atfb染色

高中数学竞赛讲座二试内容19

染色问题 （一）

一．基本方法

染色问题的本质是对集合的元素进行分类的问题，染色可以使分类更直观、更形象．

染色问题主要有两类：一类使借助染色方法解决问题；二类是问题的条件是用染色的方式给出的．常

见的染色问题有对区域的染色（包括对方格，三角形的染色），对线段的染色，对点的染色．常用思想方法是整体思想，抽屉原理，考虑极端情形，数学归纳法，构造思想等． 二．例题精选

（一）．k染色平面问题

将平面上的点用不超过k种颜色给每一个点染一种颜色，这样的平面叫做k染色平面．

１．坐标平面上若干个整点，将一些整点染红色，一些染蓝色，证明：总可以有一种染法使每行、每列两

种颜色点数之差不超过１．

R B R R B B R B B R B R B R R B R B R B

R B R B R

B R B R B

２．对于任意的a>0，二染色平面上必存在斜边长为a且内角分别为30?,60?,90?的三顶点同色的三角形．

B B

Ｒ a Ｒ

３．将平面上每一个点都以红、蓝两色之一染色，证明：存在这样的两个相似三角形，

B B 它们相似比为１９９５，而且每个三角形的三个顶点同色．

1

B B R RR

我来一一解答你的疑问：

1.“做大鼠皮下HE染色后可以观察炎症细胞及其他细胞的存在情况吗？” 答：HE 染色，即苏木精 — 伊红染色法，苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色后是可以观察炎症细胞及其他细胞的存在情况，因为炎症细胞有自身的特点，通常细胞核较大，核质比大，H&E染色后，细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。因此，H&E染色，尤其在400倍放大的情况下，可以明显看到一个个以蓝色为主的点状的炎症细胞（主要是中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞），而其他细胞则体积较大，细胞质较多成粉红色，细胞核较小，呈蓝色或深蓝色。

2. “通过HE染色观察我的材料是否对皮下组织产生炎症反应，那么HE的结果包括哪些呢？”

答：通过HE染色来评价是否有炎症反应以及炎症反应的强弱，通常有两种方法：炎症细胞浸润区域的面积大小和高倍视野下平均炎症细胞的数量。1）H&E染色，在400倍下，是可以观察到明显的炎症细胞的，故可知道你的材料是否对皮下组织产生炎症反应；2）HE的结果通常用炎症细胞浸润区域的面积

43、组织中铁质的显色法 44、组织中铜的显色法 罗丹明染色法

1、[试剂配制]：（1）DMAB-罗丹明贮备液：对二甲氨基苄罗丹明饱和于无水乙醇中，贮存液4℃保存。（2）DMAB-罗丹工作液（充分摇动）：DMAB-罗丹明贮备液3ml，蒸馏水47ml，使用前现配现用。 2、[染色步骤]：（1）切片脱蜡至蒸馏水。（2）用DMAB-罗丹明液60℃染色3小时（1小时后显微镜下检查）。（3）用蒸馏水冲洗。（4）对比染色（颜色要浅些）用苏木精染5秒。（5）盐酸乙醇分化。（6）流水冲洗5分钟。（7）脱水，透明，风骨。

3、[结 果]：铜沉积物-砖红色，核-蓝色，胆汁-绿色。 Timm's铜染色法

1、[试剂配制]：（1）液体A：5%硝酸银水溶液，液体B：对苯二酚2.0g，柠檬酸5.0g，蒸馏水100ml，液体可以贮存在4℃暗处一个月。 2、[染色步骤]：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%硫化铵5min （3）充分水洗。（4）用0.1N盐酸2-3min祛除铁和硫化锌液(15%三氯醋酸也可以使用)。（5）水洗。（6）切片置新鲜1份A液和5份B液过滤后使用，将硫化铜转化为硫化银3min就可以完成。（7）水洗。（8）脱水，透明，封固。

3、[结 果

高中数学竞赛讲座二试内容19

染色问题 （一）

一．基本方法

染色问题的本质是对集合的元素进行分类的问题，染色可以使分类更直观、更形象．

染色问题主要有两类：一类使借助染色方法解决问题；二类是问题的条件是用染色的方式给出的．常

见的染色问题有对区域的染色（包括对方格，三角形的染色），对线段的染色，对点的染色．常用思想方法是整体思想，抽屉原理，考虑极端情形，数学归纳法，构造思想等． 二．例题精选

（一）．k染色平面问题

将平面上的点用不超过k种颜色给每一个点染一种颜色，这样的平面叫做k染色平面．

１．坐标平面上若干个整点，将一些整点染红色，一些染蓝色，证明：总可以有一种染法使每行、每列两

种颜色点数之差不超过１．

R B R R B B R B B R B R B R R B R B R B

R B R B R

B R B R B

２．对于任意的a>0，二染色平面上必存在斜边长为a且内角分别为30?,60?,90?的三顶点同色的三角形．

B B

Ｒ a Ｒ

３．将平面上每一个点都以红、蓝两色之一染色，证明：存在这样的两个相似三角形，

B B 它们相似比为１９９５，而且每个三角形的三个顶点同色．

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常规HE染色

石蜡包埋的组织切片必须经过脱蜡水洗处理才能染色，让水溶性染料渗入组织中，含蜡的组织切片无法进行任何染色。所以，在染色前必须用二甲苯或替换剂进行彻底脱蜡，经过乙醇洗后，再用水洗。即石蜡组织切片→二甲苯→乙醇（无水乙醇，95%，80%）→水。人们通常把这个过程叫做切片脱蜡至水。脱蜡至水是染色前的必须完成的基本步骤。一般脱蜡至水的时间和步骤如下： HE染色脱蜡至水步骤 步骤顺序

1 2 3 4 5 6 7 8

冰冻切片和细胞涂片样品的染色不需要经过脱蜡至水步骤，水洗后直接用苏木精和伊红染色。

染色是利用染料的不同作用，使组织与染料以不同方式进行结合。常规染色是苏木精和伊红染色（H.E）。特殊染色（special stains）和组织化学（免役组织化学）染色是根据诊断的需要对组织中的某些成分进行非常规的染色。

HE染色用的苏木精是一种树木苏木的一种氧化产品，因为这种树非常罕见，多数氧化苏木精是合成品。苏木精必须氧化成熟后才能使用。苏木精染液需要预先配制，放置几个月自然氧化成熟。或购买成熟过的商品苏木精，也可在苏木精液中加一些成熟剂。

苏木精本身对组织没有染色作用，需要“媒染剂”与组织连接，媒染剂是铁，铝，钨等由这类正离子金属提供。矾也

肌肉冰冻切片常用组织学及酶组织化学染色技术

（—）苏木精和伊红染色（Hematoxylin and Eosin, HE） 1． 苏木精溶液染色10分钟 2．流水冲洗10分钟 2． 伊红溶液染色3分钟 4．流水冲洗1分钟

5．梯度酒精脱水，透明树胶封固

骨骼肌HE染色（肌膜核蓝色，肌纤维粉红色，结缔组织淡红色）

（二）改良Gomori三色染色方法（Modified Gomori Trichrome, MGT） 1． Harris苏木精10分钟 2． 水冲洗 10分钟

3． Gomori氏溶液30分钟 ～60分钟 4．0．2%醋酸浸洗1分钟

5．酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。

骨骼肌MGT染色（核紫红,肌纤维暗绿色,胶原亮绿色 ,线粒体红色）

（三）PAS反应法(Periodic Acid Schiffs reaction, PAS) 1． 固定于Carnoiy氏固定液10分钟 2．流水冲洗2分钟 3．0．5%过碘酸5分钟 4．蒸溜水洗1～2分钟 5．Schiff氏溶液15～30分钟 6．流水洗5～10分钟 7．Harris苏木精溶液2分钟

染色体畸变和染色体病

染色体畸变和染色体病

一、染色体畸变

细胞中染色体发生数量或结构改变的一类变化称为染色体畸变。也叫做染色体异常。这些染色体异常可用光学显微镜检出。由于染色体畸变可导致因基组增减和位置的转移，造成了基因间或遗传物质的增失即不平衡，影响物质代谢的正常进程而给机体造成严重的危害，成为染色体病形成的基础。

染色体异常分为数目和结构异常两类。数目异常包括整个染色体组成倍增加、个别染色体整条或某个节段的增减造成染色结构改变，而致染色数量变异；染色体结构异常常涉及一条至多条染色体上较大的区段变化，影响较多的基因。

1、染色体数目异常的类型：

染色体数目异常的主要原因在于生殖细胞分裂过程中出现了染色体的行为异常。A整倍体：染色体数目整倍的增减，常由双雄受精、双雌受精和核内复制造成。结果出现：单倍体（均流产）；三倍体（人类有69,XXX/69,XXY）；四倍体（人类为92,XXXX或92,XXXY）。把三倍体以上的细胞称为多倍体。B非整倍体：由染色体不分离、染色体丢失所致。染色体数目比二倍体增减一条或几条，结果形成：

（1）亚二倍体：染色体数目少于二倍体，结果必然导致单体性，如45,XO。这是妇产科较常见疾病，

临床上称为先天性性腺发育不全或Turner

染色体畸变和染色体病

染色体畸变和染色体病

一、染色体畸变

细胞中染色体发生数量或结构改变的一类变化称为染色体畸变。也叫做染色体异常。这些染色体异常可用光学显微镜检出。由于染色体畸变可导致因基组增减和位置的转移，造成了基因间或遗传物质的增失即不平衡，影响物质代谢的正常进程而给机体造成严重的危害，成为染色体病形成的基础。

染色体异常分为数目和结构异常两类。数目异常包括整个染色体组成倍增加、个别染色体整条或某个节段的增减造成染色结构改变，而致染色数量变异；染色体结构异常常涉及一条至多条染色体上较大的区段变化，影响较多的基因。

1、染色体数目异常的类型：

染色体数目异常的主要原因在于生殖细胞分裂过程中出现了染色体的行为异常。A整倍体：染色体数目整倍的增减，常由双雄受精、双雌受精和核内复制造成。结果出现：单倍体（均流产）；三倍体（人类有69,XXX/69,XXY）；四倍体（人类为92,XXXX或92,XXXY）。把三倍体以上的细胞称为多倍体。B非整倍体：由染色体不分离、染色体丢失所致。染色体数目比二倍体增减一条或几条，结果形成：

（1）亚二倍体：染色体数目少于二倍体，结果必然导致单体性，如45,XO。这是妇产科较常见疾病，

临床上称为先天性性腺发育不全或Turner

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Masson

【产品名称】

Masson三色染色液 【包装规格】

货号：DC0032

套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒 【预期用途】

主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。 【检验原理】

Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 【主要组成成分】

试剂组成

1、Weigert铁苏木素A液 2、Weigert铁苏木素B液 3、酸性乙醇分化液 4、蓝化液

5、丽春红

16染色问题

染色是将一组对象进行分类的一种直观描述. 例如，我们将集合A中的一部分元素染成红色，另一部分元素染成兰色，再把剩下的元素全染成黄色，这时我们就把集合的元素分成了红、蓝、黄三类.由于这种描述方法形象直观，因而在竞赛数学中得到广泛的应用. 下面我们主要讨论图的染色、平面染色及网格染色问题. 1．基本原理

为了说话方便，我们作如下约定：若将图G的边用k种颜色染，每条边恰染一种颜色，则把这种染色图称为k染色图.若将图G的顶点用k种颜色染，每个顶点恰染一种颜色，则把这种染色图称为k顶点染色图. 若将平面上的点用k种颜色染，每个点恰染一种颜色，则把这种染色平面称为k染色平面.若将m?n的棋盘的?m?1??n?1?个格点用k种颜色染，每个格点恰染一种颜色，则把这种染色的棋盘称为k染色的网格.需要说明的是，将一组对象用k种颜色染色时，并不要求染色完后每种颜色的对象都要出现. 另外，我们还约定：在对图的边染色之后，边的颜色全相同的r阶完全子图称为同色kr，同色k3又称为同色三角形.

定理1 二染色的k6必有同色三角形. 完全图k5可以二染色使其不含同色三角形. 二染色的k5不含同色三角形的充要条件是k5由2个颜色相异的长为5的同色圈构成.

证