观察植物细胞实验报告

[实验四]观察植物细胞的质壁分离与复原

班级 姓名 成绩

一、实验目的

1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。 2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。 二、实验原理

当 小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过 进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的 。由于 比 的收缩性大，当细胞不断失水时， 就会与 逐渐分离开，也就是质壁分离；当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入 中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生 。 三、材料用具

紫色洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、吸水纸、清水、0.3g/ml蔗糖溶液 四、实验步骤

A、用刀片在

实验原理：

质体：一类与碳水化合物的合成与贮藏密切有关的细胞器，它是植物细胞特有的结构。根据色素的不同，可将质体分成三种类型：叶绿体、有色体（或称杂色体）和白色体。

有色体内含有叶黄素和胡萝卜素，呈红色或橙黄色。它存在于花瓣和果实中，在番茄和辣椒（红色）果肉细胞中可以看到。可以使植物的花和果实呈红色或橘黄色。有色体主要功能是积累淀粉和脂类。

细胞壁根据形成的时间和化学成分的不同分成三层：胞间层、初生壁和次生壁，胞间层存在于细胞壁的最外面。初生壁是在细胞停止生长前原生质体分泌形成的细胞壁层，存在于胞间层内侧。次生壁是细胞停止生长后，在初生壁内侧继续积累的细胞壁层。在光学显微镜下，厚的次生壁层可以显出折光不同的三层：外层、中层和内层。

在初生壁上具有一些明显的凹陷区域，称为初生纹孔场。在初生纹孔场上集中分布着许多小孔，细胞的原生质细丝通过这些小孔，与相邻细胞的原生质体相连。这种穿过细胞壁，沟通相邻细胞的原生质细丝称为胞间连丝。

初生壁完全不被次生壁覆盖的区域，称为纹孔。纹孔如在初生纹孔场上形成，一个初生纹孔场上可有几个纹孔。一个纹孔由纹孔腔和纹孔膜组成，纹孔腔是指次生壁围成的腔，它的开口（纹孔口）朝向细胞腔。腔底的初生壁和胞间层部分即称纹

实验原理：

质体：一类与碳水化合物的合成与贮藏密切有关的细胞器，它是植物细胞特有的结构。根据色素的不同，可将质体分成三种类型：叶绿体、有色体（或称杂色体）和白色体。

有色体内含有叶黄素和胡萝卜素，呈红色或橙黄色。它存在于花瓣和果实中，在番茄和辣椒（红色）果肉细胞中可以看到。可以使植物的花和果实呈红色或橘黄色。有色体主要功能是积累淀粉和脂类。

细胞壁根据形成的时间和化学成分的不同分成三层：胞间层、初生壁和次生壁，胞间层存在于细胞壁的最外面。初生壁是在细胞停止生长前原生质体分泌形成的细胞壁层，存在于胞间层内侧。次生壁是细胞停止生长后，在初生壁内侧继续积累的细胞壁层。在光学显微镜下，厚的次生壁层可以显出折光不同的三层：外层、中层和内层。

在初生壁上具有一些明显的凹陷区域，称为初生纹孔场。在初生纹孔场上集中分布着许多小孔，细胞的原生质细丝通过这些小孔，与相邻细胞的原生质体相连。这种穿过细胞壁，沟通相邻细胞的原生质细丝称为胞间连丝。

初生壁完全不被次生壁覆盖的区域，称为纹孔。纹孔如在初生纹孔场上形成，一个初生纹孔场上可有几个纹孔。一个纹孔由纹孔腔和纹孔膜组成，纹孔腔是指次生壁围成的腔，它的开口（纹孔口）朝向细胞腔。腔底的初生壁和胞间层部分即称纹

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

姓名：常天易 系年级：海洋生命学院2012级 专业：生物科学

科目：分子细胞生物学实验 学号：12050011006

植物细胞骨架的观察

一、实验目的：

1. 掌握植物细胞骨架处理及染色方法。 2. 对细胞骨架的形态和分布有一个初步认识。

二、实验原理：

真核细胞胞质中存在的纤维网状结构称为细胞骨架，包括：微管

（直径20-25nm）、微丝（直径6-7nm）、中间丝（直径10nm）、和粗丝等。考马斯亮蓝R250是一种普通的蛋白质染料，它可以使各种细胞骨架蛋白着色，显示微丝组成的张力纤维。张力纤维（直径40nm）在体外培养细胞中普遍存在，与细胞对基质的附着，维持细胞扁平铺展的性状有关。

三、实验材料

洋葱表皮细胞

试剂：

1、0.01mol/L的磷酸盐缓冲液 2、M-缓冲液

3、1%Triton X-100/M-缓冲液 4、30%戊二醛-PBS溶液

四、实验方法

撕取1平方厘米见方的洋葱表皮细胞，在培养皿中浸泡于PBS缓冲液中，使其沉底。 去PBS溶液，加入1% TritonX-100处理30min 去 TritonX-100，使用M-缓冲液洗三遍，每次5min 加入3%戊二醛溶液固定3

成 绩

植物细胞工程实验报告

组 员： 邓嘉祺（第一组） 系 别： 生物工程 班 级： 生物工程131班 指导教师： 高明波老师 设计日期： 2016. 5.26

预习报告与实验记录

【实验题目】：MS母液配制、培养基配制及灭菌

【实验原理】：

离体细胞的生长、分化和植株再生都在培养基中进行，选择和配制培养基是细胞培养的重要环节。培养基种类很多，但各种合成培养基都由含大量元素的无机盐、含微量元素的无机盐、碳源、维生素和氨基酸以及激素等五大类成分构成。 为避免每次配制培养基都称量各种化学药品，常把培养基中必需的化学药品，按原量的浓度增大10倍、100倍或1000倍后称量，配成一种浓缩液，即母液。

【实验步骤】：

1、配制培养基母液 2、配制愈伤组织诱导培养基

【实验记录】：

所配制培养基全部凝固。

实 验 报 告

时间： 2015.05.26 组员： 邓嘉祺（第一组） 指导教师： 高明波老

细胞培养实验报告

细胞培养主要包括细胞复苏、细胞传代和细胞冻存三个过程。

一、实验仪器及用品

（一）超净台：

1. 枪头：10 mL、5 mL、1 mL、200 μL、10 μL； 2. 移液枪：同上，及相应的支架；

3. 离心管：50 mL、15 mL、1.5 mL，及相应支架与盛皿； 4. 记号笔； 5. PBS缓冲液； 6. 酒精棉；

7. 废液杯×2：一个装枪头，一个装废液； 8. 封口膜； 9. 排枪卡槽； （二）细胞间：

1. 离心机：中型、小型；

2. 培养瓶：透气的用于培养，密封的用于运输，培养皿； 3. 灭菌离心管、枪头、冻存管等备用；

4. 毛巾、手套、口罩、酒精喷壶、灭菌超纯水、除菌滤膜； 5. 100 μL排枪； 6. 血球计数板、载玻片； 7. 水浴锅； （三）冰箱： 1. 双抗、环丙沙星；

2. 4℃：DMEM、1640、PBS、已配培养基； 3. -20℃：MTT、MTS、DMSO、血清、胰酶； （四）缓冲间： 1. CO2罐、液氮罐； （五）换衣间

1. 实验服、拖鞋、手套、口罩、酒精喷壶；

二、实验前准备

（一）实验前将需要带入的物品洗净、高温灭菌、喷酒精，放入传送窗，将传送窗与细胞间紫外开启杀菌半小时；

细 胞 生 物 学

实 验 论 文

年级：2012级师范2班 姓名：田金梅

学号：222012317011114 指

导

老

师

魏

玲

：

人体外周血淋巴细胞培养与染色体核型分析

（西南大学生命科学学院 重庆400715）

摘要：细胞培养是现代生物科学中发展十分迅速的一种实验技术，掌握细胞培养技术有利于我们掌握一种非常重要的实验技术方法。本次实验通过用人体外周血淋巴细胞为材料，进行PHA处理然后再37℃下培养72小时，并在离培养终止3~4小时添加秋水仙素处理，然后经过低渗离心固定的反复操作，将细胞收集以及处理成合适的装片，然后通过冰片滴片的方式，再由Gemesa染液染色，再镜检，找到含46条染色体合适的细胞，再用显微拍照技术拍照，得到的图片经过简单处理，剪切，并测量数据，最后得到核型分析图谱。 关键词：细胞培养；PHA；人体外周血淋巴细胞；染色体装片制备; 核型分析

综述：细胞培养是现代生物科学中发展十分迅速的一种实验技术，也是当前细

胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中最基本的实

学号： .

北京林业大学

植物生理学实验报告

学院名称： 生物科学与技术 年级班别： 硕-植物11班 姓 名： 张敏

2011年3月7号

植物生理学实验报告

实验一 红外线CO2气体分析仪测定光合速率

一、实验目的

1. 学习并掌握微量红外气体分析仪的工作原理和使用方法。 2. 使用微量红外气体分析仪测定植物光合速率。

二、实验原理

在密闭的系统中，由于同化室中的叶片进行光合后，系统中的CO2浓度不断下降，可用单位时间内同化室中CO2浓度的减少量或CO2浓度减少量所需的时间，根据叶片面积、同化室体积，计算光合速率。

许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处，其吸收峰分别在2.69μm、2.77μm、4.26μm和14.99μm处，其中只有4.26μm的吸收带不与H2O的吸收带重叠，红外仪内设置仅让4.26μm红外光通过的滤光片，当该波长的红外光经过含有CO2的气体时，能量就因CO2的吸收而降低，降低的多少与CO2的浓度有关，并符合朗伯—比尔定律（A=lg(1/T)

实验一、AP4气孔计测定植物蒸腾速率

一、实验原理

蒸腾速率与气孔导度、土壤含水量和叶片相对含水量关系密切。气孔导度可以用来评价城市大气污染状况，表征植物的生理状态，甚至可以用作抗旱植物、抗污染植物的筛选指标。AP4气孔计根据循环扩散的原理，由植物叶片表明湿度的变化进行测量计算，得到气孔导度、气孔阻力等数据，并计算出植物蒸腾速率。

二、植物材料与方法 1. 植物材料：白鹤芋

2. 使用仪器：AP4气孔计； 3. 实验步骤：

（1）将装满打开仪器，进入校准界面，对仪器进行开机校准。 首先进入校准菜单，将叶室夹张开，轻轻晃动，测定环境中湿度值，然后使用铺好潮湿滤纸的校准板，按照屏幕上的提示逐一校准6个点。仪器根据测定情况自动提示曲线的拟合状况，一般拟合标准在5%以内对测量影响不大，可以接受。若校准后，匹配率大于5%，需要重新校准。

（2）校准后进入测量菜单，开始正式测量。每测量一个值，需要待取值稳定两次再记录，而且叶室夹带黑色胶圈一侧为测量端，与待测叶表面接触。

（3）进入预览选项查看所需数据，用数据线将仪器和电脑相连，导出数据。

三、实验结果 见附表1

四、结果分析与体会

1、首先要保证仪器匹配的错误率在5%以内的数据才算是对研究分

观察植物细胞的有丝分裂(一)

【学习目标】

1．初步掌握制作根尖细胞有丝分裂装片的技术。 2．观察植物细胞有丝分裂的过程，识别分裂的不同时期。 3．初步掌握绘制生物图的方法。 【学习障碍】 1．理解障碍

(1)如何理解该实验的实验原理？

(2)如何理解实验中的步骤要求和注意事项？ 2．解题障碍

判断、识图等方面的问题。 【学习策略】 1．理解障碍的突破

(1)用“成因法”理解实验原理。

由理论知识的学习已知，细胞的有丝分裂是一个连续动态的变化过程，但可以通过它的形态变化，特别是细胞核中的染色体行为，人为地划分阶段，并进行比较研究。在自然状态下，一大群处于各个分裂期的细胞混杂在一起，必须仔细观察，寻找有丝分裂过程各时期典型形态特征的细胞，从而建立起细胞周期的概念。

植物的分生组织(如根尖分生区、茎尖生长点等)细胞，能够通过有丝分裂增加数目。依据植物细胞分裂周期中各个时期细胞中染色质(或染色体)的形态、数目、位置变化等确定该细胞所处的时期。为了看清染色体或染色质，要用碱性染料对其进行染色。 注意：酸性或碱性染料的定义，不是通常理解的酸和碱，而是指染料中着色基团是阳离子或阴离子来看，如果是阳离子则为碱性染料，为阴离子则为酸性染料。

(2)用“成