过氧化物酶活性的测定

过氧化物酶活性的测定POD

一、原理：

过氧化物酶催化过氧化氢氧化酚类的反应，产物为醌类化合物，此化合物进一步缩合或与其他分子缩合，产生颜色较深的化合物。本实验以邻甲氧基苯酚（即愈创木酚）为过氧化物酶的底物，在此酶存在下，H2O2可将邻甲氧基苯酚氧化成红棕色的4-邻甲氧基苯酚红棕色的物质可用分光光度计在470nm处测定其消光值，即可求出该酶的活性。，

二、实验准备

仪器：分光光度计、离心机、秒表、天平、研钵、磁力搅拌器 试剂：

愈创木酚、30%H2O2、0.2mol/L磷酸缓冲液（7.8）、0.1mol/L磷酸缓冲溶液（PH6.0，见附录） 反应混合液[100mmol/L磷酸缓冲溶液（PH6.0）50ml，加入愈创木酚28μl，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解、待溶液冷却后，加入（待溶液冷却后再加入，否则引起分解）30%H2O2 19μl，混合均匀，保存于冰箱中。]

三、步骤：

1、粗酶液的提取：称取植物材料0.4-0.5g，加磷酸缓冲液（7.8）5ml（分几次加入），于研钵中研磨成匀浆，以8000r/min离心10min，收集上清液于冷处（冰箱4度保存）。

2、酶活性的测定：一个试管入反应混合液3ml，磷酸缓冲液（7.8） 1ml，

髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)又称过氧化物酶，是一种重要的含铁溶酶体，存在于髓系细胞(主要是中性粒细胞和单核细胞)的嗜苯胺蓝颗粒中，是髓细胞的特异性标志，随着对MPO研究的深入，人们发现MPO基因多态性导致个体对一些疾病易感性的差异，与人类多种疾病的发生、发展密切相关，因此越来越受到国内外学者的重视。 髓过氧化物酶MPO研究

1.MPO的结构髓过氧化物酶(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶，是血红素过氧化物酶超家族成员之一。MPO是I相代谢酶。每个酶分子有两个铁素基团，顺磁共振波谱表明血红素中的铁是在甲酰基血红素部分。MPO的合成是粒细胞进入循环之前在骨髓内合成并贮存于嗜天青颗粒内，外界刺激可导致中性粒细胞聚集，释放髓过氧化物酶(MPO)。在成熟的粒细胞中，MPO是含量最丰富的糖蛋白，约占外周血多形核中性粒细胞(PMNs)内总蛋白质含量的5%，血液中95%的MPO来源于PMNs。MPO的相对分子质量为150×103，是由2个亚单位聚合而成的二聚体，每个亚单位又由一条重链(α链,相对分子质量约60×103)和一条轻链(β链,相对分子质量约15×103)所构成。2个亚

愈创木酚法测定过氧化物酶活性

一、实验目的

过氧化物酶它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活性可以反映某一时期植物体内代谢的变化。通过本实验了解过氧化物酶的作用，掌握愈创木酚法测定过氧化物酶。 二、实验原理

在过氧化物酶（POD）催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470 nm处有最大光吸收值，故可通过测470 nm 下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性。 三、实验材料 马铃薯块茎。 四、设备与试剂

分光光度计，离心机，研钵，容量瓶，量筒，试管，吸管。

0.05 mol·L的磷酸缓冲液（pH 5.5）；0.05 mol·L愈创木酚溶液；2％ H2O2；20％三氯乙酸 五、实验步骤 （一）酶液的制备

取1.0～5.0 g 洗净去皮的马铃薯块茎，切碎，放入研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆。将匀浆液全部转入离心管中，于3000×g离心10 min，上清液转入25 mL容量瓶中。沉淀用5 mL 磷酸缓冲液再提取两次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，低温下保存备用。 （二）过氧化物酶活性测定

酶活性测定的反应体系：依次加入2.9 mL 0.05 mol·L-1磷酸缓冲液；1.0 mL 2％ H

谷胱甘肽过氧化物酶在致癌作用的不同阶段

关键词：谷胱甘肽过氧化物酶 癌症发展 环加氧酶 氢过氧化物 转移 细胞凋亡 摘要：癌症细胞产生高量的活性氧（ROS）和逃避凋亡减少。过氧化物支持增殖，侵袭，

迁移和血管生成，但在较高的水平，诱导细胞凋亡，从而致癌和抗癌。因此，谷胱甘肽过氧化物酶（GPxs）调节氢过氧化物水平可能有双重角色。 GPx1，显然是抗氧化酶，是在许多癌症细胞中下调减少。其主要作用是由ROS介导的DNA损伤引发癌症的预防减少。 GPx2在癌细胞中上调。GPx1 / GPx2双基因敲除小鼠小肠结肠炎和癌症发展。然而,GPx2击倒的癌细胞在体外和体内生长得更好，可能反映了GPx2在肠粘膜动态平衡的生理作用。GPx2在癌细胞中上调抵消COX-2表达和PGE2生产，这也解释了其可能抑制培养的肿瘤细胞迁移和侵袭减少。 GPX3的过度表达抑制了肿瘤生长和转移。 GPx4在癌组织中减少。 GPx4过度表达的癌细胞有较低的COX-2活性及由此衍生的肿瘤比对照组小，不发生转移。总的来说，GPxs通过消除氢过氧化物防止癌症的发生。 GPx4抑制但是GPx2支持已建立的肿瘤的生长。不但转移，而且细胞凋亡都被所有GPxs抑制。 GPX-介导的环氧合酶/液氧

土壤酶活性测定方法

土壤脲酶的测定方法（苯酚钠—次氯酸钠比色法）

一、原理

脲酶存在于大多数细菌、真菌和高等植物里。它是一种酰胺酶作用是极为专

性的，它仅能水解尿素，水解的最终产物是氨和二氧化碳、水。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效磷含量呈正相关。根际土壤脲酶活性较高，中性土壤脲酶活性大于碱性土壤。人们常用土壤脲酶活性表征土壤的氮素状况。

土壤中脲酶活性的测定是以脲素为基质经酶促反应后测定生成的氨量，也可以通过测定未水解的尿素量来求得。本方法以尿素为基质，根据酶促产物氨与苯酚-次氯酸钠作用生成蓝色的靛酚，来分析脲酶活性。 二、试剂 1）甲苯

2）10%尿素：称取10g尿素，用水溶至100ml。

3）PH6.7柠檬酸盐缓冲液：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾（KOH）溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/LNaOH将PH调至6.7，用水稀释定容至1000ml。 4）苯酚钠溶液（1.35mol/L）：62.5g苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，用乙醇稀释至100ml（A液），存于冰箱中；27gNaOH溶于100ml水（B液）。将A、B溶液保存在冰箱中。使用前将A液、B液各20ml混合，用蒸馏水稀释至

过氧化物酶体功能每日一练(2015.11.13)

一、单项选择题（每小题均有1个正确答案，请从每小题的备选答案中选出你认为正确的答案，在答题卡相应位置上用2B铅笔填涂相应答案代码。每小题所有答案选择正确的得分；不答、错答、漏答均 不得分。答案写在试题卷上无效。） 1、Ⅰ期缝合的伤口术后换药时间为( ) A.2～3天换药1次 B.2～3小时换药1次 C.每日或隔日换药1次 D.每日换药1次或数次 E.每周换药1次

2、关于暴露疗法对病室要求正确的说法是( )

A.病室温度以28～32℃ 为宜，相对湿度70%左右 B.病室温度以28～32℃ 宜，相对湿度40%左右 C.病室温度以18～22℃ 为宜，相对湿度40%左右 D.病室温度以18～32℃ 为宜，相对湿度30%左右 E.病室温度以18～22℃ 为宜，相对湿度70%左右 3、烧伤时，伤员现场急救，下列哪项措施比较得当( ) A.大量喝开水 B.使用冬眠合剂 C.推注50%葡萄糖 D.服含盐饮料 E.肌注止痛剂

4、上肢出血应用止血带时不应捆扎在( ) A.上臂上1/3 B.上臂中上1/3 C.上臂中1/3 D.上臂

中国药科大学本科生毕业论文（设计)

中国药科大学

本 科 毕 业 论 文

论文题目 几种辣根过氧化物酶（HRP）的底物的合成 英文题目 synthesis of several substrate for

horseradish peroxidase

专 业 制药工程 院 部 工学院 学 号 1143206 姓 名 王震 指导教师 孙海鹰

课 题

完成场所 中国药科大学江宁校区

论文工作时间： 2015 年 3 月 至 2015 年 6 月

中国药科大学本科生毕业论文（设计)

几种辣根过氧化物酶（HRP）的底物的合成

目录

摘要 ..................................................... 1 前言 ..................................................... 2 第一章 辣根过氧化物酶底物的发展 ......

大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒使用说

明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T 0.3ng/ml - 9ng/ml 使用目的：

本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中过氧化物酶体增殖物激活受体α (PPAR-α)含量。 实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α) 水平。用纯化的大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)抗体包被微孔板，制成固相 抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)，再与HRP 标记的过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合 物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作 用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α) 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠

过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)浓

行业分析报告

2021年过氧化物行业分析报告

2021年过氧化物行业分析报告

2021年1月

行业分析报告

2021年过氧化物行业分析报告

目录

2行业概况及市场分析........................................................................................................................

2.1中国行业市场驱动因素分析...............................................................................................

2.2行业结构分析........................................................................................................................

2.3行业PEST分析...................................................................................

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析过氧化物酶同工酶

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析

过氧化物酶同工酶

植物098 原硕 0901080808

摘要：本实验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术，分离小麦幼苗过氧化

物酶同工酶，根据酶的生化反映，通过染色方法显示出酶的不同区带，以鉴定小麦幼苗过氧化物酶同工酶。通过本实验，主要掌握电泳技术的原理、方法、设计、装臵、凝胶配臵等问题，熟悉所有的操作过程，另外，对同工酶有一个感性的认识。

关键字：聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳，同工酶

一、 研究背景及目的：

同工酶是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。它们是DNA编码的遗传信息表达的结果。最近的研究表明，同工酶与生物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等有一定关系。因此，测定同工酶在理论上和实践上都有重要的意义。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定同工酶，方法简便、灵敏度高、重现性强，测定结果便于观察、记录和保存。

过氧化物是植物体内普遍存在的、活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有关系。在植物生长发育过程中它的活性不断变化。因此，测定这种酶的活性或其同工酶的变化情况，可以反映某一种时期植物体内代谢的变化。

本实验采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术，分