蛋白质与酶工程选择题

实验目录 实验一 尼龙固定化木瓜蛋白酶

实验二 β一半乳糖苷酶菌体细胞的固定化 实验三 酵母蔗糖酶的部分纯化与纯度测定 实验四 酵母蔗糖酶活力测定及酶促动力学研究 实验五 植物体内可溶性蛋白质含量的测定 实验六 酵母蔗糖酶的结晶 实验七 酵母蔗糖酶的化学修饰 实验八 酶法澄清苹果汁加工工艺优化 实验九 原果胶酶的提取与活性测定 实验十 层析柱装填及柱效测定

实验十一温度对酶活力的影响－－最适温度的测定

实验一 尼龙固定化木瓜蛋白酶

一、原理

通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与水不溶性载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。酶的固定化方法有：吸附法、包埋法、共价键结合法、交联法等。固定化酶的特性主要表现在：①稳定，不易破损，可以反复使用多次；②酶不与产品混合，制品较易纯化；③有了固定化酶，工业生产便可实现大批量、连续化、自动化。本实验尼龙固定化木瓜蛋白酶属共价键结合法。尼龙长链中的酰胺键经HCl水解后，产生游离的-NH基，在一定条件下与双功能试剂戊二醛中的一个-CHO基缩合，戊二醛中的另一个-CHO基则与酶中的游离氨基缩合，形成尼龙(载体)-戊二醛(交联剂

实验目录 实验一 尼龙固定化木瓜蛋白酶

实验二 β一半乳糖苷酶菌体细胞的固定化 实验三 酵母蔗糖酶的部分纯化与纯度测定 实验四 酵母蔗糖酶活力测定及酶促动力学研究 实验五 植物体内可溶性蛋白质含量的测定 实验六 酵母蔗糖酶的结晶 实验七 酵母蔗糖酶的化学修饰 实验八 酶法澄清苹果汁加工工艺优化 实验九 原果胶酶的提取与活性测定 实验十 层析柱装填及柱效测定

实验十一温度对酶活力的影响－－最适温度的测定

实验一 尼龙固定化木瓜蛋白酶

一、原理

通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与水不溶性载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶称为固定化酶。酶的固定化方法有：吸附法、包埋法、共价键结合法、交联法等。固定化酶的特性主要表现在：①稳定，不易破损，可以反复使用多次；②酶不与产品混合，制品较易纯化；③有了固定化酶，工业生产便可实现大批量、连续化、自动化。本实验尼龙固定化木瓜蛋白酶属共价键结合法。尼龙长链中的酰胺键经HCl水解后，产生游离的-NH基，在一定条件下与双功能试剂戊二醛中的一个-CHO基缩合，戊二醛中的另一个-CHO基则与酶中的游离氨基缩合，形成尼龙(载体)-戊二醛(交联剂

酶工程选择题整理

1、核酸类酶是（ D ）

A .催化RNA进行水解反应的一类酶 B.催化RNA进行剪接反应的一类酶 C.由RNA组成的一类酶 D.分子中起催化作用的主要成分为RNA的一类酶 2、在凝胶层析的洗脱过程中（ A ）

A.分子质量大的分子最先流出 B.分子质量小的分子最先流出 C.蛋白质分子最先流出 D.盐分子最先流出 3、酶的改性是指通过各种方法（ A ）的技术过程

A.改进酶的催化特性 B.改变酶的催化特性 C.提高酶的催化效率 D.提高酶的稳定性 4、关于良好的两性电解质载体必须符合的要求，下列说法错误的是（ B ） A.在等电点条件下必须有足够的缓冲能力，以便控制好PH梯度

B.分子质量要大，以便在等电点聚焦后易于与被分离的高分子物质分离 C.化学组成应与被分离的样品组分不同，以免干扰样品组分的检测 D.与样品中各组分不会发生化学反应

5、能导致km值增加的酶抑制剂是（ A ）抑制剂 A.竞争性 B.非竞争性 C.反竞争性 6、在酶发酵过程中添加表面活剂可以（ D ）

3 营养学基础知识

能量、蛋白质

能量

能量

?新陈代谢包括物质代谢和能量代谢。物质代谢又包括同化作用和异化作用。

?同化作用：生物体不断地从外界摄入营养物质，经过消化及吸收，转变成自身的成分，称为同化作用。

?异化作用：经过呼吸和氧化，把自身成分分解成二氧化碳、水及尿素，排泄到体外，称为异化作用。

?能量代谢：在同化过程中，以合成自身成分的方式将能量储存起来，在异化过程中分解自身成分释放出能量。

▲能量单位 P25

?能量单位：千卡、焦耳、千焦

?1焦耳为用1牛顿的力使1千克的物质移动1米所消耗的能量； ?1千卡指1000克纯水的温度由15℃上升到16 ℃所需的能量。 ?1千卡=4.184千焦=4184焦耳

?1千焦=0.239千卡

?能量密度：单位重量的食物所含能量的多少 ?能量密度低的食物：蔬菜

?能量密度高的食物：核桃、松子、花生、瓜子、开心果等坚果及动物油、植物油

人体能量的来源

?哪些营养素能提供能量呢？

碳水化合物、脂肪、蛋白质 人体能量的来源-碳水化合物

?人体所需能量约60%是由碳水化合物提供； ?脑组织所需能量的唯一来源也是碳水化合物；

?当血糖太低时，将使大脑活动受到严重影响，轻则反应迟钝，重则昏

班级：________________ 姓名：________________ 学号：________________ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _装_ _ _ _ _订_ _ _ _ _线_ _ _（装订线内禁止填写答案）_ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____ _ _____

一、单项选择题,（在备选答案中只有一个是正确的）(本大题共100小题,100分)

1. 维系蛋白质α-螺旋和β-折叠结构稳定的化学键是

A.氢键 B.离子键 C.二硫键 D.疏水作用 E.肽键

(4)氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部 A.1,2,3 B.1,3 C.2,4 D.4 E.1,2,3,4

11. 在电场中，蛋白质泳动速度取决于

A.蛋白质颗粒的大小 B.蛋白质颗粒的形状 C.带净电荷的多少

D.A+C

E.蛋白质所带电荷的多少，分子量的大小

第一章蛋白质的结构和功能

1．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI为4．6；5．0；5．3；6．7；7．3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是 A．5．0B．4．0 C．6．0 D．7．0 E．8．0

2．下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是

A．血清清蛋白(分子量68 500) B．马肝过氧化物酶(分子量247 500) C．肌红蛋白(分子量16 900) D．牛胰岛素(分子量5 700) E．牛β-乳蛋白(分子量35 000)

3．下列哪一物质不属于生物活性肽

A．胰高血糖素 B．短杆菌素 C．催产素 D．胃泌素 E．血红素

4．下列关于蛋白质结构叙述中，不正确的是 A．一级结构决定二、三级结构 B．二、三级结构决定四级结构 C．三级结构即具有空间构象

D．无规卷曲是在一级结构上形成的 E．α螺旋又称为二级结构

5. 在中性条件下混合氨基酸在溶液中的主要形式是

A 负电荷离子 B．非极性分子 C．正电荷离子 D．疏水分子 E．兼性离子

6．球蛋白分子中哪一组氨基酸之间可形成疏水键

A．Glu-Arg B．Tyr-Asp C．Ser-Thr D．Phe-Trp E．Asp-Glu

7．可以裂解肽链中蛋氨酸

第五章 蛋白质（Protein) 本章主要内容（Content）

蛋白质的一般性质（General aspects)

■ 结构 ■ 蛋白质-水相互作用，影响蛋白质水溶性的因素 ■ 蛋白质-脂的相互作用 蛋白质的变性（Denaturation）

■ 蛋白质变性产生的效应 ■ 导致蛋白质变性的物理因素 ■ 导致蛋白质变性的化学因素

蛋白质的功能性质（Functional Properties） 定义与分类

水化性质 溶解度与粘度、凝胶作用

组织化 热凝结和形成、纤维的形成热塑挤压、面团 乳化性质 乳化能力与乳化稳定性 起泡作用 起泡性与泡沫稳定性 ?蛋白质的营养特性（Nutritional properties） ?蛋白质的开发利用（Utilization）

植物蛋白质和动物蛋白质：浓缩蛋白质与分离蛋白质利用微生物生产蛋白质——单细胞蛋白 第一节 引言（Introducti

■ 蛋白质是构成生物体的基本物质。

病毒，细菌，激素，植物和动物细胞原生 质都是以蛋白质为基

1

础的。

■ 酶是蛋白质 已经发现数以千计的酶。 ■ 蛋白质是由20种氨基酸构成的聚合物 一、蛋白质的分类： （一）根据组成分类

? 简单蛋白质（

蛋白质 (Protein)

组成（Composition）

?生物大分子（Macromolecule） ?构件分子—氨基酸 (Amino acid)

氨基酸 (Amino acids) R—基团

对氨基酸性质影响强烈

?非极性、疏水性。 ?极性、电中性。

?极性、负电荷、碱性。 ?极性、正电荷、酸性。

水溶液中的氨基酸 两性电解质

水溶液中的氨基酸 酸性氨基酸

水溶液中的氨基酸 碱性氨基酸

分类（Classification）

?非极性、疏水性的 ?极性、电中性的

?极性、带负电荷、碱性的 ?极性、带正电荷、酸性的

?植物蛋白与动物蛋白在氨基酸组成上

的差异——

?人体必须氨基酸——

8种氨基酸

?蛋白质的生物学效价（PER） ?转基因植物蛋白

?各种氨基酸配比的蛋白食品

一级结构（Primary structure）

?氨基酸——氨基+羧酸基 ?肽键(Peptide bond)

一级结构（Primary structure）

?线性结构(Linear polymer of amino

acids) ?氨基酸序列（Sequence）——蛋白质分子

?氨基末端（N-terminal） ?羧酸基末端（C-terminal）

?氨基酸残基(Amin

1- 蛋白质化学

名词解释

（一） 两性离子（dipolarion）与两性化合物 （二） 等电点(isoelectric point,pI)与等离子点 （三） 必需氨基酸（essential amino acid） （四） 稀有氨基酸(rare amino acid)

（五） 非蛋白质氨基酸(nonprotein amino acid) （六） 构型(configuration)与构象(conformation) （七） 肽键、肽平面、肽单位、多肽 （八） N末端与C末端

（九） 蛋白质的一级结构(protein primary structure) （十） 蛋白质的二级结构(protein secondary structure) （十一） 蛋白质的α－螺旋结构 （十二） 蛋白质的β－折叠结构 （十三） 结构域(domain)

（十四） 超二级结构(super-secondary structure) （十五） 蛋白质的三级结构(protein tertiary

组内公开课的课件!设计思路是最大的亮点!从干扰素的例子,设计一个个的问题,总结出蛋白质工程的流程图,从而很好的突破的蛋白质工程的原理这个重难点。

回顾： 基因工程的实质：将一种生物的 基因 转移到 另一种生物体内，后者产生它本不 能产的 蛋白质 ，进而表现 出 新的性状 。

组内公开课的课件!设计思路是最大的亮点!从干扰素的例子,设计一个个的问题,总结出蛋白质工程的流程图,从而很好的突破的蛋白质工程的原理这个重难点。

基因工程 的成果

组内公开课的课件!设计思路是最大的亮点!从干扰素的例子,设计一个个的问题,总结出蛋白质工程的流程图,从而很好的突破的蛋白质工程的原理这个重难点。

基因工程的局限性：基因工程在原则上只能生产 自然界已存在的蛋白质。 这些蛋白质的结构和功能符合 特定物种生存的需要，却不一定完 全符合人类生产和生活的需要。

组内公开课的课件!设计思路是最大的亮点!从干扰素的例子,设计一个个的问题,总结出蛋白质工程的流程图,从而很好的突破的蛋白质工程的原理这个重难点。

组内公开课的课件!设计思路是最大的亮点!从干扰素的例子,设计一个个的问题,总结出蛋白质工程的流程图,从而很好的突破的蛋白质工程的原理这个重难点。

一、蛋白质工程崛起的缘由

阅读P26第二