磷脂酶C

火腿中肌肉磷脂酶的纯化其性质研究

国外一些研究者认为，在干腌火腿生产过程中，中性脂肪变化很小，而磷脂是脂肪水解的主要底物。我们对发酵干火腿加工过程中的脂肪水解状况进行了分析，也证实了这一观点，因此磷脂水解酶成为了研究干腌火腿脂肪水解机理的关键。

本研究利用阴、阳离子交换、亲和层析等多种纯化手段相结合获得了2种电泳纯的磷脂水解酶。由于某些脂酶也具有水解磷脂的能力，我们首先需要弄清楚本研究中以磷脂为底物获得的磷脂水解酶是属于脂酶还是磷脂酶？如果是磷脂酶，和已从其它组织中纯化出来的磷脂酶有什么关系？另外，腌制剂、加工工艺条件等对该酶活有什么影响？为此，本研究对已纯化的磷脂水解酶的基本性质进行了鉴定，旨在为发酵干火腿生产过程中与脂肪水解氧化等有关的风味化合物的产生机理及其控制提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 磷脂水解酶的分离

按汪家政等（2002）方法进行。 1.2 磷脂水解酶活性的测定

用同位素标记底物法对纯化的酶活进行测定 具体操作流程：

0.2 ml 粗酶液 + 5 μl磷脂底物

反应（37℃, 20分钟）

冰浴并向反应体系中加入2 ml甲苯、三氯甲烷和甲醇的混合物

（1:0.5:1.2

具有抗炎、抗过敏活性磷脂酶

抑制剂的研究进展*

王 寅 朱再明

(辽宁师范大学化学系 大连 116029)

刘 彦

(大连医科大学生化教研室 大连 116027)

摘 要 磷脂酶参与细胞跨膜信息传递，磷脂酶A2还是机体炎症、过敏介质产生的关键酶。因此，磷脂酶抑制剂的合成研究对研究细胞表达某种功能的信息传递机制及与磷脂酶A2激活相关的疾病治疗机制和药物研究具有重要意义。本文主要综述了近期有关磷脂酶A2抑制剂的合成、结构、抑效性能、构效关系及应用前景等,对磷脂酶C和磷脂酶D的抑制剂作了简要介绍。

关键词 磷脂酶A2 磷脂酶C 磷脂酶D 磷脂酶抑制剂

Recent Advances in Phospholipase Inhibitors

Wang Yin Zhu Zaiming

(Department of Chemistry, Liaoning Normal University, Dalian 116029,

China) Liu Yan

（Department of Biochemistry， Dalian Medical University, Dalian 116027,

China) Abstract Phospholipase A2,

磷脂化学与提取

一、磷脂的组成与结构

磷脂可分为两类：鞘磷脂（神经磷脂）和甘油醇磷脂

鞘磷脂也称神经磷脂，它是神经酰胺与磷酸直接相连，然后再与胆碱或胆胺相连而成的脂。甘油醇磷脂是由甘油与磷酸反应生成的脂。

磷脂典型的化学结构式为：

甘油磷脂

甘油醇磷脂主要有以下几种：

卵磷脂（磷脂酰胆碱，phosphatidylcholines，PC） 脑磷脂（磷脂酰乙醇胺，phosphatidylethanolamines，PE） 肌醇磷脂(磷脂酰肌醇,phosphatidylinostols，PI) 丝氨酸磷脂(磷脂酰丝氨酸，phosphatidylserines,PS) 此外还有磷脂酰甘油、二磷脂酰甘油、缩醛磷脂和溶血磷脂等。

1、卵磷脂 卵磷脂结构式为：

卵磷脂的分子结构特点是一个脂酰基被磷酸胆碱基所取代，而磷

酸胆碱所连接的碳位臵不同又产生α、β两种异构体，其磷酸胆碱基连接在甘油基的第3碳位上称α-型，连接在第2碳位上则为β-型。自然界存在的卵磷脂为L-α-卵磷脂，即R2-CO基处在甘油碳链的左边为L-型。卵磷脂分子中不同碳位上所连接的脂肪酸也不同，α碳位上连接的几乎都是饱和脂肪酸，而β碳位上连接的通常为亚油酸、亚麻酸和花生四烯酸等不

甘油磷脂(phosphoglyceride)的代谢

磷脂是一类含有磷酸的脂类，机体中主要含有两大类磷脂，由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂(phosphoglyceride)；由神经鞘氨醇构成的磷脂，称为鞘磷脂(sphingolipid)。其结构特点是：具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobic tail)。在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面，而疏水尾位于膜内侧（如下图）。（一）分类及生理功能 甘油磷脂是机体含量最多的一类磷脂，它除了构成生物膜外，还是胆汁和膜表面活性物质等的成分之一，并参与细胞膜对蛋白质的识别和信号传导。甘油磷脂基本结构是磷脂酸和与磷酸相连的取代基团(X)；如下图所示：甘油磷脂由于取代基团不同又可以分为许多类，其中重要的有：胆碱(choline) + 磷脂酸 ——→ 磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)又称卵磷脂

乙醇胺(ethanolamine) + 磷脂酸 ——→磷

脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)又称脑磷脂

丝氨酸(serine) + 磷脂酸 ——→ 磷脂酰丝氨酸

甘油(glycerol)

磷脂的相变温度 发布时间：2012-05-28 14:04 点击次数： 磷脂的相变温度 磷脂相变温度是组成磷脂的酰基链由晶态向液态过渡时的温度。处于相变温度时，酰基链活动性增强，脂质体膜通透性提高。磷脂的相变温度对脂质体膜稳定性有重要参考意义。在制备脂质体时，应充分考虑脂质体的保存条件、体内过程、药物释放行为等，选择具有适宜相变温度的磷脂。 艾韦特磷脂相变温度(部分)： 名称 相变温度名称 （℃） 蛋黄甘油磷脂PGE MSPC PMPC PSPC SMPC SPPC SOPC DMPG-Na DSPG-Na POPG-Na 相变温度（℃） 约-8 40 27 49 30 44 6 23 55 -2 520 天然磷脂 蛋黄卵磷脂PC-98T 约-8 胆碱磷脂（PC） DLPC -1 DMPC 23 DPPC二棕榈酰磷脂酰胆碱 41 DSPC 55 DOPC -20 MPPC 35 甘油磷脂（PG） DLPG-Na -3 DPPG-Na二棕榈酰磷脂酰甘油，钠 41 DOPG-Na -18 乙醇胺磷脂（PE） DMPE 50 DSPE二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 74 POPE 25 丝氨酸磷脂（PS） DMPS-Na 35 DSPS-Na 68 PO

表５　　　　　　　方差分析结果

方差来源乙醇浓度溶剂用量提取时间总和

平方和（ｓ）１．２８０．０６１．６６３

自由度（ｆ）

２２２６

均方（ｓ／ｆ）０．６４２１．３３０．０３１０．８３２７．６７

取方法是醇提法。此法的提取工艺简单，条件容易控

Ｆ临界值

Ｆ０．０５（２，２）＝１９Ｆ０．０１（２，２）＝９９Ｆ０．１（２，２）＝９Ｆ０．２（２，２）＝４

制，提取率高，提取剂乙醇易除净，所以可将此工艺应用于工业化生产，所生产的提取液可浓缩成膏状物，也可直接将其添加到保健饮料、糖果、绿豆羹、饼干或口服液中，作为保健食品、营养食品和功能食品的原料，应用前景良好。

比较了水提方法与醇提法，醇提法效果较好。为全面考查醇提法影响因素，设计了溶媒量、溶媒浓度和提取次数的３因素３水平正交试验，结果见表４。

试验结果及方差分析表明：乙醇回流法从多穗柯中提取总黄酮类化合物的最佳条件Ａ２Ｂ３Ｃ２即用２５倍量８０％乙醇回流２ｈ，影响因素的大小依次为：乙醇浓度、提取时间、溶媒量；此法提取的多穗柯中总黄酮类物质含量为１２．５９％。３

结　　　　论

参考文献：［１］［２］［３］［４］［５］［６］［７］

中科院植物研究所．中国高等植物图鉴（第一册）［Ｍ］．科学出版社，１９７２．

廖代富，等．多穗柯叶的综合利

年产10000吨大豆浓缩磷脂 及改性大豆浓缩磷脂项目建议书

一：项目简介

本项目年产10000吨大豆浓缩磷脂及改性大豆浓缩磷脂生产线项目是以大豆油脱胶油脚为原料，经过高真空连续浓缩脱水及化学改性工艺生产大豆浓缩磷脂系列产品。

大豆磷脂是由大豆油脚经真空脱水、浓缩及改性等生产工艺提炼而成的纯天然产品。改性大豆磷脂是以大豆磷脂为原料，采用新工艺、新技术，经科学加工精制而成的磷脂。改性后的大豆磷脂是一种天然的表面活性剂，它不仅具有乳化、分散、脱模、降低粘度、保持水分、同蛋白质及淀粉相结合等各种功能，还含有丰富的不饱和脂肪酸和胆碱等营养成分，因此是一种天然的高营养强化剂，其用途十分广泛，不仅应用于食品饲料工业上，还广泛应用于药品、保健品、化妆品、涂料工业、乳化炸药、农药乳液及精细化工助剂等领域上。其原料油脚主要来源于农副产品加工下脚料，是植物油厂炼油脱胶时产生的油脚，来源很广。在生产过程中对环境无污染，符合国家产业政策，对环境保护有重要作用，属于环保、农业产业化、循环经济发展的好项目。对促进当地经济发展具有现实意义，其社会效益，经济效益都非常可观。 二：市场分析 （一）、产品前景

大豆浓缩磷脂是大豆油精炼的副产品，其分子中含有磷脂酰胆碱

的复合酯，既有

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG