请说出一种微生物鉴定技术

食品微生物检验

微生物检验常规鉴定技术

（1学时）

适用专业：食品科学与工程

授课班级：食科032、 034

授课教师： 艾乃吐拉

新疆农业大学食品科学学院

2005年8月

第一章

教 学 基 本 信 息

第四章 食品中毒性微生物的检验 第一节 食物中毒概述 第二节 沙门氏菌及其检验 第三节 致病性大肠埃希氏菌及其检验 第四节 变形杆菌类及其检验 第五节 志贺氏菌及其检验 第六节 葡萄球菌及其检验 第七节 链球菌及其检验 第八节 肉毒梭菌及其毒素的检验 第九节 蜡样芽胞杆菌及其检验 第十节 平酸菌及其检验 第十一节 黄曲霉菌及其毒素的检验 第十二节 赭曲霉菌及其毒素的检验 第十三节 镰刀菌及其毒素的检验 第十四节 青霉菌及其毒素的检验 第五章 常见病原微生物的检测 掌握常见的细菌性食 物中毒的各种有毒细菌的 生物学特征及其检测方法

第 四 章

第 五 章

第一节 禽流感病毒 第二节 布鲁氏杆菌 第三节 疯牛病病毒 第四节 炭疽杆菌 第六章 肉与肉制品中的微生物及其检测

掌握几种常见病原微生 物、人畜共患病的检测方 法与原理。 1、 肉与肉制品的微生物的 来源。 2、 、肉与肉制品的微生物 的的检测方法。 1. 鲜乳中的微生物及其检 测方法与原理 2. 乳制品中

食品微生物检验

微生物检验常规鉴定技术

（1学时）

适用专业：食品科学与工程

授课班级：食科032、 034

授课教师： 艾乃吐拉

新疆农业大学食品科学学院

2005年8月

第一章

教 学 基 本 信 息

第四章 食品中毒性微生物的检验 第一节 食物中毒概述 第二节 沙门氏菌及其检验 第三节 致病性大肠埃希氏菌及其检验 第四节 变形杆菌类及其检验 第五节 志贺氏菌及其检验 第六节 葡萄球菌及其检验 第七节 链球菌及其检验 第八节 肉毒梭菌及其毒素的检验 第九节 蜡样芽胞杆菌及其检验 第十节 平酸菌及其检验 第十一节 黄曲霉菌及其毒素的检验 第十二节 赭曲霉菌及其毒素的检验 第十三节 镰刀菌及其毒素的检验 第十四节 青霉菌及其毒素的检验 第五章 常见病原微生物的检测 掌握常见的细菌性食 物中毒的各种有毒细菌的 生物学特征及其检测方法

第 四 章

第 五 章

第一节 禽流感病毒 第二节 布鲁氏杆菌 第三节 疯牛病病毒 第四节 炭疽杆菌 第六章 肉与肉制品中的微生物及其检测

掌握几种常见病原微生 物、人畜共患病的检测方 法与原理。 1、 肉与肉制品的微生物的 来源。 2、 、肉与肉制品的微生物 的的检测方法。 1. 鲜乳中的微生物及其检 测方法与原理 2. 乳制品中

土壤微生物的分离与鉴定

组员：阚能涛，户红通，郭晓辉，耿静，孔桂慧，兰欣玉 关键词：土壤微生物，分离鉴定，生理生化， 实验摘要：

土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生物，它们对自然界物质的转化和循环起着极为重要的作用，对农业生产和环境保护有着不可忽视的影响。根际微生物与植物的关系特别密切，不同的土壤和植物对根际微生物产生显著影响，而不同的根际微生物由于其生理活性和代谢产物的不同，也将对土壤肥力和植物营养产生积极或消极的作用。土壤微生物不仅对土壤的肥力和土壤营养元素的转化起着重要作用，而且对于进入土壤中的农药及其他有机污染物的自净、有毒金属及其化合物在土壤环境中的迁移转化等都起着极为重要的作用。

土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10 cm～30 cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌数减少。

土壤中微生物以细菌数量最多，为几百万个/克土至几亿个/克土，有各种生理类群，营养类型多属异养型，鉴别染色多为革兰氏阳性。放线菌含量为几万个/克土至几百万个/克土，但其生物量不比细菌低，因为菌丝体积较大。土壤中真菌含量为几千个/克土至几十万个/克

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

微生物采油技术

一．概述

稠油微生物多轮次吞吐技术主要是针对目前稠油高轮次吞吐后期、特别是不适宜蒸汽驱的区块和油井以及高轮次吞吐、注汽效果差、高含水、低产能的油井，研究利用微生物采油技术，为稠油开采寻找一种降低开采成本、提高油井产量、提高生产率的采油工艺方法。

二．原理

微生物采油是通过引入或刺激在油藏中能够存活的微生物来提高原油采收率的技术。它是依赖包括微生物生长、运移、新陈代谢等复杂过程在内的一个生物学和物理化学的综合作用，是靠多种的机理将原油采出的，因此它具有一个多重的作用效果，其采油原理已经在采油过程中得到证实。但同时，它又具有较强的选择性和针对性，要解决不同区块原油的开采问题，就要针对不同的区块的地质特性、油品特性，有针对性地选择菌种，并进行包括菌种的油藏生态特性在内的生物学评价。该工艺以其费用低、工序简单、操作方便而成为一种新的提高采收率的方法。

通过菌种的筛选，筛选出了三株菌种。在此基础上对此进行反反复复的驯化、富集、复壮，使其达到生长、代谢稳定、活性高在一定程度上解决了以往菌种不稳定的弱点，在稠油微生物菌种的筛选和研究方面取得了突破，并非常适合在所选油藏条件下生存。

同时，通过室内对菌种特性的研究，

微生物鉴定中的生理生化试验

一．实验目的

1. 证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不

同的酶系统。

2. 掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。

3. 了解糖发酵的原理，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 4. 了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。

二．实验原理

由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。具体的原理如下：

1. 大分子水解试验

微生物对大分子物质如淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后，才能被微生物利用。胞外酶主要为水解酶，通过加水裂解大分子物质为较小化合物，使其能被运输至细胞内。如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖，脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸，蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等，这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实。如淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘液测定时，不再产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，使

微生物基因分型鉴定系统

背景：

分子生物学技术在近几年的迅速发展和普及，使得微生物学鉴定得以摆脱传统生化鉴定方法的局限，跨入新的历史进程。较上世纪已经出现的生化鉴定法，基于分子生物学技术的微生物鉴定系统的优越性主要表现为：可鉴定的种属范围均大大扩展；可靠性和灵敏度显著提升；整体检测时间降低。ThermoFisher 公司的MicroSEQ?自动微生物基因分型鉴定系统分型系统是目前技术最为成熟、应用最为广泛的基因分析鉴定系统，现已广泛应用在药品、食品及工业微生物的鉴定分析上，以下内容将对这一系统做更为全面的介绍。

2015版药典中指出，测序是微生物鉴定的最终解释方法

1.在药品微生物鉴定领域的应用

2008年度全球排名前25位的制药集团中，有22家集团已经将ThermoFisher公司的MicmSEQ?自动微生物基因分析鉴定系统用于其日常微生物检测中。

美国FDA在对生产无菌制剂和生物药品的指导性纲要《工业指南用无菌工艺生产的无菌产品一现行GMP》中更是明确提出“快速遗传类型测定方法被建议用于鉴别目的，因为这种方法已经证明比生物化学方法和表型技术更精确和准确。”除美国之外，澳大利亚、日本及欧盟的药典中也已明确推荐使用基因分析的方法用于微生物的鉴定。

2.微生

微生物学假期综合教学实习

实习时间： 2013年 6 月 25 日 开始

实习班级： 应技1101-1102 人

生命科学技术学院微生物教研室

微生物教学实习基本实验流程

第 配制牛肉膏固体培养基、3倍和单倍乳糖发酵液， 一准备无菌水及各种器皿、器材 天

）

灭菌

采集样品

（

第按要求做10倍梯度稀释

二

天

）配制伊红美测样品的细菌总数： 乳糖培养基初发酵试验：

样品的稀释液涂布按实验要求将稀释液接入兰固体和E.C液 牛肉膏平板 3倍、单倍乳糖发酵培养液 体培养基

37OC培养 37OC培养 灭菌

数平板上菌落看乳酸发酵 倒伊红美兰平板 （数，计算样品的细结果，查MPN表 第菌总数 三 检验乳酸发酵管中产酸产气的样品天 ）

伊红美兰平板划线 接E.C管

37OC培养 44.5OC培养

（挑有金属光泽、看结果，鉴定是 第

无光泽的菌落 否有粪大肠杆菌 四

天接单倍乳糖发酵管 革兰氏染色 ）

37OC培养

看复发酵结果 （ 第 综合本实验的六项结果（细菌总数、乳糖管初发酵（MPN）、伊红美兰平板鉴定、 五E.C平板鉴定、革兰氏染色、乳糖复发酵），写出实验报告 天清洗器材，并做好室内清洁。 ） （

微生物学综合教学实习

学习目