微生物采样方案的制定依据

微生物限量采样方案

采样方案分为二级和三级方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、c、m和M值。

n：同一批次产品应采集的样品件数 c：最大可允许超出m值的样品数 m：微生物指标可接受水平的限量值 M：微生物指标的最高安全限量值

例：n=5,c=2,m=100cfu/g,M=1000cfu/g,即从一批产品中采集5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于m值（≤100cfu/g），则这种情况是允许的，若≤2个样品的结果（X）位于m值和M值之间（100cfu/g≤X≤1000cfu/g），则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于M（>1000cfu/g），则这种情况也是不允许的。 0/25ga，标准限量，就是每25g样品不得检出。a通常为5次。

挥发性盐基氮：代表动物蛋白受微生物的作用程度，是动物蛋白新鲜度的代表。 MPN：基于泊松分布的一种间接计数方法，most probable number

GB 7718,直接向消费者提供的预包装食品标签，标示应包括食品名称、配料表、净含量和规格。生产者和经销商的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、食品

《环境微生物检测——采样方法》场景剧本

题目：环境微生物检测——采样方法

主题曲、插曲 待定 影片主要角色：

男1号 梁总，25岁，业务主管（西装革履） 男或女2号 小李，20岁，采样组组长（休闲） 女3号 小黄，20岁，前台靓女（时尚的靓女）

男3号 ** 客户，25岁，（带领的衣服）（演成搞笑的土豪人物） 男或女4号： 小王，19岁，某学校的顶岗实习生

第一场：

场景：公司前台（汇标公司的前台，甲在埋头做报表，乙在打电话和客户沟通，前台靓女在接水）

时间：上午

人物：前台靓女、客户，前台靓女 以及同事两三个。

从门外来了一个大约25岁男性在张望。前台靓女赶紧走出来打开门。 前台靓女：您好。

客户：这里是汇标检测公司吗？ 前台靓女：是啊，有什么可以帮到您？

客户：我是来自大中国建筑集团有限公司的××。最近我们一个大楼要竣工验收，需要对水质进行检测，你们能做吗？我们不差钱。

前台靓女指引客户坐下，倒一杯水。

前台靓女：这些业务我们做过很多。我们是第三方检测公司，有对该项目进行检测的资质，严格按照国家标准做的。

客户：对水质都监测什么呀？

前台靓女：《建筑给水排水及采暖

临床微生物标本的送检与采样指南

呼吸道标本采集及运输

一、上呼吸道标本

1、送检指征 上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、会厌炎等，凡具有以下情况任何一项者疑似患者。

1.1 病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。 1.2 细菌性咽-扁桃体炎：明显咽痛、咽部发红、畏寒、发热， 体温可达39°C以上。1.3 喉咙痛、咳嗽、喉部有脓样分泌物等临床症状。

1.4 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管-支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。

2、标本采集 上呼吸道标本包括鼻、鼻咽、咽拭子标本。应根据临床表现和感染部位的不同有选择性的采集标本，以便更好地分离出病原菌。采集时应选择无菌、不含抑制剂的棉拭子，预先用无菌生理盐水或营养肉汤蘸湿拭子，并直取感染部位，减少污染。2.1 鼻拭子的采集：最好使用扩鼻器，先用拭子拭去鼻黏膜表面的分泌物并丢弃，用第2个试子蘸取无菌生理盐水或营养肉汤，插入鼻孔采集病灶标本。

2.2 咽拭子的采集：采集标本时患者先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌的鼻咽拭子（一端弯曲的金属棉拭）由口腔进入，越过舌根到咽后壁或

临床微生物标本的送检与采样指南

呼吸道标本采集及运输

一、上呼吸道标本

1、送检指征 上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、会厌炎等，凡具有以下情况任何一项者疑似患者。

1.1 病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。 1.2 细菌性咽-扁桃体炎：明显咽痛、咽部发红、畏寒、发热， 体温可达39°C以上。1.3 喉咙痛、咳嗽、喉部有脓样分泌物等临床症状。

1.4 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管-支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。

2、标本采集 上呼吸道标本包括鼻、鼻咽、咽拭子标本。应根据临床表现和感染部位的不同有选择性的采集标本，以便更好地分离出病原菌。采集时应选择无菌、不含抑制剂的棉拭子，预先用无菌生理盐水或营养肉汤蘸湿拭子，并直取感染部位，减少污染。2.1 鼻拭子的采集：最好使用扩鼻器，先用拭子拭去鼻黏膜表面的分泌物并丢弃，用第2个试子蘸取无菌生理盐水或营养肉汤，插入鼻孔采集病灶标本。

2.2 咽拭子的采集：采集标本时患者先用清水漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌的鼻咽拭子（一端弯曲的金属棉拭）由口腔进入，越过舌根到咽后壁或

一、空气中微生物的检测方法------细菌总数

（营养琼脂，121℃高压灭菌20min，培养时间37℃,48h） 1.两种方法

（1）撞击法(二级或者六级微生物采样器) （2）自然沉降法（暴露5min）

采样：梅花布点，高度：1.2~1.5m；离墙：1m。 二、茶具微生物检验方法 （一）细菌总数

1、生理盐水的制法：将氯化钠（8.5g）溶解于蒸馏水（1000mL）中，分装到试管内，每管10mL，121℃高压灭菌20min。

2、采样：棉拭子湿润生理盐水，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即口唇接触处一圈（1~1.5cm），用灭菌剪刀剪去棉签手接触处，将棉拭子放入10mL生理盐水中，4h内送检。 3、检验程序：

检样→各1mL加入两块灭菌平皿（若污染严重，可十倍递增稀释）→37℃，48h培养→菌落计数→报告 4、单位：cfu/cm2。 （二）大肠菌群

1、培养基：乳糖胆盐发酵培养液（双料的，每管10mL，115℃高压灭菌15min） 2、检测方法：发酵法（具体内容课本11页） 3、检样（测定细菌总数余下的样品）

4、革兰氏染色过程：（阳性菌显紫色，阴性菌显红色） （1）初染：1min，水洗； （2）碘染：1min，水洗； （3）脱色：30s，水洗；

微生物学假期综合教学实习

实习时间： 2013年 6 月 25 日 开始

实习班级： 应技1101-1102 人

生命科学技术学院微生物教研室

微生物教学实习基本实验流程

第 配制牛肉膏固体培养基、3倍和单倍乳糖发酵液， 一准备无菌水及各种器皿、器材 天

）

灭菌

采集样品

（

第按要求做10倍梯度稀释

二

天

）配制伊红美测样品的细菌总数： 乳糖培养基初发酵试验：

样品的稀释液涂布按实验要求将稀释液接入兰固体和E.C液 牛肉膏平板 3倍、单倍乳糖发酵培养液 体培养基

37OC培养 37OC培养 灭菌

数平板上菌落看乳酸发酵 倒伊红美兰平板 （数，计算样品的细结果，查MPN表 第菌总数 三 检验乳酸发酵管中产酸产气的样品天 ）

伊红美兰平板划线 接E.C管

37OC培养 44.5OC培养

（挑有金属光泽、看结果，鉴定是 第

无光泽的菌落 否有粪大肠杆菌 四

天接单倍乳糖发酵管 革兰氏染色 ）

37OC培养

看复发酵结果 （ 第 综合本实验的六项结果（细菌总数、乳糖管初发酵（MPN）、伊红美兰平板鉴定、 五E.C平板鉴定、革兰氏染色、乳糖复发酵），写出实验报告 天清洗器材，并做好室内清洁。 ） （

微生物学综合教学实习

学习目

第四章 病毒

1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？

答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。

2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？

答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。

3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。

答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞

第四章 病毒

1 病毒具有哪些特点？病毒壳体有哪几种对称类型？

答：①体积微小 ②无完整的细胞结构，主要成分是核酸跟蛋白质 ③严格活细胞内寄生 ④对干扰素敏感，对抗生素不敏感 ⑤繁殖方式是复制，且具有感染性；有螺旋对称型、二十面体对称型、复合对称型。

2 什么是病毒的一步生长曲线？包括几个期？各有何特点？

答：主要以烈性噬菌体为例，一步生长曲线是定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线，反映了每种噬菌体的三个重要的特征参数：潜伏期、裂解期的长短及裂解量。包括潜伏期、裂解期和平稳期，潜伏期细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段，裂解期宿主菌迅速裂解、溶液中噬菌体颗粒急速增加的阶段，平稳期宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高峰的时期。

3 以噬菌体为例，说明病毒的增殖过程。

答：①吸附和侵入：噬菌体感染细菌时，其尾部为吸附器官，能识别宿主菌表面的特殊受体，然后分泌酶类溶解细胞壁，使细胞壁出现小孔，讲头部的核酸注入宿主菌内，蛋白质外壳留在宿主菌细胞外；②生物合成：进入宿主菌内的噬菌体核酸，首先转录翻译产生早期蛋白，进行晚期转录并复制子代核酸，再转录产生噬菌体的结构蛋白，子代核酸和蛋白质按一定程序装配成完整的子代噬菌体颗粒；③当宿主菌细胞

本节课是利用多媒体手段,将微观的细菌、病毒以比较直观的面貌介绍给学生。让他们可以全面的了解关于细菌病毒的基础知识,并渗透辩证的看问题科学观点。

全国中小学“教学中的互联网搜索”优秀教学案例评选

教案设计

本节课是利用多媒体手段,将微观的细菌、病毒以比较直观的面貌介绍给学生。让他们可以全面的了解关于细菌病毒的基础知识,并渗透辩证的看问题科学观点。

五、

教学过程

【引言】播放视频：超级细菌垄全球夺 6 条命，这小小的细菌，弄得人们束手无策，你了解细 菌吗？想了解其他那些更微小的生物吗？那就请你和老师一起走进《神奇的微生物》世界。 【百度视频】在搜索超级细菌垄全球夺 6 条命的视频中，优酷的视频 http://www.77cn.com.cn/v_show/id_XMTk4MjQ2Mjc2.html 微生物是一类身体非常微小的生物，直到近代才被人们发现与认识

,那它们是怎样被发现 的呢？ 【多媒体展示】学习目标(一) 微生物的组成及发现部分： 1、 微生物的组成 2、 最早发现微生物的人 【教师活动】展示 PPT 课件，介绍微生物的发现及组成 【百度知道】http://www.77cn.com.cn/question/181782472.html 【学生活动】完

第六章 微生物的代谢

习 题

一、填空题

1、微生物的4种糖酵解途径中， 是存在于大多数生物体内的一条主流代谢途径； 是存在于某些缺乏完整EMP途径的微生物中的一种替代途径，为微生物所特有； 是产生4碳、5碳等中间产物，为生物合成提供多种前体物质的途径。

2、同型乳酸发酵是指葡萄糖经 途径降解为丙酮酸，丙酮酸在乳酸脱

氢酶的作用下被NADH还原为乳酸。异型乳酸发酵经 、 和 途径分解葡萄糖。代谢终产物除乳酸外，还有 。

3、微生物在糖酵解生成丙酮酸基础上进行的其他种类的发酵有丁二醇发酵、混合酸发酵、

发酵和 发酵等。丁二醇发酵的主要产物是 ， 发酵的主要产物是乳酸、乙酸、甲酸、乙醇。 4、产能代谢中，微生物通过 磷酸化和 磷酸化将某种物质氧化而释放的能量储存在ATP等高能分子中；光合微生物则通过 磷酸化将光能转变成为化学能储存在ATP中。 磷酸化既存在于发酵过程中，也存在