磷酸根的测定比色法

磷酸根的测定 一、原理

1、 原理：

在酸性溶液中，经过氧化性酸的消化，将各种形态的磷转化成磷酸根离子（PO43-）。随之用钼酸铵和酒石酸锑钾与之反应，生成磷钼锑杂多酸、再用抗坏血酸把它们还原为深色钼蓝。 2、 干扰

砷酸盐与磷酸盐一样也生成钼蓝。0.1μg/ml的砷就会干扰测定。六价铬、二价铜、 亚硝酸盐能使结果低。 二、仪器与试剂

分光光度计 吸量管2ml 移液管10ml 容量瓶100ml 锥形瓶250ml 比色管25ml 擦镜纸 吸水纸 过硫酸铵（固体） 2mol/L硫酸 2mol/L盐酸 6mol/L氢氧化钠 1%酚酞

钼酸铵溶液：溶解20g（NH4）6MoO24·4H2O于500ml蒸馏水中，用塑料瓶在4℃时保存。

抗坏血酸溶液：0.1mol/L（溶解1.76g抗坏血酸于100ml蒸馏水中，转入棕色瓶， 如在4℃时保存，可维持一个星期不变）。

混合试剂：50ml 2mol/L硫酸，5ml酒石酸锑钾溶液，15ml钼酸铵溶液和30ml抗坏血酸溶液。混合前先让上述溶液达到室温，并按上述次序混合。在加入酒石酸锑钾或钼酸铵后，如混合试剂有混浊，须摇动混合试剂，并放置几分钟，至澄清为止。如在4℃时保

摘要： 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在 620 nm 处有最大吸收 . 在 10 -100 一、目的

掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法. 二、原理

强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在 620 nm 处有最大吸收 . 在 10 -100ug 范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比.

这一方法有很高的灵敏度,糖含量在 30ug 左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用.一般样品少的情况下,采用这一方法比较合适. 三、仪器、试剂和材料

1 、仪器

（1）分光光度计 （2）电子顶载天平

（3）三角瓶： 50m1 X 1 （4）大试管： 9 支 （5）试管架,试管夹 （6）漏斗,漏斗架

（7）容量瓶： 50rnl X 2

（8）刻度吸管： 1m1X3 ， 2m1X1 ， 5mlX1 （9）水浴锅

2、试剂

（1）葡萄糖标准液： l00ug/ml （2）浓硫酸

（3）蒽酮试剂 :0.2g 蒽

食品中铁的测定（邻菲罗啉比色法）

1 目的

熟练掌握直接灰化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握

灰化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握消化法的原理，操作及注意事项。以铁的测定为代表，掌握消化法作为矿物质测定的前处理方法的应用；掌握邻菲罗啉比色法测铁的原理、操作及注意事项。

2 原理

2.1 灰化

食品经高温灼烧至恒重，残留物称重称为灰分；

2.2 消化

样品与浓硫酸和催化剂一同加热，可使蛋白质分解，其中碳和氢被氧化成二氧化碳和水逸出，食品中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵；

2.3 比色法测铁

样品经灰化(或消化)，用抗坏血酸将三价铁还原为二价铁，二价铁与邻菲罗啉反应生成红色络合物，在520nm下测其光吸收强度A，根据A值在标准曲线上查对应二价铁浓度得C样，再计算样品中铁的含量。

3 试剂

硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、邻菲罗啉、铁标准溶液（C=10ug/mL）。

4 仪器

4.1 灰化：瓷坩埚、灰化炉、干燥器、精密天平； 4.2 消化：定氮瓶、铁架台、电炉；

4.3 比色法测铁：水浴锅、可见光分光光度计、25mL比色管。

5 样品

学生营养奶粉

6 操作方法

6.1 样品的灰化处理及样品中灰

磷酸根的测定 一、原理

1、 原理：

在酸性溶液中，经过氧化性酸的消化，将各种形态的磷转化成磷酸根离子（PO43-）。随之用钼酸铵和酒石酸锑钾与之反应，生成磷钼锑杂多酸、再用抗坏血酸把它们还原为深色钼蓝。 2、 干扰

砷酸盐与磷酸盐一样也生成钼蓝。0.1μg/ml的砷就会干扰测定。六价铬、二价铜、 亚硝酸盐能使结果低。 二、仪器与试剂

分光光度计 吸量管2ml 移液管10ml 容量瓶100ml 锥形瓶250ml 比色管25ml 擦镜纸 吸水纸 过硫酸铵（固体） 2mol/L硫酸 2mol/L盐酸 6mol/L氢氧化钠 1%酚酞

钼酸铵溶液：溶解20g（NH4）6MoO24·4H2O于500ml蒸馏水中，用塑料瓶在4℃时保存。

抗坏血酸溶液：0.1mol/L（溶解1.76g抗坏血酸于100ml蒸馏水中，转入棕色瓶， 如在4℃时保存，可维持一个星期不变）。

混合试剂：50ml 2mol/L硫酸，5ml酒石酸锑钾溶液，15ml钼酸铵溶液和30ml抗坏血酸溶液。混合前先让上述溶液达到室温，并按上述次序混合。在加入酒石酸锑钾或钼酸铵后，如混合试剂有混浊，须摇动混合试剂，并放置几分钟，至澄清为止。如在4℃时保

解磷细菌解磷量测定,土壤,水体可溶性磷测定

钼锑抗比色法测定可溶性磷含量

试剂准备：

钼锑贮存溶液：量取153ml浓硫酸(分析纯，密度1.84g/ml)，缓缓加入到400ml蒸馏水中，不断搅拌，冷却。另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O，分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中，冷却。然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。再加入0.5％酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O，分析纯]溶液100ml，冷却后，加水稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色试剂瓶中，此贮备液含钼酸铵1％，硫酸2.75mol/L。

钼锑抗显色剂：称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中，此溶液有效期不长，宜随配随用。

5mg/L磷标准溶液：0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。分析纯)，100ml水，加5ml浓硫酸(防腐)，用水定容到1L，浓度为100mg/L磷(P)，此溶液可以长期保存。吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中，加水至标度，浓度为5mg/L磷(P)标准溶液，此溶液不宜久存。

标准曲线的绘制：

分别准确吸取5mg/L磷（K2HPO4）标准溶液（也可用摩尔浓度）0、2、4、6、8、10ml于50ml容

食品分析实验硫氰酸钾比色法测定食品中铁

1 /

2 实验十一 硫氰酸钾比色法测定食品中铁

一、实验内容

使用可见分光光度计测定样品中铁的含量。

二、实验目的与要求

1、学习掌握分光光度计测定的原理及操作技术。

2、掌握绘制工作曲线法进行定量测定。

三、实验原理

硫氰酸钾比色法：在酸性条件下，三价铁离子与硫氰酸钾作用，生成血红色的硫氰酸铁络合物，溶液颜色深浅与铁离子浓度成正比，故可以比色测定。

反应式如下：

Fe 2(SO 4)3 + 6 KCNS 2 Fe(CNS)3 + 3 K 2SO 4

四、试剂

（1）2% KMnO 4溶液

（2）20% KCNS 溶液

（3）2% K 2S 2O 7溶液

（4）浓H 2SO 4

（5）铁标准使用液：准确称取0.4979g 硫酸亚铁（FeSO 4 · 7H 2O ）溶于100 mL

水中，加入5 mL 浓硫酸微热，溶解即滴加2 %高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪色为止，用水定容至1000 mL ，摇匀，得标准贮备液，此液每毫升含Fe 3+100μg。取铁标准贮备液10 mL 于100 mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀，得标准使用液，此液每mL 含Fe 3+10μg。

五、仪器

可见分光光度计

六、实验步骤

1、样品处

纳氏试剂比色法测定水中氨氮技术的改进

纳氏试剂比色法测定水中氨氮技术的改进

申开旭

（云南省水文水资源局昭通分局）

摘要：纳氏试剂分光光度法测定水中的氨氮，办法简便、快速、灵敏度高，成为水利、环保系统最常用的分析方法。文章对《水质氨氮的测定纳氏试剂分光光度法》HJ535-2009的原理、分析步骤和一些关键性技术问题进行分析和研究，在改进方法的同时给出相应的解决办法。 关键词：氨氮纳氏试剂分光光度法改进

1 纳氏试剂比色法

纳氏试剂光度法的原理是以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与碘化汞和碘化钾的碱性溶液反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮的含量成正比，于波长420nm处测定吸光度。

(1) 仪器与试剂

可见分光光度计，20mm比色皿；pH计；氨氮蒸馏装置：500mL蒸馏烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管；中速定量滤纸；25mL，50mL比色管。

纳氏试剂：本文选用二氯化汞一碘化钾一氢氧化钾 (HgCl2—Kl—KOH)；

酒石酸钾钠溶液（p=500g/L）称取50g酒石酸钾钠溶于l00 mL无氨水中，加热煮沸以驱除氨，充分冷却后用无氨水稀释到100mL。

氨氮标准贮备液（p=l000ug/mL）称取3.8190 g在100—105℃烘箱

土壤全磷的测定

氢氧化钠熔融—钼锑抗比色法

1、方法提要

土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。

2、适用范围

本方法适用于各类土壤全磷含量的测定。 3、主要仪器设备 3.1分光光度计；

3.2高温电炉：升温至1200℃，温度可调； 3.3镍(或银)坩埚：容量≥30mL； 3.4具塞三角瓶：50mL。 4、试剂

4.1氢氧化钠； 4.2无水乙醇；

4.3碳酸钠[ρ(Na2CO3)=100g·L-1]溶液：称取10.0g无水碳酸钠溶于水，稀释至100mL；

4.4 5%硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后加水至100mL；

14.5硫酸溶液[c(H2SO4)=3mol·L-1]：量取168mL浓硫酸缓缓加入到盛有

2约800mL水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L；

4.6二硝基酚指示剂：称取0.2g2，6-二硝基酚溶于100mL水中；

14.7酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6·H2O)=5g·L-1]：称取酒石酸锑钾

20.5g溶于

土壤全磷的测定

氢氧化钠熔融—钼锑抗比色法

1、方法提要

土壤样品与氢氧化钠熔融，使土壤中含磷矿物及有机磷化合物全部转化为可溶性的正磷酸盐，用水和稀硫酸溶解熔块，在规定条件下样品溶液中的磷酸根与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比，通过分光光度法定量测定。

2、适用范围

本方法适用于各类土壤全磷含量的测定。 3、主要仪器设备 3.1分光光度计；

3.2高温电炉：升温至1200℃，温度可调； 3.3镍(或银)坩埚：容量≥30mL； 3.4具塞三角瓶：50mL。 4、试剂

4.1氢氧化钠； 4.2无水乙醇；

4.3碳酸钠[ρ(Na2CO3)=100g·L-1]溶液：称取10.0g无水碳酸钠溶于水，稀释至100mL；

4.4 5%硫酸溶液：吸取5mL浓硫酸缓缓加入90mL水中，冷却后加水至100mL；

14.5硫酸溶液[c(H2SO4)=3mol·L-1]：量取168mL浓硫酸缓缓加入到盛有

2约800mL水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L；

4.6二硝基酚指示剂：称取0.2g2，6-二硝基酚溶于100mL水中；

14.7酒石酸锑钾溶液[ρ(K(SbO)C4H4O6·H2O)=5g·L-1]：称取酒石酸锑钾

20.5g溶于

详细介绍DNS法测定还原糖的量。

还原糖和总糖的测定

(3,5-二硝基水杨酸比色法)

一、实验目的

1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理

2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用

二、实验原理

还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。

还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类。单糖都是还原糖,双糖和多糖不一定是还原糖,例如乳糖和麦芽糖是还原糖,蔗糖和淀粉是非还原糖。利用各种糖的溶解度不同,可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来。对非还原性的双糖和多糖,可用酸水解法使其降解成还原性单糖进行测定,再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(常以葡萄糖含量计)。

还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物,而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子水,所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。

三、实验材料和试剂

1、实验材料 面粉 2、实验试剂

① 1mg/ml葡萄糖标准液

详细介绍DNS法测定还原糖的量。

准确称取80℃烘至恒重的分析纯葡