植物细胞悬浮培养的类型

毕业论文(设计)

题 目 姓 名 专 业 指导教师

浅谈植物细胞的悬浮培养技术 姚虎 学号 014010210118 生物工程（070404） 王大红 职称 讲师 中国·武汉 二○一二年四月

目录

摘 要 ........................................................................ 3 关键词 ....................................................................... 3 Abstract ....................................................................... 3 Key words ..................................................................... 3 前言 ......................................................................... 4 1.细胞悬浮培养的定义 .........

植物细胞培养技术的应用及前景

09生物科学 叶跃磷

摘要：植物细胞培养技术是应用生物工程研究成果，在细胞水

平上生产植物生物制品的技术。细胞工程是生物技术的四大领域之一 ,随着社会的不断进步和科学的不断发展,细胞工程在生命科学研究中起着不可估量的作用。植物细胞培养技术作为细胞工程中的重要技术现已广泛应用于生命科学的各个研究领域,是生物技术最新发展的重要组成部分。本文着重介绍了植物细胞培养技术的应用及其发展前景。

关键词：植物细胞培养、次生代谢产物、技术、生物转化、植物、人工种子、植物细胞培养、应用

前言：植物细胞培养技术作为细胞工程中的重要技术现已广泛应用于生命科学的各个研究领域,是生物技术最新发展的重要组成部分。植物细胞离体培养包括细胞、组织和细胞融合。[2]植物细胞的大量培养是利用植物细胞体系、通过现代生物工程手段,进行工业规模生产,以获得各种产品的一门新兴的跨学科技术。十九世纪九十年代, Haberlandt首先进行了植物细胞的培养; 1939 年, White, Nobecourt, Gau theret分别发表论文, 提出非分化的植物细胞可以无限期地进行培养, 为植物细胞培养的发展奠定了基础 。1942 年,Gau the

植物细胞培养技术的应用及前景

09生物科学 叶跃磷

摘要：植物细胞培养技术是应用生物工程研究成果，在细胞水

平上生产植物生物制品的技术。细胞工程是生物技术的四大领域之一 ,随着社会的不断进步和科学的不断发展,细胞工程在生命科学研究中起着不可估量的作用。植物细胞培养技术作为细胞工程中的重要技术现已广泛应用于生命科学的各个研究领域,是生物技术最新发展的重要组成部分。本文着重介绍了植物细胞培养技术的应用及其发展前景。

关键词：植物细胞培养、次生代谢产物、技术、生物转化、植物、人工种子、植物细胞培养、应用

前言：植物细胞培养技术作为细胞工程中的重要技术现已广泛应用于生命科学的各个研究领域,是生物技术最新发展的重要组成部分。植物细胞离体培养包括细胞、组织和细胞融合。[2]植物细胞的大量培养是利用植物细胞体系、通过现代生物工程手段,进行工业规模生产,以获得各种产品的一门新兴的跨学科技术。十九世纪九十年代, Haberlandt首先进行了植物细胞的培养; 1939 年, White, Nobecourt, Gau theret分别发表论文, 提出非分化的植物细胞可以无限期地进行培养, 为植物细胞培养的发展奠定了基础 。1942 年,Gau the

目的：利用悬浮球培养联合不同辐射模式,高度纯化人乳腺癌MCF-7细胞中辐射抵抗的CD44+/CD24-/low乳腺癌干细胞。方法：利用含细胞因子的无血清培养体系培养MCF-7细胞,将培养形成的球囊细胞连续传代,选择第2代球囊细胞分别行2Gy×4次及单次8Gy照射。利用滤网收集存活细胞生成的微球囊,流式细胞仪检测纯化后微球囊中CD44+/CD24-/low细胞的含量,克隆形成检测及单击多靶模型曲线拟合

本章主要内容

? 商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要设备 ? 培养基及其配制 ? 外植体的选择与培养 ? 试管苗的驯化与移载

第一节 商业性组织培养实验室和小工厂

的设计与主要设备

? 培养皿的清洗；

? 培养基的配制、分装和高压灭菌； ? 无菌操作——材料的表面灭菌和接种； ? 将培养物放到培养室培养；

? 试管苗的驯化、移栽和初期管理。

(一)、洗涤室(cleaning room)

? 洗涤室用于完成玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。 ? 室内配备：

? 大型水槽，最好是白瓷水槽。为防止碰坏玻璃器皿，可铺垫橡胶。上下水道要畅通。 ? 备有塑料筐，用于运输培养器皿。

? 备有干燥架，用于放置干燥涮净的培养器皿。

(二)、准备室(repairing room)

? 完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。准备室要求明亮、通风。 ? 如果房间较多，可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。洗涤室专门负责试管苗出瓶与

培养器皿的清洗工作；配置室则负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。

(三)、缓冲室

? 进入无菌室前要在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋，戴上口罩。 ? 应当在此室内安装灭菌用的紫外灯。控制无菌室及培养室的配电

动物细胞培养是生产许多临床和医学上重要生物制品的一种必不可少的方法,这些生物制品包括疫苗、干扰素、激素、生长因子和单克隆抗体等,既推动了生物学和医学的发展,又带来了巨大的社会效益和经济效益。然而,体外大规模繁殖动物细胞要比细菌繁殖困难得多,如细菌、酵母菌的细胞壁厚,能耐受搅拌,不易破碎,营养要求低,生长条件易于控制,增殖周期短,产品的产量也高。

生物

显微结构和亚显微结构 显微结构：光学显微镜下观察到的细胞结构。 显微结构：光学显微镜下观察到的细胞结构。 亚显微结构：电子显微镜下观察到的细胞结构。 亚显微结构：电子显微镜下观察到的细胞结构。

生物

学习目标： 学习目标： 区别原核细胞和真核细胞 概述细胞膜的结构与功能

生物

按照结构的复杂程度和进化顺序， 按照结构的复杂程度和进化顺序， 细胞可分为： 细胞可分为：原核细胞 真核细胞

生物

原核细胞细菌、 1、原核细胞是构成细菌、蓝藻和放线 原核细胞是构成细菌 蓝藻和 等原核生物的细胞。 菌等原核生物的细胞。内部结构比较简 单 2、主要特点：拟核 主要特点： 结构模式图

生物

原核细胞结构模式图细胞壁 细胞膜 DNA

鞭毛 纤毛 核糖体

生物

真核细胞1、真核细胞是构成真核生物的细胞， 、真核细胞是构成真核生物的细胞， 内部结构比较复杂 2、真核细胞不仅有明显的细胞核，而且 、真核细胞不仅有明显的细胞核， 细胞核 形成了许多以 许多以膜 还形成了许多以膜为基础的具有特定功 能的结构 结构。 能的结构。 3、除原核生物等外，其他细胞生物都 、除原核生物等外， 是由真核细胞构成的 结构模式图

生物

真核细胞结构模式图

注：植物细胞 还具有 细胞壁

细胞膜

细胞核 细胞

昆虫细胞培养及其应用进展

摘 要: 随着生命科学的迅速发展, 细胞工程愈来愈受到人们的重视。以昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值, 已经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。本文综述了有关昆虫细胞培养的研究进展, 包括昆虫细胞培养基研究开发, 昆虫细胞系的建立和组织培养, 利用生物反应器大规模培养昆虫细胞, 昆虫细胞2杆状病毒表达系统,构建基因工程细胞系及其稳定性表达, 以及昆虫细胞培养的应用前景和研究展望。 关键词: 昆虫细胞系; 昆虫细胞培养; 基因表达;培养条件

昆虫的组织培养最早始于 1915 年, 直到1962 年 Grace 才成功建立了世界上第一个细胞系, 此后昆虫细胞培养在世界范围内广泛开展, 不断有新细胞系建立的报道。现在, 昆虫细胞培养已在细胞生物学、分子生物学、昆虫学、病毒学、生物化学、遗传学等领域的研究工作中发挥着重要的作用。 1 昆虫细胞培养基

昆虫细胞培养基的发展经历了天然培养基、合成培养基和无血清培养基三个阶段. 天然培养基采用取自动物体液或从组织中提取的成分作为培养液. 合成培养基最大的特点是各种成分已知.无血清培养基是在已知细胞所需营养物质和贴壁因子基础上, 在基

生物相关的

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收稿　2002206224　　　　修定　2002210216

资助　江苏省教育厅高新技术产业化开发项目(J H202086)、广东

省科委项目。

　3　现为浙江大学生命科学学院博士生。33　通讯作者(E 2mail :guowm @http://www.77cn.com.cn )。333　现工作单位:上海市松江区农委。

细胞薄层培养在植物激素调节形态发生研究中的应用

赵云鹏3　郭维明3

3

　陆红梅3

33

(南京农业大学园艺学院,南京210095)

Application of Thin Cell Layer Culture in Study on Morphogenesis R egulated by Phytohormones

ZHAO Yun 2Peng 3,GUO Wei 2Ming 33

,LU Hong 2Mei 3

33

(College of Horticulture ,N anjing A gricultural

Hela细胞传代培养操作步骤

1．观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。观察时拧紧盖子。 2．加热PBS、versene、培养基，(提前做好) 瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。

3．打开超净台（先开风机，后开照明），用75%乙醇清洁台面，点燃酒精灯。不要把废液缸拿出去倒，如果废液太多，可以用其他容器先装废液。取小离心管一个，置于架子上。

4．取尖吸管、吸量管各一支，放置在专用的架上。放置的方式，注意吸管、吸量管前端都不要与架子接触。 5．取待传代的细胞。打开versene，用酒精灯外焰烧。烧吸管时距离酒精灯心远些，不要把渣滓带进去。把试剂拿入台子的时候，尽量平稳，不要让试剂碰到瓶口。

6．用吸量管吸取旧的培养基，置离心管中，吸量管加入versene，然后将versene瓶收起来。（加versene主要是为了将旧培养基洗去）。在离心管中间部分将液体加入。吸液体和加液体时都不要对着细胞。 7．打开胰酶，然后将versene弃掉。换新管，用尖吸管吸取适量胰酶加入。加胰酶后，尽快放平，使细胞消化时间一致。

8．将细胞放入37度孵箱。放孵箱2min, 收胰酶，打开PBS. 之后拿出来镜下随时观察。使用二次消化法，去除容器中