自身抗体检测最常用的方法

几种常用的抗体检测方法

(1)免疫酶技术

免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性和酶对底物显色反应的高效催化作用有机结合而成的免疫学技术。由于它特异性强，灵敏度高，现已广泛用于筛选和鉴定单抗。 A、器材和试剂 a. 包被缓冲液：

碳酸盐缓冲液：取0.2mol/L Na2CO3 8ml，0.2mol/L NaHCO3 17ml混合，再加75ml蒸馏水，调PH至9.6。

Tris-HCl缓冲液（PH8.0，0.02mol/L）：取0.1mol/L Tris 100ml，0.1mol/L HCl 58.4ml混合，加蒸馏水至1000ml。

b. 洗涤缓冲液（PH7.2的PBS）：KH2PO4 0.2g，KCl 0.2g，Na2HPO4&S226;12H2O 2.9g，NaCl 8.0g，Tween-20 0.5ml，加蒸馏水至1000ml。

c. 稀释液和封闭液：牛血清白蛋白（BSA）0.1g，加洗涤液至100ml；或用洗涤液将小牛血清配成5-10%使用。

d. 酶反应终止液（2mol/L H2SO4）：取蒸馏水178.3ml，滴加浓硫酸（98%）21.7ml。 e. 底物缓冲液（PH5.0，磷酸盐-柠檬酸缓冲液）：取0.2mol/L Na2HPO4

一、抗核抗体

抗核抗体（antinuclearantibodies，ANA）泛指抗各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。ANA的性质主要是IgG，也有IgM和IgA，甚至IgD和IgE。ANA可以与不同来源的细胞核起反应，无器官特异性和种属特异性。ANA主要存在于血清中，也可存在于其他体液如滑膜液、胸水和尿液中。

ANA在SIE患者的滴度较高，但也出现在其他许多自身免疫病中，在许多研究报告中，都将检出ANA作为自身免疫甚至自身免疫病存在的依据。这种现象的机制尚未明了，有待于进一步研究。（一）ANA的类型及意义

由于细胞核成分的复杂性，不同成分的抗原性也不同；因此就会有多种不同的ANA。

1．抗核蛋白抗体核蛋白抗原（DNP）由DNA和组蛋白组成。由于DNP抗原存在不溶性和可溶性两个部分，可分别产生相应的抗体。不溶性DNP抗体通常不完全被DNA和组蛋白所吸收，它是形成狼疮细胞的因子；可溶性抗原存在于各种关节炎病人的滑膜液中，其相应抗体也出现于RA病人的滑膜液中。

2．抗DNA抗体可以分为两大类：①抗天然DNA（nDNA）抗体，或称抗双链DNA（dsDNA）抗体；②抗变性DNA抗体，或称抗单链DNA（ssDNA）抗体。抗dsDNA抗体对SLE有较高的特

慢性荨麻疹患者甲状腺自身抗体检测及自体血清皮肤试验的意义 胡小平1 ,谢谦2 ,于波1 ,邵勇1，张杰1，钟绮丽1 ,马刚1

（1 北京大学深圳医院皮肤科；2 北京大学深圳医院内分泌科广东深圳 518036）

[摘要] 目的:通过检测指标分析慢性荨麻疹和甲状腺功能亢进的关系，探讨甲状腺自身抗体在慢性荨麻疹发病中的作用和自体皮肤血清试验的意义。方法:研究对象包括100例慢性荨麻疹患者，68例甲亢合并慢性荨麻疹患者，60例甲状腺功能亢进患者和60例健康人群，回顾性分析四组患者的临床资料，检测游离甲状腺素（FT3、FT4）、高敏促甲状腺素（sTSH），甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb、TRAb），并进行自体血清皮肤试验（ASST），比较各组指标间的差异性。结果:慢性荨麻疹组TGAb、TPOAb、TRAb和ASST阳性率均显著高于对照组；甲亢合并慢性荨麻疹组TGAb、TPOAb、TRAb阳性率均显著高于慢性荨麻疹组，两组ASST阳性率有显著性差异；甲亢组TGAb、TPOAb阳性率和甲亢合并慢性荨麻疹组差异无显著性，TRAb和ASST阳性率有显著性差异；慢性荨麻疹组sTSH水平和对照组有显著性差异。结论:甲状腺自身抗体在慢性荨麻疹发病中可能起一定

1. 自身抗体

（1） 检验项目：抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)、抗线粒体抗体(AMA)

（2） 标本采集：3ml 新鲜血于无抗凝管（红色）;可与特定蛋白检测合抽一管血，共3ml。

（3） 检验方法：间接免疫荧光法

（4） 仪器：荧光显微镜NIKON--50i

（5） 试剂：欧蒙试剂

（6） 临床意义：

ANA：对自身免疫病有重要诊断价值。如SLE、硬质病、类风关、干燥综合症等疾病，滴度大都在>1:100，而活动性SLE 阳性率几乎100%。抗核抗体阳性的疾病有：结缔组织病，如皮肌炎、盘状红斑狼疮；消化道疾病，如慢活肝、溃疡性结肠炎；造血系统病，如巨球蛋白血症、淋巴瘤、恶性贫血等。其它疾病，如药物反应、淋巴细胞性甲状腺炎、恶性肿瘤、结核菌、血管炎、重症肌无力等。但这些疾病滴度往往过低。我院大都是肝炎病人，起始滴度为1：100。如果发现阳性病人，则会作进一步的稀释试验。正常的老年人约有2-4%者呈低滴度阳性。

AMA：在慢性肝炎、肝硬化病人，可有30%阳性率；在原发性胆汁性肝硬变，可有90%阳性；正常人无此抗体。

ASMA：此抗体为非特异性抗体。当肝炎病人肝细胞严重损害时，肝细胞胞浆中，肌球蛋白和肌纤维收缩蛋白，释放到血液中产生抗体。抗平滑肌

磷脂综合症相关抗体检测（抗心磷脂；抗β2糖蛋白I）

检验科免疫室

抗心磷脂抗体（AC L），抗β2糖蛋白I抗体（Anti-β2GPI）等自身抗体与机体心脑血管、下肢深静脉、肾静脉、视网膜静脉以及胎盘等部位血栓的发生密切相关，抗β2GPI抗体是和血栓形成相关性最强的抗体并且偏向与静脉血栓相关，而ACL偏向与动脉血栓相关。

本室开展 ACL-IgG ACL-IgM ACL-IgA

β2GP I-IgG

β2GP I-IgM 等项目，适用于对以下疾病的诊断或监测：

1 抗磷脂抗体综合征（APS） 表现为反复的动脉、静脉血栓、习惯性流产和血小板减少症等症状，多见于中年女性患者。

2 系统性红斑狼疮 SLE患者抗磷脂抗体阳性者更易发生高血压、神经系统症状和肾炎，医生需定期筛查其抗磷脂抗体水平，若发现持续阳性状态，则建议预防性服用羟化氯喹和低剂量阿司匹林。对于无SLE和血栓病史的，若抗磷脂抗体阳性同时还存在其他血栓高危因素，则建议长期服用低剂量阿司匹林以预防血栓的发生。

3 脑梗塞 抗磷脂抗体的存在除了与偏头痛、休克、短暂性脑缺血等症状相关外，ACL等抗体

红细胞血型不规则抗体是导致免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血等的原因,平常多在ABO正反定型不符、交叉配血异常、新生儿溶血、溶血性贫血时经血型血清学试验被发现。对以往的不规则抗体检测情况进行分析,可以大致了解本地区人群中的不规则抗体分布特点,为今后的血型血清学和输血工作提供帮助与参考。

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中国实验诊断学

20年 5 07月第 l卷 1

第5期

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6 3 — 8— -—

[] 5孙

芾，林

宏，王厚芳，呼吸系统感染性疾病快速诊断技术等.

[] 6赵林清，渊，钱王之棵， .等呼吸道合胞病毒检测方法比较[] J.临床儿科杂志， O,1 1: . 2 32 () 2 O 3

的应用[]现代检验医学杂志， 0,94: . J. 2 41()1 0 3

(收稿日期：06 8 0 20—0—1)文章编号：07 2720 )一08—0 10—4 8(Of 7 63 2

红细胞血型不规则抗体检测结果分析关亮，郑朝晖(台州市中心血站，浙江台州 380) 1 0 0

红细胞血型不规则抗体是导致免疫性溶血性输

13操作方法 .

盐水法、球蛋白法、抗吸收放散试

血反应、新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血等的原因

最常用的PowerPoint动画效果及设置方法

用过Flash软件的老师可能都知道在Flash里面，可以通过为一个对象画出一条路径来，然后就可以让对象按照这个路径进行动作，PowerPoint XP中也提供了这个让用户心动的功能。具体实现方法如下：

先选定一个对象，方法一：点击“幻灯片放映→自定义动画→添加效果→动作路径→绘制自定义路径→自由曲线”命令；方法二：单击右侧窗格中“添加效果”按钮，在弹出的菜单中选择“动作路径→绘制自定义路径→自由曲线”。然后用户的鼠标指针会变成笔形，可以在幻灯片中随意画出一条曲线，这就是所选对象的动作路径了。

上面介绍的是PowerPoint XP提供的动画效果，类似的效果还有很多可供选用；另外在PowerPoint XP中自己动手也可以制作出不错的动画效果。

为幻灯片添加电影字幕式效果

PowerPoint XP提供了丰富的自定义动画，用户可以合理组合动画效果，制作出相当漂亮的动画来。这里介绍在PowerPoint XP中实现字幕滚动效果的制作方法：

字幕“由上往下”或“由下往上”滚动效果，可直接选取自定义动画中的“字幕式”效果来实现。方法：选定对象，单击“添加效果”按钮，在弹出的菜单中选

最常用的PowerPoint动画效果及设置方法

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艾滋病病毒抗体检测知情同意书

艾滋病是大家都非常关注的一种对人类威胁非常严重的疾病，为了保护您和家人，在本次操作(手术)前，做一次艾滋病病毒(HIV)抗体初筛检测非常必要,医院为您提供免费检测，同时承诺为您保守秘密。

如果您正处于艾滋病病毒感染“窗口期”（从感染艾滋病病毒起至3个月以内），因而未能检测出是否感染艾滋病病毒是可能存在的。

艾滋病病毒抗体检测试剂在个别情况下可能会出现阴性和假阳性的反应，我们不能保证检测结果绝对准确。

本人已经接受上述艾滋病病毒抗体检测告知内容，自愿选择是否接受艾滋病病毒抗体检测。

自愿接受艾滋病病毒

抗体检测

本人签字：

日 期：

不接受艾滋病病毒抗 体检测 本人签字： 日 期：

Shell命令行操作

Linux shell 简介

Linux shell指的是一种程序，有了它，用户就能通过键盘输入指令来操作计算机了。Shell会执行用户输入的命令，并且在显示器上显示执行结果。这种交互的全过程都是基于文本的，与其他各章介绍的图形化操作不同。这种面向命令行的用户界面被称为 CLI(Command Line interface)。在图形化用户界面(GUI)出现之前，人们一直是通过命令行界面来操作计算机的。 现在，基于图形界面的工具越来越多，许多工作都不必使用Shell就可以完成了。然而，专业的 Linux用户认为Shell是一个非常有用的工具，学习 Linux时一定要学习Shell，至少要掌握一些基础知识和基本的命令 启动shell

在启动Linux桌面系统后，Shell已经在后台运行起来了，但并没有显示出来。如果想让它显示出来，

按如下的组合键就可以： + +

组合键中的F2可以替换为F3、F4、F5、F6。 如果要回到图形界面，则按如下组合键： + +

另外，在图形桌面环境下运行“系统终端”也可以执行Shell命令，与用组合键切换出来的命令行界面

是等效的。“系统终端”启动后是一个命令行操作窗口，可以随时放