细胞骨架与肿瘤的关系

细胞骨架与肿瘤

一、什么是细胞骨架

细胞骨架是真核细胞中真核细胞内蛋白纤维交织而成的立体网架结构，参

与细胞形态的维持、细胞运动、细胞分裂等几乎所有的细胞生命活动。广义的细胞骨架有：细胞质骨架、核骨架、核纤层、细胞外基质。狭义上可分为：微管、微丝和中间纤维。细胞骨架作为支架可维持细胞的形态，亦可为细胞内细胞器提供附着位点；还分别参与细胞转运、信号转导、细胞分裂等功能。

1、微管，直径约25nm。典型的微管是由,根原纤维形成的一个空管,常延伸到像纤毛、鞭毛或某些原生动物的轴伪足这样一些长细胞突起中,形成有规则构型的复合物。由微管蛋白和微管结合蛋白组成，微管的装配分三个时期：成核期、延长期和稳定期。微管组装的动态调节模型有：非稳态动力模型和踏车模型。影响微管组装的因素有：微管蛋白浓度、GTP、Mg离子、温度和PH。其功能有：维持细胞形态，参与细胞特定结构的形成，参与细胞内物质的运输，参与细胞的运动，参与细胞内信号转导，维持细胞内细胞器的定位和分布。

2、微丝，直径为6一8nm。在微绒毛、褶终膜和微靖等细胞的伸展部分尤为显著。其结构与功能和微管相似。

3、中间纤维，除微丝和微管外,在高等生物细胞中通常还能观察到第三类纤维—中等纤维(其直径界

第七章 细胞骨架

第七章 细胞骨架

一、填空题

A-七-1. 细胞骨架是指存在于真核细胞中的蛋白纤维网架体系，狭义的骨架系统主要包括 微丝 、 微管 和 中间丝 。

A-七-2. 构成微管的蛋白有两类： α微管蛋白 和 β微管蛋白 。

A-七-3. 微管在细胞中有三种存在形式：单管、 二联管 和 三联管 ，其中主要分布在纤毛和鞭毛杆状部位的是 二联管 。

A-七-4. 装配时具有“踏车现象”的细胞骨架是 微丝 和 微管 。

A-七-5. 紫杉醇是作用于 微管 的特异性药物，而鬼笔环肽是作用于 微丝的特异性药物。

A-七-6. 微丝的基本组成单位是 肌动蛋白 ，其在细胞中也有两种存在方式： ① 球状肌动蛋白 ② 纤丝状肌动蛋白 。

A-七-7. 在细胞骨架系统中较为稳定的一种骨架纤维是 中间纤维 。 A-七-8. 中间纤维蛋白分子 八 聚体之间在纵向端对端首尾相连组成一条原纤维， 四 条原纤维侧向相互作用最终形成中间纤维。

A-七-9. 细胞骨架中具有极性的为 微丝 和 微管 。

B-七-10. 鞭毛和纤毛内部是由 微管 组成的轴丝构成的结构。其基部的结构式为__三联管__，而其杆部的结构

Chapter 1０ 细胞骨架与细胞运动

10.1 细胞骨架的组成和功能

10.1.1 细胞骨架的组成和分布

微管：主要分布在核周围,并呈放射状向胞质四周扩散； 微丝：主要分布在细胞质膜的内侧； 中间纤维：分布在整个细胞中。 10.1.2 细胞骨架的功能

①作为支架(scaffold)； ② 在细胞内形成一个框架(framework)结构；③ 为细胞内的物质和细胞器的运输及运动提供机械支持；④ 为细胞的位置移动提供力；⑤ 为信使RNA提供锚定位点，促进 mRNA翻译成多肽；⑥ 是细胞分裂的机器；⑦ 参与信号转导。

10.2 微管(microtuble, MT)

10.2.1 微管的结构和类型

中空的管状；外径约 24 nm，内径约 14 nm, 壁厚 5 nm；长度变化不定。 细胞内微管呈网状和束状分布, 并能与其他蛋白共同组装成纺锤体、基粒、中心粒、纤毛、鞭毛、轴突、神经管等结构。 A 微管的结构

微管是由微管蛋白异源二聚体为基本构件，螺旋盘绕而成；在每根微管中二聚体头尾相接, 形成细长的原纤维(protofilament)； 13条原纤维纵向排列组成微管的壁。

B 微管蛋白(tubulin)类型：

α和β微管蛋白：直径4nm的

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

姓名：常天易 系年级：海洋生命学院2012级 专业：生物科学

科目：分子细胞生物学实验 学号：12050011006

植物细胞骨架的观察

一、实验目的：

1. 掌握植物细胞骨架处理及染色方法。 2. 对细胞骨架的形态和分布有一个初步认识。

二、实验原理：

真核细胞胞质中存在的纤维网状结构称为细胞骨架，包括：微管

（直径20-25nm）、微丝（直径6-7nm）、中间丝（直径10nm）、和粗丝等。考马斯亮蓝R250是一种普通的蛋白质染料，它可以使各种细胞骨架蛋白着色，显示微丝组成的张力纤维。张力纤维（直径40nm）在体外培养细胞中普遍存在，与细胞对基质的附着，维持细胞扁平铺展的性状有关。

三、实验材料

洋葱表皮细胞

试剂：

1、0.01mol/L的磷酸盐缓冲液 2、M-缓冲液

3、1%Triton X-100/M-缓冲液 4、30%戊二醛-PBS溶液

四、实验方法

撕取1平方厘米见方的洋葱表皮细胞，在培养皿中浸泡于PBS缓冲液中，使其沉底。 去PBS溶液，加入1% TritonX-100处理30min 去 TritonX-100，使用M-缓冲液洗三遍，每次5min 加入3%戊二醛溶液固定3

[来源学科网ZXXK]

细胞骨架

A型题：

1.细胞骨架是由哪几种物质构成的

A.糖类 B.脂类 C.核酸 D.蛋白质 E.以上物质都包括 2.下列哪种结构不是由细胞中的微管组成

A.鞭毛 B.纤毛 C.中心粒 D.内质网 E.以上都不是 3.关于微管的组装，哪种说法是错误的

A.微管可随细胞的生命活动不断的组装与去组装 B.微管的组装分步进行

C.微管的极性对微管的增长有重要意义

D.微管蛋白的聚合和解聚是可逆的自体组装过程 E.微管两端的组装速度是相同的

4.在电镜下可见中心粒的每个短筒状小体

A.由9组二联微管环状斜向排列 B.由9组单管微管环状斜向排列

C.由9组三联微管环状斜向排列 D.由9组外围微管和一个中央微管排列 E.由9组外围微管和二个中央微管排列 5.组成微丝最主要的化学成分是

A.球状肌动蛋白 B.纤维状肌动蛋白 C.原肌球蛋白 D.肌钙蛋白 E.锚定蛋白 6.能够专一抑制微丝组装的物质是

A.秋水仙素 B.细胞松弛素B C.长春花碱 D.鬼笔环肽 E.Mg+ 7.在非肌细胞中，微丝与

第九章 细胞骨架

一、名词解释 1、肌动蛋白

2、中心粒/中心体 3、细胞骨架 4、动力蛋白 5、驱动蛋白 6、微管组织中心 7、踏车行为 二、判断题

1、与微丝不同，中间纤维蛋白合成后，基本上均组装成为中间纤维，没有大量游离的单体存在。

2、通常微管的负极指向中心体

3、微管和微丝都具有极性，在装配时，正极的装配速度较快。

4、微管和微丝的装配需要能量，而中间纤维的自发装配不需要能量。

5、通常细胞内微丝和微管处于动态平衡，在低温条件下，微丝和微管趋向于解聚

6、肌动蛋白单体在临界浓度时，微丝的正极趋于装配，负极趋于解聚，微丝长度保持相对不变。

7、微丝和微管的两端都可以进行装配和解聚。 8、纤毛的运动与微管有关。 9、细胞松弛素可以使细胞变圆

10、纺锤体与染色体的运动有关，其中动粒微管在染色体运动时发生显著变化，而极微管和星体微管变化不大。

11、细胞松弛素的作用是促进微丝的稳定性。

12、与肌动蛋白和微管蛋白不一样，中间纤维蛋白具有组织特异性。 13、肌动蛋白的装配需要ATP提供能量。 14、微管蛋白的装配需要GTP提供能量。 15、微管蛋白的α和β亚基上都具有GTP结合位点，在微管装配时α亚基上的GTP会发生水解。

16、微管的直

植物细胞骨架的光学和荧光显微镜观察

一、实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。

二、实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白

质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，用光学染料考马斯亮兰R250和荧光染料鬼笔环肽染色，在普通光学显微镜和荧光显微镜下观察微丝结构。

三、实验步骤：

光学观察 1、

撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有

pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉；材料预处理时间太短会影响下一步操作，务必过夜处理。 2、 3、 4、 5、 6、

吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min； 3%戊二醛固定30min；

pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min；

0.2%考马斯亮兰R250染色20min或者25μg/ mL罗丹明-

鬼笔环肽染色1小时； 7、

用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖

玻片，于显微镜下观察。

荧光观察：

1． 固定液中(固定液成份:4 %多聚甲醛, 50 mmol/ L Pipes pH 6.9 ,

5 mmol/ L EGTA , 5mmol/

探究饮食，体液酸碱度与肿瘤细胞酸性微环境之间的关系

[摘 要]由于机体可通过缓冲离子、肺和肾的调节，及细胞内外的离子交换等途径维持体液酸碱度（ph）在7.35-7.45 的正常生理范围内），一般认为，即使食物进入人体产生大量的酸性产物，单纯饮食因素难以导致人体体液酸碱度的变化。所以，不良饮食习惯可导致酸碱性体质的学说一再受到质疑。但是，近些年大量文献证明，健康的饮食习惯可以预防、延缓、甚至遏制肿瘤细胞的生长和转移。有报道显示，肿瘤酸性微环境会诱导肿瘤细胞侵袭，转移和耐药。这些结果提示，饮食，体液酸碱度及肿瘤细胞酸性微环境之间可能存在一定的相关性。

[关键词]饮食 体液酸碱度 肿瘤细胞酸性微环境

中图分类号：r285.5 文献标识码：a 文章编号：1009-914x（2013）08-306-02 1 食物酸碱性

1.1 食物酸碱性的狭义观点

人体摄入蛋白质、脂肪、葡萄糖后均会产生二氧化碳（co2），它在碳酸酐酶的作用下与水（h2o）结合生成碳酸（h2co3）。碳酸酐酶广泛存在于机体各类细胞中，比如红细胞，肾小管上皮细胞，肺泡上皮细胞及胃粘膜。有人统计，人体在安静状态下每天产生约300～400mlco2，如果全部与h2o结合，每天可释放产生13～

研究进展

医学研究杂志２００９年９月第３８卷第９期

特别关注

ＦＡＫ与肿瘤关系的研究进展

刘小利

随着对肿瘤分子生物学水平研究的逐步深入，人们逐渐认识到，酪氨酸激酶与肿瘤的发生发展密切相关，酪氨酸激酶活性过高或过度磷酸化，激活下游信号途径，导致细胞过度增生、对抗细胞凋亡、促进细胞生存，最终导致肿瘤的形成。黏着斑激酶（ｆｏｃａｌ

ａｄｈｅ—

ｓｉｏｎ

ｋｉｎａｓｅ，ＦＡＫ）是近几年备受关注的一种非受体

酪氨酸激酶，在多种肿瘤中均有表达，ＦＡＫ参与细胞的增生、迁移和存活，与肿瘤的生长、侵袭和转移密切相关。

一、ＦＡＫ结构特征

１９９２年，Ｈａｎｋｓ等从ｖ—ｓｒｃ转染的鸡胚成纤维细胞中克隆鉴定出来ＦＡＫ，因其与细胞黏附功能密切相关，故命名为黏着斑激酶。ＦＡＫ在进化上高度保守，在果蝇、斑马鱼、鸟、鼠、非洲蟾蜍、人类中均有表达，由ｃＤＮＡ推导的蛋白质顺序发现，各种生物来源的ＦＡＫ的同源性大于９０％。编码人的ＦＡＫ基因定位于８ｑ２４，ｃＤＮＡ全长４２８５ｂｐ，编码１０２８个氨基酸，相对分子质量为１２５ｋＤａ。蛋白质结构由３个功能区域组成，即Ｎ端区、激酶区和Ｃ端区。每个区域包含大约４００个氨基酸残基。Ｎ端功能域包括１—３８９位氨基酸，含有同整合素８亚单位、细胞骨架蛋白和信号

肿瘤的细胞免疫治疗

□华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究与应用中心

湖北省生物靶向治疗研究重点实验室

傅冰洁张萌李欣审校黄士昂教授

（２００７）０４－００６１－０４［中图分类号］Ｒ７３０．５［文献标识码］Ａ［文章编码］１６７１－９４５Ｘ

肿瘤是各种致癌因素诱发细胞恶变和多种免疫细胞抗肿瘤监测杀伤功能两种“阴阳”机制互动失衡导致的恶性疾病。传统的肿瘤治疗主要是通过手术、化疗与放疗来达到早期根除肿瘤和减轻瘤负荷的目的，存在着肿瘤转移与复发的危险性，具有损伤正常组织与免疫功能低下等严重副作用，导致目前临床上肿瘤转移、复发和死亡的几率极高。肿瘤的免疫细胞治疗是通过恢复与增强肿瘤患者自身的免疫监测和杀瘤功能，可以有效地杀灭患者术后和放化疗后体内残存的肿瘤细胞，达到治疗肿瘤、预防复发与转移和最终根治肿瘤的目的，具有特异性强、副作用轻等优点，正在逐步成为肿瘤综合治疗中的一个重要环节，也是当前肿瘤治疗基础研究和临床应用的热点与发展方向。

目前的肿瘤免疫细胞治疗主要包括：细胞因子诱导杀伤细胞、淋巴因子激活杀伤细胞、自然杀伤细胞和特异性更强的肿瘤浸润细胞等具有直接杀伤肿瘤细胞效应的免疫细胞，可呈递肿瘤特异性抗原以活化具杀伤效应的Ｔ细胞的ＤＣ细胞，以及具有负向免疫调