肝素纯化柱原理

镍柱亲和层析

亲和层析的原理：利用分子间存在特异性的相互作用，它们之间都能够进行专一而

又可逆的结合，这种结合力就称为亲和力。 常见具有专一性亲和力的生物分子对：

酶： 基质类似物，抑制剂，辅酶 抗体： 抗原，病毒，细胞

细胞： 细胞表面特异蛋白，外源凝集素 核酸： 互补碱基序列，组蛋白，核酸聚合酶 激素或药物： 受体，载体蛋白

外源凝集素： 多糖，糖蛋白，细胞表面受体，细胞

文献将被固定在色谱基质上的分子称为配体，配体和基质是共价结合的，构成亲和层析的固定相，称为亲和吸附剂。

配体以共价键结合到活化的基质上，构成固相载体。

一般载体采用琼脂糖凝胶、葡聚糖凝照、聚丙烯酰胺凝胶和纤维素等。

咪唑环：是1，3二氮杂戊环，英文名是Imidazole,如果在第一位或第三位上的氮原子上去掉那个氢原子所剩余的部份，就叫咪唑基。就是咪唑上去掉一个和氮原子直接相连的氢原子后剩下的部分

1

组氨酸的性质：具有弱疏水性、咪唑环为弱电性。

金属离子：Cu2+、Ni2+、Zn2+、Co2+等过渡金属离子可与N、S和O等供电原子产生配位键，因此可与蛋白质表面的组氨酸（

肝素的配制

肝素是一种强效凝血剂，近年来研究证明肝素钠还有降血脂作用。 肝素系天然酸性黏多糖，为线性阴离子聚电解质，是由结构不一，带有很强负电荷链所组成的一族化合物，具有延长血凝时间的作用。

肝素是一种水溶性物质，由多种不同分子量的肝素组成，其分子量约为3000-50000道尔顿。 肝素最早得自肝脏，但以肺脏含量最丰富。动物体内的肝素与蛋白结合成复合体形式存在，故不显抗凝血作用。 药用肝素系自猪或牛的肠黏膜中提取，故可能发生过过敏反应。2000年药典规定肝素钠每1mg的效价不得少于150单位。 肝素的生物学标准，以每毫克肝素制剂(60℃2mmHg柱真空干燥3小时)所相当的单位数来表示。1μ 为24h内在冷处阻止1ml猫血凝结所需的最低肝素量。

配制： 市售肝素冻干粉是140单位/mg，1克瓶装，每瓶140,000单位。称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml。取50~100μl湿润管壁，可抗凝人血3~5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50~100μl，可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理

磁珠法分离纯化DNA原理及其步骤

日期：2012-05-22 来源：互联网 标签： 核酸纯化 核酸分离 磁珠法 纯化DNA

摘要 : 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。

欢度大力神杯之夏，参与BRAND竞猜活动，获赠BRAND产品！

GeneCopoeia：qPCR mix免费试用体验活动开始！

磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。

磁珠法纯化DNA原理

磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料，来吸附核酸，其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE，COOH)等，从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就

《编译原理》课程标准

一、课程概述

“编译原理”主要是以中小型高级程序设计语言为研究对象，介绍从高级语言程序到低级目标程序的主要翻译过程、以及编译器的构造原理和实现方法。

程序设计语言编译器的构造原理和实现方法是软件的核心技术之一，“编译原理”属于计算机科学与应用专业本科教学重要专业课。其的前置课程包括“高级程序设计语言”、“数据结构”、“汇编语言”等。 这门课程重点是培养学生在掌握编译的基础知识和基本方法的基础上，同时具有分析和设计中小型编译器的能力，并提高对高级程序设计语言的理解能力和程序设计与应用能力；因此它对学生计算机业务的发展具有极其重要的意义。

二、课程目标

知道“编译原理”这门课程的性质、地位，知道这门课程的研究范围、分析框架、研究方法和应用领域。

理解这门课程的主要概念、基本原理和方法，尤其是分析、实现与代码生成。 学会运用一些具体的词法、语法的分析方法，如：自顶向下的递归下降法和LL分析法、自底向上优先分析法和LR分析法。

学会语义分析和运行时的存储环境的管理。

掌握中间代码生成、中间代码优化、目标代码生成。 培养分析和实现中小型编译程序的能力。

三、课程内容与教学要求

这门学科的知识与技能要求分为知道、理解、掌握、学会四个

血液透析纯化设备用水标准及工作原理

血液透析水处理设备 血液透析的血液在各种内源性和外源性毒 素发挥高和快速的血液净化方式。临床适 用于贵阳医院水处理各种原因的急性或慢 性肾功能衰竭，多余的水分(急性肺水肿 ，严重的肾病综合症等等),电解质紊乱 ，某些药物或有毒中毒。

医院血液透析纯水设备工作原理1、血液透析水处理设备采用反渗透技术，其依靠大于渗透压的压力作用，通过膜的毛细管作用完 成过滤过程的，采用国际上通用的反渗透工艺原理制成的，原水应为符合GB5745标准的生活饮用 水。 2、反渗透技术处理工艺包括前处理工艺，膜组件连接工艺和后处理工艺。 3、前处理工艺又称预处理工艺其目的是改善被处理水的水质、防止水中污染物对膜造成污染、延 长膜的使用寿命，降低设备运行成本。 4、膜组件连接方式常分为一级及二级连接，所谓一级是指进料经过一次加压进行膜分离，二级是 指进料须经二次加压进行膜分离。 5、后处理工艺是利用膜透过水又称淡水，即加压后透过反渗透膜的出水，由于膜不可能100%的 截流所有的无机物质，因此透过水必然还有一些离子和气体，如Na﹢、HCO3、CO2等，如用于 高纯水还应进一步采用离子交换、脱气塔、紫外线臭氧灭菌等工艺作为透过水的后处理。

医院

血液透析纯化设备用水标准及工作原理

血液透析水处理设备 血液透析的血液在各种内源性和外源性毒 素发挥高和快速的血液净化方式。临床适 用于贵阳医院水处理各种原因的急性或慢 性肾功能衰竭，多余的水分(急性肺水肿 ，严重的肾病综合症等等),电解质紊乱 ，某些药物或有毒中毒。

医院血液透析纯水设备工作原理1、血液透析水处理设备采用反渗透技术，其依靠大于渗透压的压力作用，通过膜的毛细管作用完 成过滤过程的，采用国际上通用的反渗透工艺原理制成的，原水应为符合GB5745标准的生活饮用 水。 2、反渗透技术处理工艺包括前处理工艺，膜组件连接工艺和后处理工艺。 3、前处理工艺又称预处理工艺其目的是改善被处理水的水质、防止水中污染物对膜造成污染、延 长膜的使用寿命，降低设备运行成本。 4、膜组件连接方式常分为一级及二级连接，所谓一级是指进料经过一次加压进行膜分离，二级是 指进料须经二次加压进行膜分离。 5、后处理工艺是利用膜透过水又称淡水，即加压后透过反渗透膜的出水，由于膜不可能100%的 截流所有的无机物质，因此透过水必然还有一些离子和气体，如Na﹢、HCO3、CO2等，如用于 高纯水还应进一步采用离子交换、脱气塔、紫外线臭氧灭菌等工艺作为透过水的后处理。

医院

纯化水系统验证报告

受控状态： 文件编号： 版 本 号：

编 制： 日期： 年 月 日 审 核： 日期： 年 月 日 批 准： 日期： 年 月 日

发布日期: 年 月 日

生效日期: 年 月 日

验证报告批准书

验证报告名称 验证报告编号 验证报告备考 2.本报告由纯化水再验证工作小组编写 同意本验证报告中的结论文件，验证结果合格。批准本批 报告自 年 月 日起正式生效。有效期至下次准 验证报告取代时自动终止。 意 见 批准人： 日 期： 年 月 日 纯化水系统验证报告 1.所附报告已通过会审，系最终定稿的正式报告

目录

1 验证小组 2 验证目的 3 工艺用水标准 4概述 5职责

5.1 验证小组的职责 5.2 设备科的职责 5.3

1.苯乙烯在做本体聚合时，怎么有效去除阻聚剂？

有几种方法可以选择.1.重蒸2.碱洗3.树脂活性炭等吸附4.反应时通氮气. 如果采用前三种方法,那可以放在冰箱里保存. 1.用碱性氧化铝过柱子（比较简单）

2.先用5%的NaOH水溶液反复洗涤，干燥剂干燥除水后减压蒸馏

保存的话放冰箱冷藏holysong(站内联系TA)我的方法先是碱洗，溶液变黄，再蒸馏。。。不过储存要避光储存，在常温光照下很容易聚合。gonemrc(站内联系TA)这个看你聚合的目的是什么？如果只是为了聚些PS，而且不是很在乎分子量什么的，那就随便处理下;如果是要研究聚合的一些因素的影响，那就老实地处理下吧。qinggua427(站内联系TA)谢谢各位的指教，我是来学的，哈哈，顶一个冷面猎手(站内联系TA)学习了，但是如果影响不大的情况下，不用处理吧

还有上面的一位仁兄提到的MQ是不是就是阻聚剂对苯二酚啊？笋尖(站内联系TA)就碱洗就好了吧，减压蒸馏有点麻烦啦，我们实验室的就是用碱洗的，然后用无水CaCl干燥就好了，在冰箱里低温保存的。kkcc(站内联系TA)可以先碱洗，然后分离苯乙烯单体，干燥蒸馏纯化。至于保存，肯定要放到阴暗处，低温。但由于苯乙烯可以热引发，因此，放置时间长了

同样采用Ni-NTA His结合树脂亲和纯化重组目的蛋白，

1、200mL菌液离心收集大量诱导的菌体，并用1×PBS缓冲液洗涤两次。

2、将保存的菌体沉淀用总体积为20mL的1×Bind Buffer (300mM NaCl，50Mm NaH2PO4; 10mM imidazote,pH8.0)重悬，在冰浴中超声波破菌至溶液呈白色澄清。

3、4℃ 12,000 rpm离心30分钟，然后用20mL的包涵体洗涤Buffer (50mmol/L Tris-HCl，100mmol/L NaCl，1mmol/L EDTA，0.5% Triton x-100，pH8.0)洗涤沉淀两次。

4、加20mL的包涵体溶解Buffer（50mmol/L Tris-HCl，100mmol/L NaCl，8mol/L Urea，pH8.0）充分溶解，（旋涡溶解，最好溶解时间长一点，1h左右，也可以用冰盒装放摇床上1h ），4℃10,000 r/min离心30min，收集上清。 2.2.2 亲和层析纯化表达的蛋白

pQE40和pET-32a(+)载体表达的蛋白C﹑N端均融合了6个组氨酸的tag，可用金属螯和层析纯化，也可用抗6个组氨酸的单克隆抗体检测表达蛋白的正确性。

酶的分离纯化

摘要：本文概述了在实验中由于酶浓度、饱和度等不同条件下对酶进行分离纯化的适用方法。酶的分离纯化有很多种方法，在纯化的工艺上有很大的不同，不同来源的酶在分离纯化中表现出不同的洗脱特性。现有酶的分离纯化方法都是依据酶和杂蛋白在性质上的差异而建立的。

关键词：酶；分离；纯化；方法

前言：酶的分离纯化工作，是酶学研究的基础。酶的纯化过程在目前来说仍是一门实验科学。一个特定酶的提纯往往需要经过多个实验的探索才能总结出一般经验规律。酶的分离纯化又与其他蛋白质的纯化过程存在很大的差异，酶的分离纯化有其自己独有的特点：一是特定酶在细胞中的含量少，二是酶通过测定活力的方法可以加以跟踪，前者给实验带来困难，后者为实验提供了捷径。 正文：

1. 酶的分离与纯化的概念[1]

酶的分离与纯化是指将酶从细胞或其他含酶材料中提取出来，再与杂质分开，从而获得符合使用目的、有一定纯度和浓度的酶制剂的过程。

酶分离纯化的一般原则： ①防止酶变性失活

1．）酶纯化一般在低温条件下进行（0~4℃）

2.）各种溶液应该用缓冲液，PH应调到使酶最稳定的PH 3.）各种溶液中还可以加入酶保护剂

②建立一个可靠和快速的测活方法 方法专一、灵敏、精确、简便、经