饲料中黄曲霉毒素检测方法

1.1.4 黄曲霉毒素的解毒措施

黄曲霉毒素危害严重，分析每一批家禽饲料中霉菌毒素的含量是不可能的，当慢性霉菌毒素中毒发生时，除了轻微的生产性能下降外，没有任何明确的临床症状。在发展中国家中，每年黄曲霉毒素都会给饲料业及畜牧业带来巨大经济损失。在过去很长的一段时间里，为尽量减少霉菌毒素的危害所做的努力已经取得长足的进步，避免饲料中黄曲霉毒素的含量超过规定允许的浓度是预防和治疗毒素中毒的方法之一。为减少黄曲霉毒素及其代谢物残留在动物性食品中以及减轻毒性反应，适当的方法包括物理分离，化学方法和毒素粘合剂是必须要使用的

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，如沸石化合物，活性炭，珍珠岩，膨润土，硅藻土等已经被使用。

1.1.4.1 物理去毒方法

传统用于霉菌毒素的物理去毒方法主要有混合稀释法、水洗法、热处理、脱壳、磨粉、放射、萃取、吸附等。混合稀释法是将简单地将霉变饲料与未霉变饲料进行混合，以降低饲料中霉菌毒素的浓度，此法成本低，工作量大，不能从根本上解决饲料中毒素的问题。水洗法可显著减少毒素，但只用于湿磨或发酵的前处理，否则干燥成本太高。霉菌素素在谷物表面含量高，脱壳可有效降低霉菌毒素水平，但工作量大。黄曲霉毒素耐热，一些试验表明热处理似乎能降低一些毒素水平，然而实际

黄曲霉毒素有毒性和致癌性，主要作用于肝脏

黄曲霉毒素基本结构由一个二呋喃环和一个氧杂萘邻酮组成，前者为其毒性结构，后者可能与其致癌作用有关。黄曲霉毒素进入人或动物体内后，除抑制DNA、RNA合成外, 也抑制肝脏蛋白质合成，导致人体中毒。台湾省有3家农民因食用黄曲霉毒素含量高(225.9μg/kg)的发霉大米, 导致39人中有25人中毒, 其中有3名儿童死亡。1974年印度两个邦中有200个村庄暴发黄曲霉中毒性肝炎，397人发病, 死亡106人，中毒患者都食用过霉变的玉米(黄曲霉毒素含量高达6.25~15.6 mg/kg)。2004年初肯尼亚东部地区因食用被黄曲霉污染的玉米而引起317人肝脏衰竭，125人死亡。黄曲霉毒素还可引起人或动物胆管上皮细胞增生及脾、肾、睾丸、大脑、神经系统病变，以及抑制免疫。

生理学致癌机制的研究表明：黄曲霉毒素可以与人或动物体内DNA嘌呤残基共价结合，从而造成DNA的某些损伤，引起DNA结构和功能的改变，产生癌变。它是目前公认致癌性最强物质之一。

黄曲霉毒素广泛存在，无法杜绝，采用转基因技术防治是方向 无论是农作物还是加工食品，无论是生长环节还是存储环节，都容易受到黄曲霉菌等真菌的感染。在潮湿和高温环境下这类真菌生

农产品与食品质量检测技术教学资源库

《食品质量安全检测技术》课程-微教材

微课编号 所属模块（章节） 关键词 是否通用 微课类型 W2101 微课名称 食用油中黄曲霉毒素总量快速检测 子模块 生物毒素的快速检测 生物安全快速检测 食用油；黄曲霉毒素总量；快速检测 通用 农产品 √食品 实验实训型 微课形式 是否重点建设 实地拍摄式 √是 否 教学设计模式 直观演示法 1、 了解黄曲霉毒素的危害 教学目标 2、 掌握黄曲霉毒素总量快速检测的样品前处理方法 3、 掌握黄曲霉毒素总量快速检测的检测方法 知识点 1、 黄曲霉毒素相关知识及危害 教学内容 2、 食用油中黄曲霉毒素总量快速检测的前处理知识 技能点 1、 食用油中黄曲霉毒素总量快速检测的前处理操作技术 2、 食用油中黄曲霉毒素总量快速检3、 食用油中黄曲霉毒素总量快速检测测的检测基本操作技术 的基本检测知识 知识讲解

1、黄曲霉毒素的危害

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉寄生曲霉产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和

猪只饲料中的霉菌毒素：临床症状 目前全世界饲料谷物中出现霉菌毒素的比例高达25％以上，除了对畜牧产业造成显著的经济损失外，部分霉菌毒素并具致癌性及/或致畸胎性，可经由食用肉或乳汁传至人类。一般而言，霉菌毒素常由三种霉菌属所产生：曲菌属、青霉菌属和梭霉菌属。霉菌毒素产生的临床中毒反应会因在饲料中的含毒量、喂饲的时间、其它霉菌毒素存在与否、及动物本身的物种、年龄及健康状况而有所不同。临床反应的变化可自急性中毒症状至慢性症状。呕吐毒素造成猪只厌食、F2毒素影响繁殖性能、赭曲毒素导致肾脏受损及黄曲毒素籍由过其免疫抑制作用提高畜体对疾病的易感性。黄曲毒素同时造成出血和消化性障碍。 简介 霉菌毒素对猪只造成的临床反应摘要于表一。临床症状的发生与摄取剂量和时间有关，严重程度可自急性反应至慢性症状而有不一。目前已知的霉菌毒素其临床症状多为亚急性或慢性反应，症状常是诡僪且模糊不清的（Osweiler，1992）。由猪只采食遭霉菌毒素污染的饲料而产生的各种反应显示诸如健康状态等因子均会影响观察结果（Seddom et al. 1997）。蛋白质缺乏和硒缺乏被认为较易感染霉菌毒素中毒症（Osweiler，1992）。幼畜是最易感的族群（CAST，1989）。 毒素

饲料中钙的测定方法

饲料中钙含量的测定———乙二胺四乙酸二钠络合滴定法 1 范围

本方法规定了用乙二胺四乙酸二钠络合滴定法测定饲料中钙含量。

本方法适用于饲料原料和饲料产品。本方法钙的最低检测限为150mg/kg(取试样1g 时)。 2 引用标准

GB/T 6682-1992 分析实验室用水规格和实验方法

GB/T 601-1988 化学试剂滴定分析(容量分析)用标准溶液的制备 3 原理

将试样中有机物破杯，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。 4 试剂

实验用水应符合GB/6682 中三级用水规格，使用试剂除特殊规定外均为分析纯。 4.1 盐酸羟胺。 4.2 三乙醇胺。 4.3 乙二胺。

4.4 盐酸水溶液，1+3。

4.5 氢氧化钾溶液(200g/L)，称取20g 氢氧化钾溶于100mL 水中。

4.6 淀粉溶液(10g/L)，称取1g 可溶性淀粉入200mL 烧杯中，加5mL 水润湿，加95mL 沸水搅拌，煮沸，冷却备用(现用现配)。 4.

霉毒素对水产养殖的危害

高温高湿天气，是霉毒素最易生长形成的气候条件，同样也是水产养殖动物生长最旺盛的季节。因此，在水产养殖方面提高对霉毒素的认识，将霉毒素的危害降低显得非常有必要。

1.饲料存储不当或存储时间久是霉毒素产生的重要来源之一，水产养殖不可避免的是在高温高湿的环境下进行，在这种条件下，饲料中所含的脂肪等营养物质极易滋生霉菌产生霉毒素。很多时候，表面上并不能看出饲料已经发霉了，但其实霉毒素正在形成。

2.饲料原料也是滋生霉毒素的重要场所，饲料原料中玉米（2313，-5.00，-0.22%）、麸皮等，由于其生产季节相对固定，很多原料需要存放较长的时间，一些存放不当饲料原料则极易产生霉毒素。

尽管在饲料加工的过程中，高温可以杀灭部分霉毒素活性，但大部分的毒素仍存在，并在使用过程中给水产养殖动物造成危害。

3.部分存放过久的中草药产品也容易产生霉毒素，如黄芪、陈皮等中草药，在存放不当的条件下较容易发霉，产生毒素；此外，开袋后的中药产品不能及时用完也很容易发霉滋生霉毒素。

4.养殖户不注意细节也使得霉菌有可乘之机，如开袋的饲料没用完后不及时扎紧袋口、开包的药品不能及时用完、一些已经发霉的饲料或者药品舍不得扔掉继续用，以及拌好料不及时投喂等习惯都是滋生霉

饲料检测方法初探

摘要：随着生活水平的提高，人们对于生活各方面的要求也在不断的提高，在

这种情况下，作为人们日常生活中必不可少的一个重要部分，畜产品的安全日益受到人们的关注，尤其是在畜产品饲料的安全方面，人们给予了更大的重视[1]。检测机构一般对饲料中的水分、粗灰分、粗蛋白、喹乙醇、呋喃唑酮、铅等进行检测，本文介绍了饲料中各项指标的检测方法，为饲料的检测提供一定的指导。

关键词：畜产品、饲料、安全、检测方法

农产品的安全现在越来越引起人们的关注，保障农产品安全的第一步就是要准确地检测农产品中组分的含量。作为安全标准体系的主要技术支撑，分析测试仪器和分析测试方法已经渗透到现代农业的各领域。除此之外，作为常规的检测方法和各种快速检测法由于操作简单在饲料检测中也得到广泛地应用。现就不同检测方法的基本原理及应用进行阐述。 1、常规检测法

对饲料中水分、粗灰分、粗蛋白、粗纤维、粗脂肪这些常规成分主要采用国标法。该方法操作简单，对仪器要求不高。满足国标规范要求，可以为生产和销售饲料产品质量，提供可靠检测数据。 2、酶联免疫吸附法（ELISA法）

饲料中的黄曲霉毒素B1、盐酸克仑特罗等的测定一般采用酶联免疫吸附法。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原

发酵饲料中乳酸含量的测定方法

微生物发酵饲料的生产菌种主要有乳酸菌、酵母菌和芽孢菌，其中乳酸菌包括发酵乳杆菌、嗜酸乳杆菌和粪肠球菌3种。乳酸菌是发酵的主角，其在厌氧条件下大量繁殖占支配地位时产生大量的乳酸，抑制其他不良微生物的生长繁殖，从而制成了优质的微生物发酵饲料。豆粕中加入乳酸菌后，产品不仅小肽含量高，而且具有乳香味，诱食性极佳。因此，发酵饲料中乳酸含量的高低是判断微生物发酵饲料品质优劣的一个重要指标。

1 原理

乳酸在铜离子的催化下，与浓硫酸作用生成乙醛，乙醛能与对羟基联苯作用生成在565nm 处有特征吸收的紫色物质。在一定浓度范围内，乳酸含量与565nm 处吸光度呈线性关系，因此可以通过测定565nm 处的吸光度来测定乳酸的含量。

2 材料、试剂与仪器

无水乳酸锂、对羟基联苯、钨酸钠、硫酸铜、氢氧化钙、浓硫酸均为分析纯试剂。 钨酸溶液：0.667mol/L硫酸及10%(W/V)钨酸钠溶液等体积混合，使用前配制；20%(W/V)硫酸铜溶液：称取硫酸铜20g，加蒸馏水定容至100ml；对羟基联苯溶液：称取对羟基联苯1.5 g溶于100ml 的0.125mol/L氢氧化钠溶液中( 配制时加热助溶，溶解后为澄清液体)，贮存于棕色瓶中，保存于4

饲料中有效能评定

对饲料中有效能评定的认识较蛋白质早。1809年德国的Darie（1752-1828）就提出了干草价（当量），以每千克干草为标准评定饲料的单位。1872年Fjord提出了北欧饲料单位，1874年作了修订，后改为大麦单位；1913年瑞典的Hansson，1931年丹麦的Frederkson作了进一步修改，并定义每千克大麦的肥育净能为1650Kcal，产奶净能为2100Kcal。Wolff（1874）提出了可消化养分，后来Wolff和Lehmann提出了TDN的计算公式。最初可消化粗脂肪的系数是2.4，10年后美国的工作者将其改为现在的2.25。1917年Armsbe提出了净能体系；Armsbe的净能体系是用呼吸测热仪测定维持需要。1900-1905年Kellner提出了淀粉价或淀粉单位，以每千克淀粉的脂肪量（248克）为一个淀粉价或1000淀粉单位（StE）。近年流行的体系有美国加洲的肉牛净能体系（Lofgren和Garrett，1968），NRC（1978）的产奶净能体系，荷兰A. J. H Vanes(1979)提出的欧洲产奶净能体系以及英国的ARC体系（1965）。 二．饲料有效能的实测

通过消化和代谢试验测定DE和ME已

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窗臂

释 E

§

4

植物茎叶、菜、蔬甘薯、铃薯、马玉

5、患黑斑病的甘薯及其粉浆不能

米和菜饼等 .是生猪的好饲料但是，喂猪。毒猪轻则精神沉郁 .欲睦绝，都 中食便重在采摘、放、工和饲喂过程中 .处呼吸困难，秘；则昏迷痉挛直至死存加若

理不好，造成生猪食物中毒会

亡。可用防治真菌类的药物抢救中毒

1发热腐烂的菜、不能喂猪食猪。、草 后会导致猪亚硝酸盐中毒体困缺氧肌1%亚甲蓝 (蓝 )液 1毫升治疗。美溶

6未用开水浸泡的菜饼不能喂猪。、

而死亡。中毒猪可按每千克体重静注猪食用中毒后不时排尿有时排血尿，对

出现咳嗽，吸困难，血便等症状，呼排严

2高粱嫩叶、米苗叶和鲜亚麻子重的体温下降，至虚脱死亡用 1、玉甚可%灌并不能喂猪。大量食用会发生氢氧酸中单宁洗胃，眼豆浆和鸡蛋清，注射猪毒。对中毒的猪可静注 2%亚硝酸钠强心剂治疗。 O

l升，静注加%硫代硫酸钠 3 0毫再 O毫升治疗。

7喂猪对添加酒糟不能过量糟、酒在饲料中配量最多不能超过 3%,则 0否

病 3发霉变质的玉米、糠和配合饲可能会发生酒精中毒。猪先是精神不、各料不能喂猪食后会发生多种霉菌中安、奋、履踉跄、膜潮红，而丧猪兴步粘继毒，因中毒深浅不同而出现厌食或不失知觉，痹虚脱死亡可静注那加和并麻

食、消