SPR技术使用的蛋白

光学SPR技术原理

光学表面等离子共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）是一种光学物理现象。当一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面，在棱镜与金属薄膜（Au或Ag）的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时，引起金属膜内自由电子产生共振，即表面等离子共振。分析时，先在传感芯片表面固定一层生物分子识别膜，然后将待测样品流过芯片表面，若样品中有能够与芯片表面的生物分子识别膜相互作用的分子，会引起金膜表面折射率变化，最终导致SPR角变化，通过检测SPR角度变化，获得被分析物的浓度、亲和力、动力学常数和特异性等信息。 应用领域

生命科学，食品安全，环境检测，生物医学；毒素和抗生素快速检测；蛋白质组学；药物筛选及相关药物动力学实时检测；生物分子特殊肽段及相关偶合分子的检测；病毒及致病分子蛋白及受体研究；分子识别，免疫调节，免疫测定等，尤其适于在高校、科研院所进行科学研究及教学实验。

物理上指表面等离子体共振(Surface PlasmonResonance)

表面等离子体共振是用于表征表面折射系数改变的光学专业技术，这里所说的表面一般是固相和液相间的界面。

表面等

SPR技术和ITC技术在结构生物学中的应用

摘要 生物大分子的活性是通过不同分子或相同分子之间的相互作用来实现其生物学功能。在结构生物学研究领域中，单纯解析生物大分子的结构已不能满足现代科研的基本要求，所以研究其生物学功能受到了越来越多的重视。本文主要介绍现在常用的SPR技术和ITC技术以及它们在结构生物学中的应用。

关键词 SPR技术 ITC技术 结构生物学

前言

结构生物学是前个世纪后半叶才蓬勃发展起来的重要学科，通过研究核酸、蛋白质等生物大分子的空间结构，可以为生物大分子发挥生理功能的机理提供关键解释[1]。生物分子之间的相互作用奠定了生物生命现象的基础，因此研究生物分子之间的相互作用可以在分子水平上更加精细地阐述生物反应发生的机理，揭示生命现象的本质[2]。

关于蛋白质相互作用的检测手段已有很多，但是其缺点也很明显。SPR（表面等离子共振）生物传感技术作为一种新兴的光学生物化学检测技术，与传统的生化分析方法相比，具有无需标记、灵敏准确、快速、能够实现在线连续检测等优点[3]。此外，在生物体中的各种生物分子之间的相互作用并不像化学反应那样剧烈。通过热力学研究，它能够在结合机制的阐明中起重要作用，为药物的设计提供合理的理论模型[4

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『娱乐八卦』 [八卦江湖]胶原蛋白行业内幕，MM 们不要花冤 枉钱啦

作者：靓眸天使 发表日期：2009-7-6 22:31:00

本人目的是【教大家如何少花钱，买到安全有效的胶原产品】。 群众的眼睛是雪亮的，大家也可以自己看看这个帖子，自行判断

以下为整理后的帖子内容，相信您会从中受益。

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鉴于此贴为本人网络论坛中发表的第一帖，更是天涯社区第一帖，因此我将 用心真诚真实的把我所知道的胶原行业内幕披露出来，使广大爱美的 MM 们认 清真相，不受无良商家的忽悠，尽量不花冤枉钱。 首先介绍一下本人的情况吧。 本人毕业于生物化工类的重点高校，北京化工大学。于 2005 年融资 1000 万，先建立胶原蛋白研究所及实验室，后中试车间，后建立 GMP 生产基地，核 心产品为小分子胶原蛋白，学术名称为胶原

蛋白质计算问题归类解析

一、.有关蛋白质中氨基酸数、肽链数、肽键数、脱水数的计算

ｎ个氨基酸脱水缩合形成一条多肽链，则肽键数＝(ｎ?1)个； ｎ个氨基酸脱水缩合形成ｍ条多肽链，则肽键数＝(ｎ?ｍ)个； 无论蛋白质中有多少条肽链，始终有： 脱水数＝肽键数＝氨基酸数?肽链数

例1．血红蛋白分子中含 574 个氨基酸， 4 条肽链。在形成此蛋白质分子时，脱下的水分子数和形成的肽键数目分别是

A ． 574 和 573 B ． 573 和 573 C ． 570 和 573 D ． 570 和 570

练习1、氨基酸分子缩合形成含2条肽链的蛋白质分子时，相对分子量减少了900，由此可知， 此蛋白质分子中含有的氨基酸数和肽键数分别是（ ）

A．52、52 B．50、50 C．52、50 D．50、49

练习2、 某三十九肽中共有丙氨酸4个，现去掉其中的丙氨酸得到4条长短不等的多肽（如图），这些多肽中肽键总数为

A．31 B．32 C．34 D．35

二、.有关蛋白质相对分子质量的计算

蛋白质的相对分子质量＝氨基酸数×氨基酸的平均相对分子质量?脱水数×18（水的相对分子质量）

检测蛋白质与蛋白质之间相互作用的实验技术

一、检测蛋白质与蛋白质相互作用

① FRET技术（in vivo）

FRET，Fluorescence resonance energy transfer，即荧光共振能量转移技术。该技术的原理是用一种波长的光激发某种荧光蛋白后，它释放的荧光刚好又能激发另一种荧光蛋白，使其释放另一波长的荧光，如下图所示：

以下图为例，若要利用FRET检测两种蛋白是否有相互作用，需将两种蛋白的基因分别与这两种荧光蛋白的基因融合，并在细胞内表达出两种融合蛋白。然后只需用紫外光对CFP进行激发，并检测GFP是否放出绿色荧光。如果能检测到绿色荧光，那么可以说明这两种蛋白可能有相互作用；反之，则是这两种蛋白没有相互作用。

②酵母双、三杂交技术（in vivo）

酵母双杂交系统主要用于考察两种蛋白是否有相互作用，其原理是典型的真核生长转录因子，如GAL4、GCN4等都含有二个不同的结构域，即AD和BD。这些转录因子只有同时具有这两个结构域时才能起始转录。由此，设计不同的两个载体，一个含有AD基因（假设为A载体），另一个含有BD基因（假设为B载体）。

一般将一个已知蛋白的基因连在B载体上，作为诱饵(Bait)，将未知蛋白的基因连在A载体上，将这两

蛋白质计算问题归类解析

一、.有关蛋白质中氨基酸数、肽链数、肽键数、脱水数的计算

ｎ个氨基酸脱水缩合形成一条多肽链，则肽键数＝(ｎ?1)个； ｎ个氨基酸脱水缩合形成ｍ条多肽链，则肽键数＝(ｎ?ｍ)个； 无论蛋白质中有多少条肽链，始终有： 脱水数＝肽键数＝氨基酸数?肽链数

例1．血红蛋白分子中含 574 个氨基酸， 4 条肽链。在形成此蛋白质分子时，脱下的水分子数和形成的肽键数目分别是

A ． 574 和 573 B ． 573 和 573 C ． 570 和 573 D ． 570 和 570

练习1、氨基酸分子缩合形成含2条肽链的蛋白质分子时，相对分子量减少了900，由此可知， 此蛋白质分子中含有的氨基酸数和肽键数分别是（ ）

A．52、52 B．50、50 C．52、50 D．50、49

练习2、 某三十九肽中共有丙氨酸4个，现去掉其中的丙氨酸得到4条长短不等的多肽（如图），这些多肽中肽键总数为

A．31 B．32 C．34 D．35

二、.有关蛋白质相对分子质量的计算

蛋白质的相对分子质量＝氨基酸数×氨基酸的平均相对分子质量?脱水数×18（水的相对分子质量）

警械使用、搜身与带离技术

肖礼俊

Ⅰ教学提要

教学对象分析：学员系全县（市）、区公安机关实战单位，

大多从事过技能战术训练，具有一定的理论和实战经验。

● 教学内容：

一、警械使用、搜身与带离技术动作及应用；

二、警械使用、搜身与带离技术动作教学方法的学习 ● 教学目的：

一、 使学员学会警械使用、搜身与带离技术的动作要领； 二、 共同认识警械使用、搜身与带离技术教学中的一般规律；

三、 了解各县（市）、区教官开展警械使用、搜身与带离技术训练课程的教学情况，听取他们在实际教学中好的做法，帮助分析在教学工作中遇到疑难问题并加以研讨形成互动式教学。 ● 教学任务：

一、 掌握警械使用、搜身与带离技术动作；

二、 学会警械使用、搜身与带离技术教学方法； 三、 培养学员吃苦耐劳的优良品质。 ● 教学的重点与难点：

重点：快速准确地完成动作；警械使用、搜身与带离技术教学的程序和方法。

难点：警械使用、搜身与带离技术动作要领的掌握和实战运用；学习警械使用、搜身与带离技术的教学方法。

● 教学方法：理论讲授、示范讲解、分组训练、纠正动作、总结小评。

● 教学要求：

一、 严格遵守训练场纪律，严禁嘻笑打闹、杜绝各类安全事故的发生；

●

二、 仔细听讲、看示范，

第38卷第5期2011年09月

文章编号:1002-8110（2011）05-0027-04

酿LIQUOR

酒MAKING

Vol.38.№.5Sep.，2011

蛋白质组学技术在鉴定啤酒浑浊蛋白中的初步研究

贾

娟，王德良

（中国食品发酵工业研究院，北京100027）

摘要:啤酒中包含多种大麦蛋白，制麦和酿造过程中受到化学方式或酶的修饰，影响最终的啤酒浑浊稳定

vulgare

L.)，这些蛋

性。从啤酒中分离出的浑浊活性蛋白主要来自大麦储藏蛋白或大麦醇溶蛋白(Hordeum待进一步确认。

关键词：蛋白质组学；鉴定；啤酒浑浊蛋白中图分类号：TS262.5；TS201.2

文献标识码：B

白有富含脯氨酸，由许多不同分子量的片段组成。尽管对啤酒浑浊的研究时间较长，但是对于其特性方面的有

PreliminaryStudyoftheIdentificationofBeerTurbidityCausingProteins

byProteomicsTechnology

JIAJuan,WANGDe-liang

(ChinaNationalResearchInstituteofFoodandFermentationIndustries,Beijing100027，China)

Abstract

胶乳微球使用中常见问题及解答

以下问题是我们用户在使用过程中遇到的问题，我们咨询了国外的技术人员，这是他们的答复）

问：产品说明书中给出的胶乳粒径是平均粒径吗？

答：产品说明书中给出的胶乳粒径（Diameter）是平均粒径。 问：如何选择胶乳微球的粒径？

答：一般选择粒径小的胶乳微球，则需要的抗体量就多，精密度和线性相对较好，而选择粒径大的胶乳微球性，则所需抗体少，精密度和线性相对较差，相对于小球，大球的灵敏度较好。

问：一般情况下我们所使用的微球的浓度大概是多少？

答：整个测定体系中，微球的浓度大约在0.01%左右，当然这与试剂本身规定的线性有关系。 问：在使用离心方法偶联乳胶微球，一般需要多大的（相对）离心力？

答：需要多大的离心力和所使用的乳胶微球有关，一般70nm左右的微球大概13000g/min 30min以上，粒径越小所需时间越长，离心力越大。

问：蛋白（抗体）与微球偶联前，是不是微球的活化时间越长，效率越好？

答：羧基微球的活化所需时间很短，一般以10-20分钟为宜，长时间的活化反而会降低偶联效率。

问：由于抗体不只是FC的氨基酸上有NH2，是不是表示它可以在任何方向与EDCA活化微球偶联呢？如果是这样，是不是会影响抗体与抗原的

花生蛋白饮料是以花生为原料制成的一种植物蛋白饮料,富含蛋白质、脂肪、钙、磷、铁等元素和维生素B1、B2,胡萝卜素、尼克酸、维生素E,以及脑磷脂、卵磷脂等营养成分,是有发展前景的一种营养保健饮料。

技JN S I

加工园

}制的 物白料富含料成兰植蛋饮种料制一,

i白质、肪、、、等元素和蛋脂钙磷铁维生素 B、胡萝卜素、克酸、 B,尼

花生蛋白饮加工技术 t F I^料 -= - I f土5磨浆 )3注意事项、

用磨浆机将花生进行磨浆时， 藿分 .脑、月 譬骞E及 ,磷营 等卵量浸后花仁清冲泡的生用水洗 保饮料有发展前景的一种营养 3 4沥加生‘倍健：遍、干，入花仁1 注意调节好磨的间隙， 00 ml 0以 . 5为~ .

热水 (0进行磨浆。 8℃)6过滤 )

1工艺流程、

浆：封 一 扫■煮 j,均质一灌装一芎口一杀菌配科一■ a d

浸泡生选烤一一花一一皮.

成。品2 1点、乍 操要1选料 )

变的生饱煎、选择料花颗原无损伤、 无霉,

并除去杂质。… .

2)烤 烘

在 1o 3￣

N T烘烤 1mi, 0 n以

钝化花生仁中的脂肪氧化酶，止防

团

出现豆腥味，同时高温烘烤花生， l利于脱皮，可赋于花生乳特殊有还的香味。 3脱皮 )人工脱去花生衣，防止花生以皮上的色素