环境微生物学实验报告

微生物学实验报告

实验一 普通光学显微镜的使用及细菌染色与形态观察

第一部分：显微镜的使用

一、目的要求

1．熟悉普通光学显微镜的构造、油镜的使用原理和显微镜的维护方法。 2．学会正确使用油镜观察细菌的基本形态和特殊构造。 3．了解各种显微镜的主要特征。

二、实验原理

（一）光学显微镜的构造

微生物实验室中最常用的是普通光学显微镜，它的构造可分为机械部分和光学部分。 1、机械部分

普通复式光学显微镜的机械部分通常包括以下几个部分：目镜、镜筒、基座回转器、物镜、载物台、光圈、聚光器、光源、镜臂、细调节器、粗调节器等。 2、光学部分：目镜、物镜、聚光器、光圈、光源。 （二）放大倍数

标本首先经物镜放大，在目镜的焦距平面上形成一个实像，再经过目镜放大成最终的虚像。总的放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。

物镜的放大倍数愈大，其工作距离（物镜镜头到标本片之间的距离）愈短，这时光圈就要打开得愈大。

显微镜的放大倍数 低倍镜 高倍镜 油镜 放大倍数 物镜 10× 45× 100× 目镜 10× 10× 10× 总的放大倍数 100× 450× 1000× （三）分辨距离与分辨力 显微镜的性能受物镜的分辨距离或分辨力所限制。分辨距离即透镜所

微 生 物 学 实 验 报 告

目录索引

1

实验一 油镜的使用和细菌的简单染色法 ................................................. 2 实验二 细菌的革氏染色与芽孢染色 ..................................................... 4 实验三 常用培养基的配制 ............................................................. 6 实验四 酵母菌霉菌的形态结构观察及酵母死活细胞的鉴别 ................................. 7 实验五、微生物大小的测定与显微计数 ................................................... 9 实验六 环境中微生物的检测和分离纯化 ................................................ 10 实验七 细菌鉴定中常用的生理生化反应 ................................................ 11 实验八 （综合实

实验一 实验室和人体表面微生物的检查

一 实验目的

1 证明实验室环境与体表存在微生物

2 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型 3 体会无菌操作的重要性 二 实验原理

平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，1-2d内每一菌体能通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。每一种细菌所形成的菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小、表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑等。因此可通过平板培养基来检查环境中微生物的数量和类型。 三、器材

1、培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂平板

2、仪器或其他用具 无菌水、灭菌棉签（装在试管内），接种环，试管架，酒精灯，记号笔，废物缸。 四、操作步骤 1、写标签

任何一个实验，在动手操作前均需首先将器皿用记号笔做上记号（包括班级、姓名、日期、样品来源等），字尽量小些，写在皿底的一边，不要写在当中，以免影响观察结果。

注：培养皿的记号一般写在皿底上，如果写在皿盖上，同时观察两个以上培养皿的结果，打开皿盖时容易混淆。 2、实验室细菌检查 （1）空气

将一个肉膏蛋白胨琼脂平板放在实验台上，移去皿盖，使琼脂培养基表面暴露在空气中，将另一块肉

微生物学实验

实验一 实验室环境和人体表面微生物的检查 实验二 油镜的使用和细菌的简单染色 实验三 细菌的革兰氏染色和芽孢染色

实验四 微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定 实验五 培养基的配制与消毒灭菌 实验六 土壤微生物的分离纯化与鉴定 实验七 食品微生物检验 (一)细菌总数测定 实验八 食品微生物检验 （二）大肠菌群数测定 实验九 大肠杆菌生长曲线的测定 实验十 IMViC与硫化氢试验

实验一、实验室环境和人体表微生物的检查

1. 一、目的：

1. 比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型； 2. 观察不同类型微生物的菌落形态特征； 3. 体会无菌操作的重要性。

2. 二、原理：

1. 微生物无孔不入，无处不在。

2. 微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。（37 ℃倒置培养24 h） 3. 描述：菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、

边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等，以便检查环境中细菌的类?秃褪俊?

4. 细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在，本实验重点观

察细菌。

3. 三、器材：

1. 培养基：营养琼脂平板（牛肉膏蛋白胨培养基）

2. 器具

培养基的配制和灭菌 细菌的纯种分离、培养 接种技术及菌落形态的观察

姓名：张世凡 学号：201330480123 课程名称：环境工程微生物实验

一、实验目的

1、熟悉玻璃器皿的洗涤与灭菌前的准备工作。

2、了解微生物培养基的基本原理，掌握配制、分装培养基的方法。 3、学习各类物品的包装、配制、灭菌技术。

4、从环境中分离、培养微生物，掌握一些常用微生物和纯化微生物的方法。 5、学会几种接种技术。 6、平板菌落计数。 7、抗Cu菌的筛选。

8、观察实验分离出来的几种细菌的个体形态及与其相应的菌落的形态特征。 9、通过观察和比较细菌，放线菌，酵母菌及霉菌的菌落形态，达到初步鉴别微生物的能力。

二、实验原理

1、培养基原理：培养基是微生物生长的基质，是按照微生物营养、生长繁殖的需要，有碳、氢‘氧、氮、磷、硫、钾、钙、钠、镁、铁、等微量元素和水，按一定的体积分数配制而成。调整适合的pH，经高温灭菌后以备培养微生物之用。 由于微生物的种类及代谢类型的多样性，因而培养基放入种类也多，他们的配方及配制法也有所差异，但一般的配置过程大致相同。

本实验采用肉汤蛋白胨培养基、查氏培养基（筛选霉菌）、高氏1号淀粉琼脂培养基（筛选放线菌）。

2、灭菌原理:本

微生物学试题十二套

微生物学试题（一）

一、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3 ,colony 4, life cycle 5,capsule 6,endospore 二、简答题

1，试述微生物与当代人类实践的重要关系？ 2，简述革兰氏染色的机制？

3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 三、填空(每空1分,共15分)

1.真核微生物核糖体类型为 _______ 。

2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为_____ 。

3.研究细菌遗传、代谢性能常采用 _____ 时期的细胞。4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______。

5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 ________ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是______，_____，_______和_______。 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成。

8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 ______ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为______。 10.根瘤菌可与 _________共

微生物学实验

实验室须知

1. 应保持实验室安静，切勿高声喧哗和随意走动。 2. 实验室内禁止饮食、吸烟、及用嘴湿润铅笔和标签等 物。 3. 使用显微镜和其它贵重仪器时，应在教师同意后方可 使用，切勿擅自拆卸，否则因此而损坏仪器，应予以 赔偿。 4. 遇意外发生，应立即报告教师，不可自己随意处理。

实验室注意事项：1. 每次实验前必须认真预习，课堂上注意聆听教师对实验内容 的讲解，注意观察教师的示范操作。 2. 实验时应仔细认真，严格按操作规程进行，注意改变生活中 的习惯动作，以掌握微生物学实验的科学操作方法。 3. 使用贵重仪器应先事先熟知操作规程，遇仪器故障时请教师 帮助解决。 4. 实验中如遇菌液外溢、皮肤划伤或菌液吸入等意外，应立即 报告老师及时进行处理，不得隐瞒，以免酿成后患。 5. 注意安全，易燃物品如二甲苯、吸水纸等应远离火源。打火 机只能用于点燃酒精灯，酒精灯用完应及时盖上灯帽。 6. 实验完毕，必须将仪器放到指定地点，带菌工具应先进行消 毒。

实验室注意事项：7. 实验需进行培养的材料，要标明姓名、组别、日期后，放于 教师指定的培养箱中进行培养。 8. 未经教师同意，实验室中的任何菌种和物品不得携带出室外。 9. 实验时应认真进行观

《微生物学及实验》实验指导书

杨翔华 主编

辽宁石油化工大学环境与生物工程学院

第一部分 实验目的

《微生物学及实验》实验课是我院环境科学专业学生必修的一门重要的基础实验课，是学生进入我院实验室的第一门实验课。

《微生物学及实验》实验的目的是使学生掌握微生物学的基本实验方法和技术，正确的使用实验的仪器设备，在学生头脑中建立无菌概念和掌握无菌操作技能是最重要的内容，是学生进行后续课实验和研究的基础。在目前的实验室条件和有限学时的情况下，得到微生物实验技术的基本操作和技能训练，培养学生动手操作能力和创新能力。通过微生物学实验课教学，加深理解和巩固课堂所学的知识，熟悉微生物学实验的基本操作技术，了解微生物实验的基础知识。通过微生物学实验培养学生观察、思考、分析问题、解决问题的能力，养成实事求是、严肃认真的科学态度、创新精神、创新思维和创新能力。

本实验指导书主要内容包括：微生物个体和菌落形态观察、染色方法、培养基制备和灭菌、无菌操作、微生物检测和分离、生理生化反应、影响微生物生长的因素和污染物微生物降解实验，水中微生物分布调查等内容。同时也注意和环境微生物学的联系与区别。

整个实验课中贯穿了显微镜使用—灭菌方法—无菌操作—微生物菌种分离筛选鉴定

目 录

实验一 微生物制片及形态观察 ...............................................................................1

一、显微镜油镜的使用 ........................................................................................ 1 二、细菌简单染色法及形态观察 ........................................................................ 3 三、革兰氏染色法 ................................................................................................ 6 四、细菌的芽孢染色 ............................................................................................ 8 五、放线菌的形态结构观察 ...

环境工程微生物学实验讲义

实验一 光学显微镜的使用

一、 目的要求

1、 熟悉普通光学显微镜的构造及其使用方法。 2、 了解油镜的原理，并掌握其使用方法。 3、学习生物图的绘制方法

二、 实验内容

学习普通光学显微镜的使用方法，学会判断是否需要使用油镜，学习理解，学习怎样使用和利用光圈，反光镜，调整反差，使视野达到最好的观察效果。学习使用油镜观察微生物标本示范片。

观察的示范片有，细菌三型涂片、葡萄球菌涂片、枯草芽孢杆菌涂片、褐球固氮菌涂片、八叠球菌涂片、猪链球菌涂片，青霉、曲霉示范片等。

三、 实验器材

显微镜、各种示范片、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。

四、 方法步骤

1 用低倍镜对（调）光，使视野明亮。

2 选择要观察的标本片，首先在低倍镜观察（寻找观察目标）。 3 高倍镜观察（选取理想的观察目标）。

4 油镜观察：高倍镜观察后――上升镜筒（或者是下调载物台）――油镜转至正下方，在载玻片上加一小滴香柏油――小心地下降镜筒使镜头浸在油里――用粗螺旋将镜筒（载物台）缓慢上升，寻找目标（物象）――用细螺旋调节，使物象清晰――观察记录。

5 观察完毕。上升镜筒（或者是下调载物台），转动物镜转换器，使油镜物镜偏位。用干净擦镜纸擦去镜头上的油迹，再取一