引物二聚体的形成原因

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引物二聚体的形成

标签:文库时间:2025-01-28
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什么是引物二聚体?怎样消除引物二聚体?

是引物的3'端间相互错配扩增形成的。引物二聚体的出现是必然的,只是或多或少的问题,电泳时看不到引物二聚体带也不代表没有二聚体出现,只是含量低我们 的肉眼看不到而已。提高PCR严谨性(包括提高退火温度,降低引物浓度等)可大大降低二聚体的浓度。

减少PCR产物中引物二聚体的方法:

1从引物自身 着手,重新设计引物,这是最根本解决这一问题的办法; 2.可能模板有问题;模板浓度过小,适当加大模板量;

3.Taq酶,引物,Mg2+浓度可能过高,可 降低它们的浓度; 4.取你所要加的上下游引物混合后,在100摄氏度下的沸水中煮5分钟,然后迅速拿出至于冰块之上瞬时冷却,这时再加入反应体系当中,引 物二聚体就会消失的;理由:引物可能会发生发夹结构,自身环化等结构,在100摄氏度下的沸水中煮5分钟可使引物变为单链,以减少二聚体。不过有人认为在 PCR仪上95度变性5min也同样达到目的,而且成功试过通过延长退火时间也可以消除引物二聚体。

5.所配MIX中加5%的甘油或者5%的DMSO,可 以增强特异性;

6.PCR反应体系的配制在冰上进行,最后加TAq酶,PCR结束后,产物勿放置在室温下过长时间,有人认为室温下有些TAQ

两种定量检测D-二聚体方法的探讨

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两种定量检测D-二聚体方法的探讨

摘要】目的探讨两种定量方法检测同一标本D-聚体之间的结果比较。方法分别用胶体金免疫渗透法和全自动血凝仪上使用的免疫比浊法检测180例门诊及住院病人标本。结果免疫比浊法测定结果阳性率高于胶体金免疫渗透法。结论 D-二聚体的多种检测方法中,胶体金免疫渗透试验和全自动血凝仪上使用的免疫比浊法都拥有能定量检测、快速、简单、敏感性高等优点,但全自动血凝仪上使用的免疫比浊法相对于胶体金免疫渗透法,易在大多数医院推广使用,有很好的应用前景。

【关键词】 D-二聚体定量检测胶体金免疫渗透法免疫比浊法

【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2013)31-0138-02

随着心脑血管及其他器官血栓性疾病对人们生命威胁的日益加重,医学界对血栓性疾病的研究越来越深入。D-二聚体是交联的纤维蛋白的降解产物,血浆内D-二聚体浓度能够反映体内继发纤溶水平。当体内发生血栓,如深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)和弥散性血管内凝血(DIC)时,纤溶酶被激活,大量交联的纤维蛋白在纤溶酶的作用下分解并释放

D-二聚体(D-Dimer)测定作业指导书

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D-二聚体(D-Dimer)测定

1 测定方法

颗粒增强的免疫比浊法。 2 测定原理

标本中的D-二聚体(D-Dimer)与试剂中包被有抗D-二聚体抗体的胶乳颗粒相遇,发生特异性的抗原-抗体反应,形成抗原-抗体复合物,使溶液的浊度发生改变。该浊度的高低在一定抗体存在时与抗原的含量成正比,待反应完成后测定其浊度,从而使D-二聚体得以测定。 3 标本

枸橼酸盐抗凝血浆, 处理方法见标本处理程序。

稳定性:20 - 25℃ 8小时 4 - 8℃ 4天

-20℃ 6个月

其他:冰冻标本要在37℃温箱中完全溶解,再在室温重稳定15分钟后才能使用。

标本不需要稀释。

混匀标本要避免形成泡沫,标本要在2500g至少离心15分钟。

4 试剂 4.1 试剂

来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。

贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末

R1:打开后机上稳定28天 R2:打开后机上稳定28天

准备:R1:直接使用。

R2直接使用,但是第一次使用和上机后每周要混匀一次。

其他:将R1和R2试剂放入37℃温箱中温育,并且在室温重稳定30分钟,然后

急性脑梗死患者同型半胱氨酸、C反应蛋白及D二聚体的变化研究

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目的探讨分析急性脑梗死患者血清中同型半胱氨酸、C反应蛋白及D二聚体与急性脑梗死发生的关系。方法对本院2010~2011年收治的60例急性脑梗死患者(观察组)和60例健康志愿者(对照组)的血清中同型半胱氨酸、C反应蛋白及D二聚体的含量进行分析比较,并对患者美国卫生研究院卒中量表评分进行分析。结果观察组患者血清中同型半胱氨酸、C反应蛋白及D二聚体的含量显著高于对照组,两

22 3第9第期 0年月 1 7 1卷

临床研究

急性脑梗死患者同型半胱氨酸、 c反应蛋白及 D二聚体的变化研究丁彦博

河南省南阳市中心医院神经内科,河南南阳

4 30 70 0

【要】摘目的探讨分析急性脑梗死患者血清中同型半胱氨酸、应蛋白及 D二聚体与急性脑梗死发生的关系。方 C反法对本院 2 1~ 0 1年收治的 6 0021 0例急性脑梗死患者 (察组 ) 6观和 0例健康志愿者 (照组 )对的血清中同型半胱氨酸、 C反应蛋白及 D二聚体的含量进行分析比较,并对患者美国卫生研究院卒中量表评分进行分析。结果观察组患

者血清中同型半胱氨酸、 C反应蛋白及 D二聚体的含量显著高于对照组,组比较差异具有统计学意义 (两 P<00 ) .5: 其中观察组患者中大面积脑梗死组 ( B组 )者血

慢性肝病患者血浆纤维蛋白产物、抗凝血酶III及D―二聚体的临床研

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慢性肝病患者血浆纤维蛋白产物、抗凝血酶III及D―二聚体

的临床研究

摘要:目的 检测慢性肝病患者的血浆纤维蛋白降解产物(FDP)、抗凝血酶-III(AT-III)以及D-二聚体(D-D)的水平,探讨其变化的临床意义。方法 随机选取我院近年来收治入院的30例慢性肝炎、30例肝硬化以及30例正常体检人员作为研究对象,分别检测其血浆纤维蛋白降解产物、抗凝血酶-III以及D-二聚体水平加以对比分析。结果 三组患者在各项相关指标上均存在显著的差异,P<0.05,有统计学意义。结论 通过对血浆纤维蛋白降解产物、抗凝血酶-III以及D-二聚体水平的检测,可有效判断慢性肝病患者疾病的严重程度,为疾病的诊断以及治疗提供可靠的依据。

关键词:慢性肝炎;肝硬化;血浆纤维蛋白降解产物;抗凝血酶-III;D-二聚体

机体的正常代谢主要依靠肝脏完成,人体内多数的纤溶和抗纤溶因子以及凝血和抗凝血因子均由肝脏产生。慢性肝病发生时,肝脏的代谢功能紊乱,呈现出不同程度的纤溶系统以及凝血系统障碍[1]。本文为了探讨慢性肝病患者纤维蛋白降解产物、抗凝血酶-III以及D-二聚体变化的临床意义,现从我院随机选取慢性肝炎、肝硬化以及正常体检人员各30

例作为研究对象,分别对其进行检测加以对比分析。具体结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本次研究所选研究对象为我院近年来收治入院的30例慢性肝炎患者、30例肝硬化患者以及30例在

疾病真正形成的原因

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疾病真正形成的原因

只有两种真正的疾病——能量的积累和消耗(虚或者实) 我们身体内部的能量积累过多,会引发疾病 我们身体内部的能量消耗过多,同样会引发疾病

能量过多或者过少都会引发疾病,我们需要的是均衡的能量,我们需要学会如何消耗多余的能量(适量运动),需要学会如何补充消耗的能量(摄取营养),我们可以用“人体的生化平衡”来进行理论归纳人体的生化平衡.

经过十几亿年的进化,我们人体已经形成了一套非常复杂精密的系统,健康人体的体液应呈微碱性(ph值为7.35~7.45)。这样有利于机体对蛋白质等营养物质的吸收和利用,并使体内的血液循环和免疫系统保持良好状态,人的精力充沛。正常情况下人的体液:包括血液、细胞内、外液等都是弱碱性,血液的PH值为7.35~7.45,当PH值下降到7.30以下时就会使人体呈现“酸性体质”。健康人的机体都能自身调节PH值,因为人体内有一套完整的酸碱调节系统,体内PH值与我们进食的食物有密切的关系,如果摄入酸性食物过多,大大超过体内调整PH系统的限度,那就会使体内PH位失衡,进而引起酸碱平衡破坏。所以食物的酸性、碱性搭配对人体健康十分重要。经常过食酸性食物,会使人体由于消化器官的兴奋而使乳酸增高,还会增加体内钙、镁等矿物

单边账形成的原因

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单边账形成的原因

  银行卡交易为四方交易,即:持卡人,商户,银联,银行。持卡人在pos端刷卡后,pos机会把收到的交易信号发送至银联转接中心,银联转接中心收到交易请求后、会判别所受理银行卡的发卡银行并把交易信息发送至相应的发卡银行,发卡银行收到请款请求时会验证交易信息(密码,余额等)如核实无异常,发卡行会把扣款通知反馈至银联转接中心在发送银联转接中心的同时扣款通知的短信一并下发至持卡人预留手机,银联转接中心收到发卡行的扣款信号时会给pos一个反馈信号,此时pos打单或是给出相应的返代码,因为银行卡交易信息所经过的信息节点较多,这个传送的过程可能成功可能失败,但钱总是被扣的,所以不要以为扣钱了就一定成功交易了如发卡行反馈至银联时或由银联反馈pos时发生信号终断,那么pos就无法收到反馈信号,但此时扣款短信已经下发,也就造成了持卡人收到短信但是pos没有打出签购单,(银联每晚固定在11点到12点之间清算,如POS未收到反馈信号,系统将会默认此交易不成立,将会把款项退回发卡行)

  单边帐的解决办法:

  如果各位在收银过程中碰到单边帐的时候,首先不要着急,尝试以下操作:

  一、用pos操作“重打印”功能目的:检查签购单打印机是

疾病真正形成的原因

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疾病真正形成的原因

只有两种真正的疾病——能量的积累和消耗(虚或者实) 我们身体内部的能量积累过多,会引发疾病 我们身体内部的能量消耗过多,同样会引发疾病

能量过多或者过少都会引发疾病,我们需要的是均衡的能量,我们需要学会如何消耗多余的能量(适量运动),需要学会如何补充消耗的能量(摄取营养),我们可以用“人体的生化平衡”来进行理论归纳人体的生化平衡.

经过十几亿年的进化,我们人体已经形成了一套非常复杂精密的系统,健康人体的体液应呈微碱性(ph值为7.35~7.45)。这样有利于机体对蛋白质等营养物质的吸收和利用,并使体内的血液循环和免疫系统保持良好状态,人的精力充沛。正常情况下人的体液:包括血液、细胞内、外液等都是弱碱性,血液的PH值为7.35~7.45,当PH值下降到7.30以下时就会使人体呈现“酸性体质”。健康人的机体都能自身调节PH值,因为人体内有一套完整的酸碱调节系统,体内PH值与我们进食的食物有密切的关系,如果摄入酸性食物过多,大大超过体内调整PH系统的限度,那就会使体内PH位失衡,进而引起酸碱平衡破坏。所以食物的酸性、碱性搭配对人体健康十分重要。经常过食酸性食物,会使人体由于消化器官的兴奋而使乳酸增高,还会增加体内钙、镁等矿物

会计舞弊的形成原因及治理

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高等教育自学考试

毕业设计(论文)

题目:会计舞弊的形成及治理

专业班级:企业财务管理12级

姓名:任文启

指导教师姓名: 肖全芳

所属助学单位:武汉理工大学职业技术学院 2015年

目 录

摘要 ..................................................................................................... I 前 言 .............................................................................................. III 1 会计舞弊概述................................................................................. 1

1.1 会计舞弊概念 ............................

慢速喷涂聚脲弹性体的研究

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维普资讯

20 0 8年第 2 3卷第 3期2 008 V0 . 3 . 1 2 No. 3

1 4

P0LYURETHANE NDUS l TRY

慢速喷涂聚脲弹性体的研究进展刘培礼胡松霞王宝柱崔洪犁

(岛佳联化工新材料有限公司 267 )青 60 1摘要:综述了国内外降低聚脲反应速度的方法、点及其性能。通过各种原材料的选择,特喷涂聚

脲弹性体的凝胶时间可以延长几倍甚至几十倍,附着力、在涂层表观状态、施工容忍度等方面较常规聚脲有明显的提高。关键词:慢速;涂;喷聚脲;弹性体中图分类号:Q3 38 T 2 .文献标识码: A文章编号:05—10 (08 0 0 1 0 10 9 2 20 )3— 04— 4

聚脲弹性体技术是聚氨酯 ( U) P技术领域的最新发展。它的两个主要应用领域是反应注射成型

( I和喷涂聚脲弹性体。喷涂聚脲弹性体综合了 RM)优良施工性能,固化速度快和对温度、如湿度的不敏感性,同时具有优异的物理性能如拉伸强度、裂强撕度、断裂伸长率、耐磨性以及耐化学性、耐水性等。

的44- D半预聚体凝胶时间最大可延长 1,,' I M倍拉伸强度增加 2%,长率增加 2%,裂强度增加 0伸 5撕 5,%硬度基本保持不变。2加入仲胺类扩链剂