].Cell,1990,61(6):759-767.

[2]　黄杰雄,黄志治.增殖细胞核抗原的研究进展[J].[4]　李异凡,何剪太,卢焕元,等.PCNA与BCL-2的表达在大肠癌

预后评估中的意义[J].中国医学工程杂志,2003,11(6):33-35.

[5]　YangHB,HsuPI,ChanSH,etal.Growthkineticsofcolorectalade2

noma-carcinom

综合性实验

实验一 神经干复合动作电位与骨骼肌收缩的关系

【实验目的】

利用蟾蜍的坐骨神经干-腓肠肌标本，采用PowerLab多通道同时记录的优点，通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位；使用机械-电换能器来获得骨骼肌的收缩曲线，两者对照，分析其产生的机制和特点。

【实验原理】

骨骼肌纤维受运动神经纤维的控制，神经纤维受到刺激后，其兴奋延神经纤维以动作电位的形式传导到相应的肌纤维，通过兴奋—收缩耦联，引起肌纤维收缩或舒张。神经纤维的兴奋表现为细胞膜上的生物电——动作电位的产生和传导，随后，肌细胞产生收缩，反映在张力和长度的变化上，两者产生的机制和表现形式均不相同。

【实验动物】 蟾蜍

【药品与器材】

蛙手术器械，PowerLab 8S主机，张力换能器，生物电放大器，桥式放大器，铁架台，肌槽，任氏液。

【实验步骤】 1．标本制备：

蟾蜍坐骨神经标本制备方法参见P19的蟾蜍神经肌肉标本的制备，标本浸在任氏液中约5 min，待其兴奋性稳定后实验。

2．仪器装置及程序设置 （1）连接仪器（图6-1）。

坐骨神经肌动器 干 机-电换能器 腓肠肌 S1 S2 R1 R2 R3 生物电放大器 PowerLab 桥式放大器 网 络 打 印 机 计

综合性实验

实验一 神经干复合动作电位与骨骼肌收缩的关系

【实验目的】

利用蟾蜍的坐骨神经干-腓肠肌标本，采用PowerLab多通道同时记录的优点，通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位；使用机械-电换能器来获得骨骼肌的收缩曲线，两者对照，分析其产生的机制和特点。

【实验原理】

骨骼肌纤维受运动神经纤维的控制，神经纤维受到刺激后，其兴奋延神经纤维以动作电位的形式传导到相应的肌纤维，通过兴奋—收缩耦联，引起肌纤维收缩或舒张。神经纤维的兴奋表现为细胞膜上的生物电——动作电位的产生和传导，随后，肌细胞产生收缩，反映在张力和长度的变化上，两者产生的机制和表现形式均不相同。

【实验动物】 蟾蜍

【药品与器材】

蛙手术器械，PowerLab 8S主机，张力换能器，生物电放大器，桥式放大器，铁架台，肌槽，任氏液。

【实验步骤】 1．标本制备：

蟾蜍坐骨神经标本制备方法参见P19的蟾蜍神经肌肉标本的制备，标本浸在任氏液中约5 min，待其兴奋性稳定后实验。

2．仪器装置及程序设置 （1）连接仪器（图6-1）。

坐骨神经肌动器 干 机-电换能器 腓肠肌 S1 S2 R1 R2 R3 生物电放大器 PowerLab 桥式放大器 网 络 打 印 机 计

生理学实验报告中山大学生命科学学院

实验六-七神经干动作电位的探究

? 介绍

一、

背景信息

神经是由神经纤维聚集成束的构造，而神经纤维本身是由神经元的轴突（神经元的细长突出，负责传出神经讯号）外被神经胶质细胞所形成的髓鞘包覆而构成。每一条神经的外部都被一层致密的结缔组织所包覆，称为神经外膜，其内亦包埋了提供营养的血管。神经内的神经纤维被神经束膜分隔为数个神经纤维束。每个神经纤维周围亦有神经内膜包覆。神经外膜内包埋的血管分支通过神经束膜，在神经内膜形成血管网。神经内膜亦具有淋巴管。[1]

神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。[2]

神经在一次兴奋的过程中，其兴奋性也发生一个周期性的变化，而后才恢复正常。兴奋性的周期变化，依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期4个时期。[2]

不应期的长短对生物体有着重要的意义，不同的可兴奋组织（细胞）的不应期长短是不尽相同的。神经细胞的不应期一般较短，这是为了能较快地接受外界刺激信号和传导信息，以使机体及时做出反应；而心肌细胞的不应期较长，这是为了使心肌在每一次收缩后有足够的舒张休息的时间，防止心肌过度紧张疲劳甚至出现强直收缩现象而危及机体。[2]

神经干受到有效刺激兴奋以后

一、实验目的：

1. 学习蛙坐骨神经干标本的制备

2. 观察坐骨神经干的双相动作电位波形，并测定最大刺激强度 3. 测定坐骨神经干双相动作电位的传导速度 4. 学习绝对不应期和相对不应期的测定方法 5. 观察机械损伤或局麻药对神经兴奋和传导的影响

二、实验材料

1. 实验对象：牛蛙

2. 实验药品和器材：任氏液，2%普鲁卡因，各种带USB接口或插头的连接导线，神经屏

蔽盒，蛙板，玻璃分针，粗剪刀，眼科剪，眼科镊，培养皿，烧杯，滴管，蛙毁髓探针，BL-420N系统

三、主要方法和步骤：

1. 捣毁脑脊髓 2. 分离坐骨神经 3. 安放引导电极 4. 安放刺激电极 5. 启动试验系统 6. 观察记录 7. 保存 8. 编辑输出

四、实验结果和讨论

1. 观察神经干双相动作电位引导（单通道，单刺激）

如图，观察到一个双相动作电位波形。

2. 神经干双相动作电位传导速度测定（双通道，单刺激）

（1） 选择“神经骨骼肌实验”—“?传导速度测定” （2） 改变单刺激强度

（3） 传导速度 = 传导距离(R1--R2-)/传导时间(t2-t1)

如图所示，两个波峰之间的传导时间 △t = (t2-t1) = 0.66ms

实验中，我们设定在引导电极1和3之间

神经传导速度的测定

一、实验目的

分离蟾蜍的坐骨神经，掌握蛙类坐骨神经干动作电位的记录方法

观察刺激强度对神经干动作电位的影响,测定动作电位在神经干上的传导速度

二、 实验原理

神经细胞（纤维）受到有效刺激（阈刺激，阈上刺激）后，产生了动作电位，即兴奋，它是“全或无”的

神经干动作电位的幅度在一定范围内随刺激强度变化而变化

三、 实验器材

蛙、电极、神经标本屏蔽盒、手术器械、任氏液、培养皿、棉球等

四、实验步骤

1、制作坐骨神经标本

操作方法与腓肠肌标本类似，当分离坐骨神经到膝关节时，再向下分为胫神经和腓神经。小心分离至跟腱处剪断，制成腓神经标本，标本放入任氏液中10min左右备用。

2、连接线路及电极

取出神经标本放在神经屏蔽盒中的电极上 3、仪器调试

选择：实验项目?肌肉神经实验?神经干动作电位的引导

调节刺激参数，单刺激方波、强度1.5V、波宽0.5ms，即可在显示器第一、第二通道上观察到双相动作电位

待显示器上出现动作电位后，再区间两点测量

四、 注意事项

1、尽量减少对神经的牵拉，以免损伤神经,要经常保持标本湿润，神经要尽量分离长些，最好把两个分支都分离到。

2、神经干应与每个使用的电极密切接触。保持标本湿润，但不能滴加过多任氏液

引导电极对蛙坐骨神经干动作双相动作电位波幅的影响

（韶关学院医学院，广东 韶关 512026）

摘要：

目的：探究引导电极对蛙坐骨神经干动作双相动作电位波幅的影响。方法：离体细胞外记录法。取蛙的坐骨神经干标本用神经干标本屏蔽盒处理。结果：电极之间间隔的增大，动作电位的波幅也逐渐增大。结论：电极间隔越大动作电位波幅越大，负相波波幅的均值比正相波波幅的均值大。 [关键词] 引导电极；间距；动作电位；蛙；

前言：

神经干动作电位可以通过动作电位的波幅得到体现。在一定范围内神经干动作电位的幅度随刺激强度的增加而增大，不存在阈强度，不表现为\全或无\特征。蛙类坐骨神经干传导是速度约为35-40 m/S, 神经纤维在一次兴奋过程中，其兴奋性可发生周期性变化，包括绝对不应期，相对不应期，超常期和低常期。本次实验中所给条件刺激和检验性刺激采用参数完全相同的两个刺激，在不同时间间隔内检查检验性刺激所引起的条件性刺激的动作电位的幅度大小，作为反映神经纤维兴奋性变化规律的指标。

1 材料与方法 1.1 材料

1.1.1 仪器 多道生理信号采集处理系统RM6240BD型（成都仪器厂制造）、标本屏蔽盒BB-1型（成都仪器厂制造）、蛙手术用具。 1.1.2 试剂

在体周围神经记录复合神经动作电位的研究很少,尤其在体短距离细小神经记录复合神经动作电位尚未见有研究报道。中国复旦大学华山医院的劳杰教授与华山医院肌电图室合作多次探索进行预实验记录复合神经动作电位,不仅发现了记录的最佳方法,而且发现了小的不同电极之间的距离对复合神经动作电位参数有明显影响。

在体短距离细小神经记录复合神经动作电位的最佳方法

在体周围神经记录复合神经动作电位的研究很少，尤其在体短距离细小神经记录复合神经动作电位尚未见有研究报道。中国复旦大学华山医院的劳杰教授与华山医院肌电图室合作多次探索进行预实验记录复合神经动作电位，不仅发现了记录的最佳方法，而且发现了小的不同电极之间的距离对复合神经动作电位参数有明显影响。实验在完全游离大鼠正中神经后，难以记录到复合神经动作电位，但保留神经中部系膜，将地线置于系膜下，两端放置记录和刺激电极，即可恒定记录到复合神经动作电位。研究结果表明：在大鼠正中神经记录复合神经动作电位，记录电极间距离和刺激电极间距离均以5mm为最佳，刺激电极至记录电极间最佳距离为10mm，顺向记录优于逆向记录。该方法不仅可以为基础研究提供参考。也可为临床探索短的臂丛神经根部或干部记录复合神经动作电位提供新的研究思路。研究成果发表于