牛乳中酪蛋白的制备

牛乳中酪蛋白的一级结构

Beta-casein

共有209个氨基酸

ORIGIN

1 releelnvpgeiveslssseesitrinkkiekfqseeqqqtedelqdkihpfaqtqslvy 61 pfpgpihnslpqnippltqtpvvvppflqpevmgvskvkeamapkhkempfpkypvepft 121 esqsltltdvenlhlplpllqswmhqphqplpptvmfppqsvlslsqskvlpvpqkavpy 181 pqrdmpiqafllyqepvlgpvrgpfpiiv

Alpha-S1-casein

共有199个氨基酸（把下面黄底标红的删掉）

ORIGIN

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181 dipnpi

上海大学生命科学实验中心

课 程： 学 号：

实 验 预 习 报 告

姓 名： 同组者： 温 度：

日 期：

指导老师： 湿 度：

实验时间：

（一律用A4纸、钢笔书写或打印，不得涂改，经教师签字后方为有效，附在实验报告中一并交。 如无此原始记录或丢失，报告不批示成绩） 实 验 名 称：酪蛋白的制备

1.目的：学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法，并依此加深对等电点概念的印象。

2.原理、仪器设备、材料和试剂：

原理：牛乳中主要含有酪蛋白和乳清蛋白两种蛋白质。其中酪蛋白占了牛乳蛋白质的80%。酪蛋白是白色、无味的物质。不溶于水、乙醇及有机溶剂，但溶于碱溶液。牛乳在pH4.7时酪蛋白等电聚沉后剩余的蛋白质统称乳清蛋白。乳清蛋白不同于酪蛋白，其粒子的水合能力强、分散性高，在乳中呈高分子状态。

? 在处于其等电点时，兼性离子/粒子在溶液中的溶解度降低；如果我们将牛奶的 pH 调到 4.7，就可获得酪蛋白沉淀；下一步，用乙醇、乙醇-乙醚混合物、乙醚来洗涤沉淀物，以去除脂溶性杂质，就可得到较纯的酪蛋白。

试剂：95%乙醇；无水乙醚；乙醇—乙醚混合液 (V/V=1∶1) 。 ? 0.2mol

牛乳蛋白质的 提取与鉴定

一、实验目的： 了解蛋白质的化学性质； 掌握蛋白质的提取方法和鉴定理。

二、实验原理： 牛乳中含丰富的蛋白质(水分87.8%、脂 肪3.5%、蛋白质3.1%、乳糖4.9%、灰分 0.7%、能量29.kg/100kg),其中主要是

酪蛋白。酪蛋白在牛乳中约占总蛋白量的5/6。

1、酪蛋白提取的原理 蛋白质是含羧基和氨基的两性电解质，在某 一pH值溶液中，蛋白质分子所带的正电荷和 负电荷相等，蛋白质以两性离子状态存在， 这时溶液的pH值，称为该蛋白质的等电点 (PI)。 在等电点时，蛋白质所带净电荷为零， 溶解度最小，蛋白质沉淀析出，利用蛋白质 的这个特点可将蛋白质提取出来。 由于粗提出的酪蛋白中还含有脂肪，可 用乙醇和乙醚洗涤除去。

2、酪蛋白鉴定的原理 酪蛋白中含有酪氨酸残基，酪氨酸残基 的R基团为：

含酚羟基，可与米伦试剂反应先生成白色絮状沉淀，继续反应生成红色沉淀。

酪蛋白中还含有含硫氨基酸(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸),在碱性溶液中水解后可与醋酸

铅反应生成黑色的硫化铅。

三、操作步骤

(一)酪蛋白的制备新鲜牛奶、醋酸纳缓冲液各5ml 40℃

分别加热至同样温度

上清液：保留做鉴定(烧杯)(三)2000r/m

预乳化在牛乳中添加DHA的工艺研究

畜牧与饲料科学AnimalHusbandryandFeedScience2009，30（5）:56-57

预乳化在牛乳中添加DHA的工艺研究

郭豫杰1，韩立强1，鲁维飞1，姜

（1.河南农业大学牧医工程学院，河南

郑州

波2，杨国宇1

呼和浩特

450002；2.内蒙古伊利集团技术中心，内蒙古010080）

摘要：DHA作为多元不饱和脂肪酸系列中重要的一种，现已发现其对人类的许多疾病的治疗和预防有着重要的意义。但是由于DHA常温下易于氧化，目前在牛乳中添加DHA所采用的方法和工艺，不仅设备和原料价格昂贵，而且生产工艺要求高，给生产带来了极大的风险，同时也加大了生产成本。试验就是否可以通过预乳化这一简单的工艺将普通的DHA添加到牛乳中进行了研究。

关键词：DHA；预乳化；牛乳；生产工艺；风险；成本中图分类号：TS252.4文献标识码：A文章顺序编号：1672-5190（2009）05-0056-02

AddingDHAintoMilkbyPre-emulsionTechnology

GUOYu-jie1,HANLi-qiang1,LUWei-fei1,JIANGBo2,YANGGuo-yu1

（1.EngineeringCollege

生鲜牛乳中一种新型酸度缓释剂的甄别

摘 要：为了降低牛奶的酸度，掩盖酸败，生鲜牛乳常会被加入一些碱性物质以防止牛奶因酸化而发生的凝集现象，目前已有成熟的检测方法来识别这种行为。但近期发现有种酸度异常乳与掺碱牛奶性质相似，但使用酸度缓释剂常规鉴别方法却无法甄别的问题。本文就此展开研究，并推荐了一种简便、快速检测技术，其精度能满足甄别这种掺假牛奶的需要。

关键词：生鲜牛乳；掺假；酸度缓释剂；柠檬酸钠；检测 项目名称：乳品质量安全检测技术 课题级别：徐州市级 计划类别：农业科技 项目编号：xf11c004 一、生鲜乳掺碱现状背景

近几年来，我国乳品工业得到飞速发展，市场竞争日趋激烈，优质奶源的争夺成为各乳品企业竞争的焦点之一。个别奶农为了短期的经济利益，常常会在交售的生鲜奶中掺假、掺杂，这必然会影响乳品加工企业的产品质量和经济效益，同时也会对消费者的身体健康造成损害。

按照有关规定，生鲜牛乳是指从正常饲养的、无传染病和乳房炎的健康母牛乳房内挤出的常乳，禁止掺水、掺杂、掺入有毒有害物质及其他物质。如何快速准确地检测和判定生鲜乳是否掺假、掺杂，保证乳品的安全、树立消费者放心饮奶的信心，已成为乳品企业发展的关键性问题。

牛乳常见的掺假掺杂有掺水、掺食

生鲜牛乳中一种新型酸度缓释剂的甄别

摘 要：为了降低牛奶的酸度，掩盖酸败，生鲜牛乳常会被加入一些碱性物质以防止牛奶因酸化而发生的凝集现象，目前已有成熟的检测方法来识别这种行为。但近期发现有种酸度异常乳与掺碱牛奶性质相似，但使用酸度缓释剂常规鉴别方法却无法甄别的问题。本文就此展开研究，并推荐了一种简便、快速检测技术，其精度能满足甄别这种掺假牛奶的需要。

关键词：生鲜牛乳；掺假；酸度缓释剂；柠檬酸钠；检测 项目名称：乳品质量安全检测技术 课题级别：徐州市级 计划类别：农业科技 项目编号：xf11c004 一、生鲜乳掺碱现状背景

近几年来，我国乳品工业得到飞速发展，市场竞争日趋激烈，优质奶源的争夺成为各乳品企业竞争的焦点之一。个别奶农为了短期的经济利益，常常会在交售的生鲜奶中掺假、掺杂，这必然会影响乳品加工企业的产品质量和经济效益，同时也会对消费者的身体健康造成损害。

按照有关规定，生鲜牛乳是指从正常饲养的、无传染病和乳房炎的健康母牛乳房内挤出的常乳，禁止掺水、掺杂、掺入有毒有害物质及其他物质。如何快速准确地检测和判定生鲜乳是否掺假、掺杂，保证乳品的安全、树立消费者放心饮奶的信心，已成为乳品企业发展的关键性问题。

牛乳常见的掺假掺杂有掺水、掺食

实验五 酪蛋白的制备及含量测定

一、实验目的

1.学习和掌握紫外吸收法测定蛋白质含量的原理和方法 2.学习分光光度计的原理和操作方法。 二、实验原理

牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调成4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。

蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸残基，它们的结构中具有共轭双链，对紫外光有吸收作用，其最大值在280nm波长处。在此波长附近，蛋白质溶液的光吸收值与其含量（范围是0.1~1.0mg/ml）成正比，因此，280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。但不同种的蛋白质对280nm波长的光吸收强度因芳香性氨基酸残基含量的不同而有差异，因此需用同种蛋白质作对照，结果才可靠。在半定量测定和纯蛋白的定量测定时，可用280nm的光吸收法。

在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。如以波长（λ）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法。

紫外吸收法操

蛋白质提取与制备 蛋白质种类很多，性质上的差异很大，既或是同类蛋白质，因选用材料不同，使用方法差别也很大，且又处于不同的体系中，因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。但多数分离工作中的关键部分基本手段还是共同的，大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中，少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、丙酮及丁醇等有机溶剂中。因此可采用不同溶剂提取、分离及纯化蛋白质和酶。蛋白质与酶在不同溶剂中溶解度的差异，主要取决于蛋白分子中非极性疏水基团与极性亲水基团的比例，其次取决于这些基团的排列和偶极矩。故分子结构性质是不同蛋白质溶解差异的内因。温度、pH、离子强度等是影响蛋白质溶解度的外界条件。提取蛋白质时常根据这些内外因素综合加以利用。将细胞内蛋白质提取出来。并与其它不需要的物质分开。但动物材料中的蛋白质有些可溶性的形式存在于体液（如血浆、消化硫等）中，可以不必经过提取直接进行分离。蛋白质中的角蛋白、胶原及丝蛋白等不溶性蛋白质，只需要适当的溶剂洗去可溶性的伴随物，如脂类、糖类以及其他可溶性蛋白质，最后剩下的就是不溶性蛋白质。这些蛋白质经细胞破碎后，用水、稀盐酸及缓冲液等适当溶剂，将蛋白质溶解出来，再用离心法除去不溶物，即得粗提取液。水适用于白

奶牛隐性乳腺炎是影响奶牛生产的重要疾病之一,通常表现为牛奶体细胞数升高,牛奶中酶的活性升高,以及牛乳中的相应成分均发生变化,从而影响牛奶的品质。因此,有必要了解牛奶体细胞数与牛乳中相关酶的活性变化以及奶牛隐性乳腺炎主要致病菌的相关性,为预防与治疗奶牛隐性乳腺炎提供理论依据。

中国奶牛 0 0年第 3期 21

9 3

牛奶体细胞数及牛乳中酶活性与隐性乳腺炎致病菌之间的相关性屈常林，王怀娜，蓝响(. 1山东益生畜禽疾病研究院，台 2 4 8;.台市开发区农海局，台 2 4 0 )烟 6 6 0 2烟烟 6 0 0中图分类号：8 8 3文献标识码：文章编号：0 4 4 6 (0 0 0— 0 9 0 ￥5 . 2 A 1 0— 2 4 2 1 )3 0 3— 3

摘要：奶牛隐性乳腺炎是影响奶牛生产的重要疾病之一，通常表现为牛奶体细胞数升高，牛奶中酶的活性升高，以及牛乳中的相应成分均发生变化，而影响牛奶的品质。因此，必要了解牛奶体细胞数与牛乳中相关酶的活性变化从有以及奶牛隐性乳腺炎主要致病菌的相关性，为预防与治疗奶牛隐性乳腺炎提供理论依据。关键词：牛乳腺炎；奶体细胞； A s奶牛 N Ga e酶；致病菌

奶牛隐性乳腺炎，明显临床症状 .无隐蔽性强。生

中国组织工程研究 第21卷 第6期 2017–02–28出版

Chinese Journal of Tissue Engineering Research February 28, 2017 Vol.21, No.6

www.CRTER.org

转铁蛋白标记磁性脂质体的制备及体外成像 陈维翠1，刘淑仪1，林爱华2，刘 岘1 (广州中医药大学第二附属医院，1影像科，2药学部，广东省广州市 510120) ·研究原著·

引用本文：陈维翠，刘淑仪，林爱华，刘岘. 转铁蛋白标记磁性脂质体的制备及体外成像[J].中国组织工程研究，2017，21(6):923-927.

DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.06.018 ORCID: 0000-0002-1814-8295(陈维翠)

文章快速阅读：

转铁蛋白标记磁性脂质体的制备 DSPC+chol+PEG2000-DSPE 理化特性 共价结合法 细胞毒性实验 转铁蛋白 转铁蛋白-磁性纳米粒子 细胞结合实验 转铁蛋白-磁性纳米粒子具有转铁蛋白体外成像实验 受体靶向作用、无明显毒性，满足MR 分子探针的所需要求