大鼠骨髓基质细胞体外培养

相互交流

【摘要】 目的 探讨不同大鼠脂肪基质细胞的培养、增殖与纯化方法，初步研究其生物学特性。方法 取大鼠皮下和肠系膜部位的脂肪组织，根据两种组织对胶原酶的敏感性不同，获取基质细胞，观察生长情况，并进行鉴定。结果 不同品系大鼠脂肪含量不同，皮下和肠系膜脂肪基质干细胞产率不同，生物学特性相似，贴壁细胞分两类： 第一类有明显油滴；第二类细胞内无明显油滴。第一类细胞经过传代，逐渐消失，第二类细胞所要获取的脂肪基质细胞，组化鉴定CD49d(+)和CD106(-)，为脂肪基质细胞表型。结论 建立了一种大鼠脂肪基质细胞的培养、增殖与纯化方法，不同部位来源的脂肪组织酶消化时间和细胞产率不同，同时发现所获得细胞分两类，性质有所不同，为脂肪基质细胞的相关研究打下一定的细胞生物学基础。

【关键词】 大鼠 脂肪 肪基质细胞 培养

Isolation，Culture and Identification of Rat Adipose?Derived

Stem Cells In Vitro

CHEN Lian?feng，LIN Xue，FANG Quan

(Department of Cardiology，PUMCH，Chinese Academy of Medical Sci

·222·（ChinJNeurosurgDisRes）2011；10（3）

文章编号：1671－2897（2011）10－222－05

·论著·

大鼠骨髓基质干细胞治疗C6胶质瘤实验研究

郑朝辉

刘卫平

*

魏礼洲张玉奇钟俊刘阳龙乾发杨扬（第四军医大学西京

医院神经外科，陕西西安710032）

摘要

目的

观察骨髓基质干细胞（BMSCs）在体内环境下对C6胶质瘤的治疗效果。方法

流

Meier图，rankTest，HE行Log-式细胞术检测培养的BMSCs表面标记；SD大鼠生存周期绘成Kaplan-染色和BrdU免疫组化染色观察BMSCs对胶质瘤的趋向性和治疗情况。结果染色示BMSCs存在于肿瘤组织及其周边。结论

关键词

骨髓基质干细胞；

5溴脱氧尿苷；

流式实验显示所培养

细胞为BMSCs；HE染色结果示呈瘤率为100%，实验组较对照组生存时间明显延长；BrdU免疫组化

BMSCs可向肿瘤组织迁移，侧脑室移植BMSCs后，C6胶质瘤

A

并可改善荷瘤大鼠的生存质量，明显延长其晚期生存周期。

中国图书资料分类号

R739．41

文献标识码

EffectofbonemarrowmesenchymalstemcellsfortreatmentofC6gli

对不同发育阶段五指山小型猪(WZSP)近交系的睾丸组织,采用不同的消化和培养方法进行了一系列的探索、研究。实验显示： 培养SSCs 的最佳时限为仔猪出生后1～20日龄;对不同日龄仔猪采用不同消化方法,以DMEM为基础培养液并添加不同成分,34℃,5%CO2培养箱中饱和湿度条件下培

!!卷"期!##$年%月生物工程学报!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12&’()!!*’)"

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五指山猪近交系精原干细胞体外培养研究

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成钢J，冯书堂!"

GDN*PP7A@J7A34N*PQ<,L;7A@!"

常德J湖南文理学院，

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J###M"

北京!中国农业科学院畜牧

目的研究探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对SD大鼠脑梗死的治疗效果。方法分离培养SD大鼠BMSCs,并建立大脑中动脉栓塞实验动物模型;尾静脉注射BMSCs并设立PBS对照组,观察大鼠神经损伤程度和测定脑梗死体积。结果 BMSCs移植组大鼠神经功能评分比同时间点PBS对照组大鼠明显下降(P〈0.05);BMSCs移植组大鼠脑梗死面积为(95±18)mm3,明显〈PBS对照组大鼠(P〈0.05)。结论经静脉注射

第3 5卷 21 0 1年第 9期

黑

龙

江

医

学

Vo . 5, . 1 3 No 9

HEIL G I 0N JANG MED C 0 I AL J URN AL

S p2 1 e . 01

66 3

实验研究

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的研究李军杜金荣戴艳萍，,

(.黑龙江省医院南岗院区神经内科， 1黑龙江哈尔滨 10 0; 5 0 1 2 .哈尔滨医科大学附属第四医院病理科，黑龙江哈尔滨 10 0 ) 5 0 1

摘要： 研究探讨骨髓间充质干细胞 ( MS s对 S大鼠脑梗死的治疗效果。方法分离培养 S 目的 B C) D D大鼠 B C,建立大脑中动脉栓塞实验动物模型；静脉注射 B C并设立 P S对照组，察大鼠神经 MS

第27卷第6期第　三　军　医　大　学　学　报Vol.27,No.6

2005年3月ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　MILITARIS　TERTIAEMar.2005

471

文章编号:100025404(2005)0620471203　　

论著

三羟异黄酮对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的保护作用

周　永,糜漫天,杨镇洲　　(第三军医大学:1预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆400038,2大坪医院野战外科研

究所肿瘤中心,重庆400042)

　　提　要:目的　探讨三羟异黄酮(genistein,GEN)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)的保

护作用。方法　成年雄性小鼠辐射前24h给予GEN,610Gyγ射线辐射后观察BMSCs的形态变化、成纤维细胞集落(CFU2F)形成数量、BMSCs层对正常小鼠骨髓细胞(BMCs)的粘附能力以及血管细胞粘附分子(VCAM21)、纤维连接素(Fn)和层粘素(Ln)等细胞粘附分子的变化。结果　GEN处理组辐射后BMSCs虽然形态上与单纯辐射损伤组在光镜下无差异,但其CFU2F形成数量、对正常BMCs的粘附能力以及VCAM21、Fn和Ln等细胞粘

第27卷第6期第　三　军　医　大　学　学　报Vol.27,No.6

2005年3月ACTA　ACADEMIAE　MEDICINAE　MILITARIS　TERTIAEMar.2005

471

文章编号:100025404(2005)0620471203　　

论著

三羟异黄酮对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞的保护作用

周　永,糜漫天,杨镇洲　　(第三军医大学:1预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆400038,2大坪医院野战外科研

究所肿瘤中心,重庆400042)

　　提　要:目的　探讨三羟异黄酮(genistein,GEN)对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)的保

护作用。方法　成年雄性小鼠辐射前24h给予GEN,610Gyγ射线辐射后观察BMSCs的形态变化、成纤维细胞集落(CFU2F)形成数量、BMSCs层对正常小鼠骨髓细胞(BMCs)的粘附能力以及血管细胞粘附分子(VCAM21)、纤维连接素(Fn)和层粘素(Ln)等细胞粘附分子的变化。结果　GEN处理组辐射后BMSCs虽然形态上与单纯辐射损伤组在光镜下无差异,但其CFU2F形成数量、对正常BMCs的粘附能力以及VCAM21、Fn和Ln等细胞粘

2011年9月第31卷第9期

文章编号：1001-6325（2011）09-1000-06

基础医学与临床Basic＆ClinicalMedicineSeptember2011Vol．31No．9

研究论文

细丝蛋白A抑制人结肠癌SW480细胞体外侵袭转移能力

1，223

史建伟，于跃明，王士杰，杨

45

珊，孔繁龙，张

22*娟，王贵英

（1.河北大学附属医院肿瘤外科，河北保定071000；河北医科大学第四医院2.外二科；3.肿瘤研究所；4.外一科；

河北石家庄050011；5.山西医科大学临床二系07级，山西太原030001）

摘要：目的研究细丝蛋白A（FLNa）对人结肠癌SW480细胞侵袭转移行为的影响，并初步探讨其抑癌的机制。方

His-TOPO/FLNa，法将FLNa基因质粒载体pcDNA3.1/V5-以脂质体介导方式转染SW480细胞。经G418筛选，获PCR）和Westernblot检测FLNa基因导得FLNa基因稳定表达的SW480/FLNa细胞。反转录聚合酶链反应（RT-PCR和Westernblot检测细胞中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达；MTT法检测细胞的增殖能力；划痕损伤入；RT-Transwell小室和Matrigel侵袭模型评价FL

欢迎阅读细胞培养基质量标准及检验方法

中国医药生物技术协会

二0一一年四月

编写说明

一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管理

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。

2.3干燥减量的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅦL干燥失重测定法进行。

2.4渗透压的测定

欢迎阅读

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。

取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。

2.5细菌内毒素的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。

2.6

2.7

2.7.1

72h，养

；

，混

150代。

4)细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；

3)胰蛋白酶溶液：称取胰蛋白酶（1:250）2.5g，精确至0.01g，加1000ml平衡盐溶液，混匀、测pH值，用1mol/LNaOH或1mol/L

欢迎阅读细胞培养基质量标准及检验方法

中国医药生物技术协会

二0一一年四月

编写说明

一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管理

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。

2.3干燥减量的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅦL干燥失重测定法进行。

2.4渗透压的测定

欢迎阅读

称取每升标示量的实验室样品，置于1000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml,搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。

取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。

2.5细菌内毒素的测定

按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅫE细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。

2.6

2.7

2.7.1

72h，养

；

，混

150代。

4)细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；

3)胰蛋白酶溶液：称取胰蛋白酶（1:250）2.5g，精确至0.01g，加1000ml平衡盐溶液，混匀、测pH值，用1mol/LNaOH或1mol/L

生物陶瓷复合骨髓基质干细胞及骨形态发生蛋白修复兔大

段桡骨缺损

作者：王天胜;滕寿发;王法;郭利;丁海蛟;刘鹏;张英霞;曹宇;王湛;

作者机构：解放军第四六三医院骨科,辽宁省沈阳市110042;中国医科大学生理教研室,辽宁省沈阳市110001;中国医科大学94期7年制临床医学系,辽宁省沈阳市110001;;;;;;;

来源：中国组织工程研究

年：2015

卷：019

期：003

页码：P.347-351

页数：5

中图分类：R318

正文语种：CHI

关键词：生物材料;骨生物材料;生物陶瓷;大段骨缺损;骨髓基质干细胞;桡骨;骨形态发生蛋白

摘要：背景：人工合成生物陶瓷作为良好的生物支架材料与自体骨髓基质干细胞复合并联合诱导成骨物质移植的骨组织工程为大段骨缺损的患者带来了新希望。目的：观察生物陶瓷复合骨髓基质干细胞及骨形态发生蛋白修复兔大段桡骨骨缺损的疗效及可行性。方法：实验植入兔双上肢桡骨中段制造长约1.5 cm的大段骨缺损模型，将左侧骨缺损区作为实验组，植入生物陶瓷与骨髓基质干细胞＋骨形态发生蛋白；右侧骨缺损区作为对照组，单纯植入生物陶瓷。建模后4，8，12，24周各时间点对各组动物行标本大体观察、X射线片观察及组织学观察，比较其骨缺损区修复愈合情况。结果与结论：建