畜牧微生物实验

绪论

1． 生物包括人类、动物、植物、微生物。微生物是指个体微小，通常需要借助显微镜才能看见的生物类群。 2． 重要人物及其事迹

①1676年荷兰人吕文虎克(Antony van Leeuwenhoek)用自制的放大200倍的显微镜，首次观察到微生物。

②1861年法国学者巴斯德(Pasteur)以弯颈瓶实验证明自然发生论是荒谬的。证明曲颈瓶内肉汤变坏源于空气中微生物“种子”。 ③巴斯德的功绩：彻底否定了自然发生学说；证实发酵由微生物引起；发现免疫学现象，预防接种；发明巴氏消毒法。 ④科赫的功绩：发明培养基并用其纯化微生物；证实炭疽病因——炭疽杆菌，发现结核病原菌——结核杆菌；科赫法则。 3． 微生物的分类(按核的类型&个体形态)

原核微生物 个体为单细胞，含DNA&RNA，DNA分子在细胞质中未成形的细胞核结构 包括细菌、螺旋体、支原体、衣原体、蓝藻类

微生物 真核微生物 个体为单细胞或多细胞，含DNA&RNA，DNA分子在完整的细胞核内 包括真菌、大多数藻类、原生动物

非细胞型微生物 个体不呈细胞结构

畜牧微生物学复习题

一、名词解释

荚膜；一些种类细菌在生活过程中可以在细胞壁外面产生一种黏液样的物质包围整个菌体 菌胶团；一团荚膜内含多个细菌时则称为菌胶体

芽孢；某些革兰阳性菌在一定环境条件下，可在菌体内形成一个圆形和卵圆形休眠体，称为芽孢

培养基；培养基是人工配制的基质，含有细菌等生长繁殖所必需的营养物质，常用于分离培养鉴定和研究细菌等微生物

菌落；单个细菌在适宜的固体培养基表面或内部，经过一定时间培养后繁殖出数量巨大的菌体形成肉眼可见的有一定形态的群体 菌苔；菌落互相连接成片，称为菌苔 灭菌；杀死物体中所有微生物，称为灭菌 消毒；杀死物体中的病原微生物，称为消毒 防腐；组织或抑制微生物的生长繁殖

正常菌群；正常条件下，人体体表及与外界相通的腔道经常存在着对人体无损害的各种细菌 菌群失调；宿主受到日粮突变、环境恶化、患病手术等应激性或是滥用抗菌药物的情况下，正常菌群中的微生物种类数量发生改变，菌群平衡受到破坏

SPF动物（无特定病原动物）；不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性的微生物及其抗体或寄生虫的动物

无菌动物（GF动物）；体内外不携带任何微生物或寄生虫的动物

类毒素；外毒素经过0.3%-0.5%的甲醛处理脱去毒性，仍保留良好抗原性

畜牧微生物作业题（一）

一、填空题

1细菌的基本外型比较简单，仅有（球）状、（杆）状和（螺旋）状。 2测量细菌大小的计量单位是（微米（或μm））。观察细菌使用的是（光学）显微镜。使用的物镜是（油镜）。 3革兰氏阳性菌细胞壁较（ 薄），其主要化学成分主要是（肽聚糖 ），革兰氏阴性菌内毒素的主要成分是(类脂A ) ，存在于（脂多糖（或LPS） ）中。 4有些细菌具有( 荚膜)、（ 鞭毛）、（ 纤毛（或菌毛、伞毛、柔毛） ）和（芽孢 ）等特殊结构。

5产生荚膜或粘液层的细菌，在固体培养基上形成（光滑型（或S） ）菌落，失去荚膜后形成（粗糙型（或R） ）菌落。 6根据纤毛的功能可将纤毛分为（普通纤毛）、（性纤毛）。 7细菌生长繁殖需要5大营养物质它们是（水 ）、（ 碳素）、（氮素 ）、（无机盐 ）和（ 生长因素）。

8根据细菌对碳素营养利用的能力不同，可以把细菌分为（自养）菌和（异养 ）菌，根据6细菌获得能量的方式不同可分为(光能)菌和（化能 ）菌。

9病原性细菌在其生长繁殖的（对数 ）期致病性最强，在（稳定 ）期代谢产物积累最多。细菌以（二分裂）方式进行无性繁殖。

10原核型细胞微生物除细菌和蓝藻类外还包括（螺旋体 ）、（霉形体 ）、（ 立克次氏体

环境因素 对微生物生长的影响

班级：食品科学与工程102班

指导老师：郭玉宝 学号：3100401214 姓名：何月

实验目的：

1、了解抗生素对微生物生长的影响，学习抗菌谱实验的基本方法。

2、了解常用化学消毒剂对微生物生长的影响。 实验原理：

微生物的生长繁殖受外界因素的影响。物理，化学，生物及营养等不同环境因素影响微生物生长繁殖的机制不同，而，不同类型微生物对同一环境因素的适应能力也有差别。 1、生物因素

在自然界中普遍存在网速间的颉颃现象，许多微生物可以产生抗生素，能选择性的一致或杀死其他微生物。不同抗生素的抗菌谱是不同的。当滤纸条上的抗生素溶液在琼脂平板上向四周扩散后可形成抗生素浓度由高到低的梯度，将不同试验菌与滤纸条划线接种。培养后，根据抑菌带的长短可判断出该抗生素对不同试验菌生长的影响程度，初步确定其抗菌谱。 2、化学消毒剂

常用的化学消毒剂包括有机溶剂、重金属盐、卤族元素及其化合物。燃料和表面活性剂。 实验器材： 1、菌种

大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌 2、培养基

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 3、溶液和试剂

青霉素溶液、无菌生理盐水、2.5%碘酒、5%石碳酸、1%来苏尔、75%乙醇、0.25%新洁尔灭 4、仪器和其他用品

情境一：分离纯化和选育生产菌种 发酵工艺技术教材

项目2 保藏微生物菌种操作

◆ 学习目标 1.了解各种菌种保藏的基本原理和优缺点； 2.学会根据菌种的特点选择相应的保藏方法；学会采用不同方法进行保藏菌种操作。 菌种是从事微生物学以及生命科学研究的基本材料，特别是利用微生物进行有关生产，如抗生素、氨基酸、酿造等工业，更离不开菌种。所以菌种保藏是进行微生物学研究和微生物育种工作的重要组成部分。其任务首先是使菌种不死亡，同时还要尽可能设法把菌种的优良特性保持下来而不致向坏的方面转化。 当然保藏菌种使其不变异亦是相对而言的。实际上没有一种方法可使菌种绝对不变化，所以研究菌种保藏就是要采用最合适的保存方法，使菌种的变异和死亡减少到最低限度。

菌种是国家的重要资源，世界各国对这项资源都给予极大重视，很早就设臵了各种专业性的保存机构，如ATCC、NRRL等。1980年我国成立了中国微生物菌种保藏委员会。 1 基础知识

菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点，人工创造条件，使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。一般可通

畜牧微生物学讲义

动物科学专业

预防兽医学微生物教研组

陆英杰

E-mail：

QQ：919220436; Tel：13500257708

二零一零年十二月十日

目录

绪论---------------------------------------------------------------------1学时

第一章 原核细胞型微生物----------------------------------------5学时

第二章 真核细胞型微生物----------------------------------------2学时

第三章 非细胞型微生物-------------------------------------------4学时

第四章 自然界中微生物的分布----------------------------------1学时

第五章 外界因素对微生物的影响-------------------------------1学时

第六章 微生物遗传与变异----------------------------------------2学时

第七章 动物免疫学基础（仅本科）----------------------------6学时

第八章 饲料微生物-

实验二 理化因子对微生物的影响

实验目的：

1 了解紫外线对微生物生长的影响。 2 了解不同化学物质对微生物生长的影响。 3 了解理化因素抑制或杀死微生物的试验方法。 实验原理：

1 紫外线对微生物有明显的致死作用，使细菌致死的紫外线波长是200-310nm，而以260nm左右的紫外线具有最高杀菌效应。作用机理是诱导胸腺嘧啶二聚体的生成，从而抑制DNA的复制。经紫外线照射受损伤的细菌细胞，如立即暴露于可见光下，则有一部分可恢复正常活力，称为光复活现象。

2 一些化学药剂对微生物的生长有抑制或杀死作用，因此，在实验室内及生产上常利用某些有效的化学药剂进行杀菌或消毒。不同的化学药剂对不同的细菌，杀菌能力并不相同，而一种化学药剂对不同细菌的杀菌效果也不一致。 实验材料：

1 菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。 2 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基。

3 器材与试剂：滤纸、镊子、培养皿、涂棒、试管支。 75%乙醇、 1%结晶紫、 0.2mg/L青霉素、 0.1%KMnO4、 实验方法： 一 紫外线杀菌实验

1 将已灭菌冷却到50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒入无菌培养皿中，水平放置待凝固。

2 用无菌吸管吸取0.1ml培养24h的枯草芽孢杆菌菌液加入上述平板

1、 牛肉膏蛋白胨培养基属于何种培养基？

属于天然培养基。

2、 培养基配制完成后，为什么必须立即灭菌？若不能及时灭菌应如何处理？已灭菌的培养

基如何进行无菌检查？

①培养基配置完成后就具备了营养功能，在空气中会有很多孢子等落进去，如果放的时间长了，等微生物生长了，营养成分就降低了，而且营养结构也变化了。再就是有些特殊的培养基，里面各种物质不灭菌也就是不加热的话，彼此反应，这样就达不到最后的营养结构了。 ②培养基不及时灭菌，一般就不能再用了，你可以倒进垃圾桶或者指定的地方，也可以把它灭菌后用于比较低级的微生物培养。 节约起见，做肥料了啥的都可以啊。

③通常是放在37℃的恒温箱中一两天后 培养基上没有生长任何微生物的就可以使用（若有微生物则是以菌落出现的 肉眼可以看见的）。

3、 为什么湿热灭菌比干热灭菌法更有效？

① 热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强。水分子的存在有助于破坏维持蛋白质三维结构的氢键和其他相互作用弱键，更易使蛋白质变性；

② 热蒸汽比热空气穿透力强，能更有效地杀灭微生物；

③ 蒸汽存在潜热。当气体转变为液体时可放出大量热量，故可迅速提高灭菌物体温度。

4、 高压蒸汽灭菌开始之前，为什么要将锅内冷空气排尽？灭菌完毕后，为什么待压力降低

到“0”时才能打开

兽医微生物学实验复习题

1、兽医微生物实验室注意事项是什么？

答：①防止病原微生物的散布；②防火；③节约；④标记；⑤记录；⑥安全；⑦清洁与秩序 2、观察细菌常用什么显微镜？它主要有哪几部分组成？

答：光学显微镜 光学部分:目镜、物镜、反光镜、聚光器；机械部分：镜座、镜臂、镜筒、粗调节器、细调节器。

3、油镜用毕后，为什么必须把油镜擦净？

答：油镜的原理是通过香柏油的光路折射能更加清晰的观察微生物，油具有粘附性，且不溶于水，所以，在观察完后，香柏油会粘附在镜头上，不擦去的话，风干后镜头就变得模糊不清，甚至报废了，又因为是油所以简单的用擦镜纸擦拭是擦不干净的，二甲苯属于有机溶剂， 4、用过多的二甲苯或酒精乙醚混合液擦拭镜油有什么危害？ 答：过多的二甲苯或酒精乙醚混合液容易脱胶，使油镜脱落。 5、使用油镜时用什么作为物镜与玻片间的介质，有几种？ 答：可用与玻璃的折光系数相近的油类，有7种，如柏木油。 6、观察细菌时显微镜的操作步骤是什么？主意事项是什么？

答：将显微镜物镜镜头转为油镜 对好光线（开高集光器，开大光圈，调好反光镜）使亮度最强 在载物台上放上载玻片，并在玻片上放一滴香柏油 将标本移至载物台正

微生物学实验指导

微生物学课程组 编

朝阳师专生化系 二00九年三月

编写说明

微生物学是现代生物学科的先头学科,是科学技术现代化和农业现代化的重要学科领域之一，就其学科性质而言它又是一门实践性很强的学科。

实验课的教学目的是训练学生掌握微生物学最基本的实验操作技能，了解微生物学的基本知识，加深理解课堂讲授的微生物学理论知识，同时，通过实验培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的能力；实事求是，严肃认真的科学态度；为以后课程的学习和将来的工作以及科学研究打下坚实的基础。

本实验指定是在参考有关院校的微生物学实验教材的基础上，结合我们的实验室条件以及仪器设备状况，经过多方取舍编写而成，可供生物技术及畜牧兽医等专业师生参考。

由于编者水平有限，加上时间仓促、经验不足，在许多方面肯定有不少缺点与错误，希望各位读者批评指正。

在编写过程中，生化系全体师生给予大力支持，在此表示感谢。

编者

2009.03

目 录

实验一 显微镜的使用 实验二 细菌的简单染色法 实验三 革兰氏染色法 实验四 细菌的芽孢染色法 实验五 放线菌的形态观察 实验六 霉菌