常用试剂配制与标定

安徽科威金属材料股份有限公司 质保部 化验室溶液配制规程 操作规程 编号 ZB-03-311 版本: 1.0 生效日期: 05-01-01 页码 Page: 1/7 常用案头试剂

1、 二甲酚橙指示剂（0.1％水溶液）：称取0.1g二甲酚橙于200mL烧杯中，加100mL水溶

解完全，移入棕色滴瓶中。 2、 乙酸－乙酸钠缓冲溶液（PH＝5.5）：将500g结晶乙酸钠CH3COONa-3H2O溶于适量水

中，加入50mL冰乙酸，溶解后，加水稀释至2500mL，混匀。

3、 甲基红－次甲基蓝指示剂：称取0.12g甲基红和0.1g次甲基蓝，溶于100mL无水乙醇

中。

4、 钙黄绿素指示剂：称取1g钙黄绿素、50g 硫酸钾和50g活性碳，于碾钵中碾磨均匀。 5、 氨水－氯化铵缓冲溶液（PH＝10）：称取168g氯化铵，溶于1430mL氨水中，用水稀至

2500mL，摇匀。 6、 K－B混合指示剂：称取0.1g酸性铬兰K与0.2g萘酚绿B及2g干燥的硫酸钾，研细，

混匀，保存在磨口瓶中，防止吸水。 7、 硫氰酸钾溶液（40％）：称取80g硫氰酸钾溶于150mL水中，加入3g碘化钾，1mL淀

粉溶液（0.5%），滴加碘液使溶液变蓝色，再用硫代硫

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g DEPC水 1000ml 分别稀释至2XSSC和0

常用试剂的配制

一、 目的

为保证检测的准确性，制定本规范。

二、 适用范围

本方法适用于化验室检测用常规试剂的配制。 名称 化学式 相对分子质量 盐酸 HCL 36.463 硝酸 HNO3 63.016 硫酸 H2SO4 98.08 沸点℃ 密度 g/ml ％ g/100 浓度 c mol/l 12 110 1.18-1.19 36-38 122 1.39-1.4 68 15 338 1.83-1.84 95-98 18 磷酸 H3PO4 98.00 氢氧化钠 NaOH 40.01 氨水 NH3。HO2 35.048 213 1.69 85 15 1.53 50.5 商品溶液 25-28 NH3 19.3 0.91-0.90 15

三、A.指试剂及其配制规范

A.1 酚酞 PH变色域8.0无色-10.0红色 所需药品：酚酞，分析纯

用途：酸碱指示剂

配制方法：称取1g酚酞，用100mL60%的乙醇溶解

A.2 0.5g/l甲基橙

所需药品：甲基橙PH变色域3.0无色-4.4黄色 用途：配制甲基橙指示剂

配制方法：称取0.5g甲基橙，溶于1000mL水中 A.3 0.1%溴甲酚绿 PH变色域3.8黄绿色-5.4蓝色

所需

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g DEPC水 1000ml 分别稀释至2XSSC和0

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。

2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水

用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris

20ml 甘油

980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g

（ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g

DEPC水 1000ml

分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用

5 HEPES 溶液 HEPES 23.8g

(ph6.8-8.0) DEPC H2O 100ml

6 50X Denhaldt′s 液

聚蔗糖（Ficoll 400）

1 DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC

根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。

2 0.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris

1000ml DEPC水

用HCL调ph至7.5，高压备用。

3 4%PFA的配制(ph 7.0) 40g PFA

1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)

将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。

3 0.2% 甘油/0.1M tris

20ml 甘油

980ml 0.1Mtris

4 20XSSC Nacl 175.3g

（ph 7.0） 柠檬酸钠 88.2g

DEPC水 1000ml

分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用

5 HEPES 溶液 HEPES 23.8g

(ph6.8-8.0) DEPC H2O 100ml

6 50X Denhaldt′s 液

聚蔗糖（Ficoll 400）

一，蛋白质电泳相关试剂及缓冲液

（一）30％（W/V）丙烯酰胺溶液

﹡组分浓度 30％（W/V） Acrylamide ﹡配制量 100ml ﹡配制方法

1．称取下列试剂，置于250ml烧杯中。 Acrylamide 29g BIS 1g

2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。

（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

（二）40％（W/V）丙烯酰胺溶液

﹡组分浓度 40％（W/V） Acrylamide ﹡配制量 100ml ﹡配制方法

1．称取下列试剂，置于200ml烧杯中 Acrylamide 38g BIS 2g

2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。

（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

（三）10％（W/V）过硫酸铵

﹡组

一，蛋白质电泳相关试剂及缓冲液

（一）30％（W/V）丙烯酰胺溶液

﹡组分浓度 30％（W/V） Acrylamide ﹡配制量 100ml ﹡配制方法

1．称取下列试剂，置于250ml烧杯中。 Acrylamide 29g BIS 1g

2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。

（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

（二）40％（W/V）丙烯酰胺溶液

﹡组分浓度 40％（W/V） Acrylamide ﹡配制量 100ml ﹡配制方法

1．称取下列试剂，置于200ml烧杯中 Acrylamide 38g BIS 2g

2．向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45μm滤膜过滤除杂。 3．置于棕色瓶中4℃保存。

（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性。配制时应戴手套操作）

（三）10％（W/V）过硫酸铵

﹡组

生物学常用试剂配制 Document number【980KGB-6898YT-769T8CB-246UT-18GG08】

常用试剂

储存注意事项：储存于阴凉、通风的地方；远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃，相对湿度不超过80％。包装必须密封，切勿受潮。应与易（可）燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放，切忌混储，储区应备有合适的材料收容泄漏物。

操作注意事项：尽量在通风橱操作，加强通风，避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物，避免与还原剂、碱类、醇类接触，防止包装及容器损坏。

EDTA（PH ）

组分浓度: mol/L EDTA（MW：）

配制量: 500ml

配制方法:

1．称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。

2．加入400ml的去离子水，置于磁力搅拌器上充分搅拌。

3．用NaOH调节调节pH值至（约需加入20g固体NaOH），当pH 接近时，EDTA方可完全溶解，加入去离子水定容至1L。

4．高温高压灭菌后，室温保存半年。

5M NaCl

组份浓度： 5mol/L NaCl (MW：

配制量： 1L

配制方法：

1.准确称取氯化钠，置于1L的蓝盖瓶中。

2.用去离子水溶解并稀释

常用鉴定试剂的配制和应用 一、通用试剂 1、碘试剂

检查一般有机化合物。

（1）碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度。

（2）0.5％碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色。

2、硫酸试剂

检查一般有机化合物。

5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。喷洒后，置空气中干燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色）。

3、重铬酸钾—硫酸试剂 检查一般有机化合物。

5g重铬酸钾溶于l00ml40％硫酸中。喷该试剂后，150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。

4、磷钼酸试剂 检查还原性成分。

5％磷钼酸乙醇溶液。喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点。 5、磷钨酸试剂 检查还原性成分

20％磷钨酸乙醇溶液。喷洒后，120℃烘烤，还原性物质呈蓝色斑点。 6、硝酸银—氢氧化铵试剂 检查还原性成分。

溶液i：0.1mol／l硝酸银溶液。溶液ⅱ：10％氢氧化铵溶液。临用前溶液i和ⅱ以

1︰5混合。喷洒后105℃加热5~l0min，至深黑色斑点出现。 7、中性高锰酸