心磷脂抗体检测

磷脂综合症相关抗体检测（抗心磷脂；抗β2糖蛋白I）

检验科免疫室

抗心磷脂抗体（AC L），抗β2糖蛋白I抗体（Anti-β2GPI）等自身抗体与机体心脑血管、下肢深静脉、肾静脉、视网膜静脉以及胎盘等部位血栓的发生密切相关，抗β2GPI抗体是和血栓形成相关性最强的抗体并且偏向与静脉血栓相关，而ACL偏向与动脉血栓相关。

本室开展 ACL-IgG ACL-IgM ACL-IgA

β2GP I-IgG

β2GP I-IgM 等项目，适用于对以下疾病的诊断或监测：

1 抗磷脂抗体综合征（APS） 表现为反复的动脉、静脉血栓、习惯性流产和血小板减少症等症状，多见于中年女性患者。

2 系统性红斑狼疮 SLE患者抗磷脂抗体阳性者更易发生高血压、神经系统症状和肾炎，医生需定期筛查其抗磷脂抗体水平，若发现持续阳性状态，则建议预防性服用羟化氯喹和低剂量阿司匹林。对于无SLE和血栓病史的，若抗磷脂抗体阳性同时还存在其他血栓高危因素，则建议长期服用低剂量阿司匹林以预防血栓的发生。

3 脑梗塞 抗磷脂抗体的存在除了与偏头痛、休克、短暂性脑缺血等症状相关外，ACL等抗体

几种常用的抗体检测方法

(1)免疫酶技术

免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性和酶对底物显色反应的高效催化作用有机结合而成的免疫学技术。由于它特异性强，灵敏度高，现已广泛用于筛选和鉴定单抗。 A、器材和试剂 a. 包被缓冲液：

碳酸盐缓冲液：取0.2mol/L Na2CO3 8ml，0.2mol/L NaHCO3 17ml混合，再加75ml蒸馏水，调PH至9.6。

Tris-HCl缓冲液（PH8.0，0.02mol/L）：取0.1mol/L Tris 100ml，0.1mol/L HCl 58.4ml混合，加蒸馏水至1000ml。

b. 洗涤缓冲液（PH7.2的PBS）：KH2PO4 0.2g，KCl 0.2g，Na2HPO4&S226;12H2O 2.9g，NaCl 8.0g，Tween-20 0.5ml，加蒸馏水至1000ml。

c. 稀释液和封闭液：牛血清白蛋白（BSA）0.1g，加洗涤液至100ml；或用洗涤液将小牛血清配成5-10%使用。

d. 酶反应终止液（2mol/L H2SO4）：取蒸馏水178.3ml，滴加浓硫酸（98%）21.7ml。 e. 底物缓冲液（PH5.0，磷酸盐-柠檬酸缓冲液）：取0.2mol/L Na2HPO4

1. 自身抗体

（1） 检验项目：抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)、抗线粒体抗体(AMA)

（2） 标本采集：3ml 新鲜血于无抗凝管（红色）;可与特定蛋白检测合抽一管血，共3ml。

（3） 检验方法：间接免疫荧光法

（4） 仪器：荧光显微镜NIKON--50i

（5） 试剂：欧蒙试剂

（6） 临床意义：

ANA：对自身免疫病有重要诊断价值。如SLE、硬质病、类风关、干燥综合症等疾病，滴度大都在>1:100，而活动性SLE 阳性率几乎100%。抗核抗体阳性的疾病有：结缔组织病，如皮肌炎、盘状红斑狼疮；消化道疾病，如慢活肝、溃疡性结肠炎；造血系统病，如巨球蛋白血症、淋巴瘤、恶性贫血等。其它疾病，如药物反应、淋巴细胞性甲状腺炎、恶性肿瘤、结核菌、血管炎、重症肌无力等。但这些疾病滴度往往过低。我院大都是肝炎病人，起始滴度为1：100。如果发现阳性病人，则会作进一步的稀释试验。正常的老年人约有2-4%者呈低滴度阳性。

AMA：在慢性肝炎、肝硬化病人，可有30%阳性率；在原发性胆汁性肝硬变，可有90%阳性；正常人无此抗体。

ASMA：此抗体为非特异性抗体。当肝炎病人肝细胞严重损害时，肝细胞胞浆中，肌球蛋白和肌纤维收缩蛋白，释放到血液中产生抗体。抗平滑肌

一、抗核抗体

抗核抗体（antinuclearantibodies，ANA）泛指抗各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。ANA的性质主要是IgG，也有IgM和IgA，甚至IgD和IgE。ANA可以与不同来源的细胞核起反应，无器官特异性和种属特异性。ANA主要存在于血清中，也可存在于其他体液如滑膜液、胸水和尿液中。

ANA在SIE患者的滴度较高，但也出现在其他许多自身免疫病中，在许多研究报告中，都将检出ANA作为自身免疫甚至自身免疫病存在的依据。这种现象的机制尚未明了，有待于进一步研究。（一）ANA的类型及意义

由于细胞核成分的复杂性，不同成分的抗原性也不同；因此就会有多种不同的ANA。

1．抗核蛋白抗体核蛋白抗原（DNP）由DNA和组蛋白组成。由于DNP抗原存在不溶性和可溶性两个部分，可分别产生相应的抗体。不溶性DNP抗体通常不完全被DNA和组蛋白所吸收，它是形成狼疮细胞的因子；可溶性抗原存在于各种关节炎病人的滑膜液中，其相应抗体也出现于RA病人的滑膜液中。

2．抗DNA抗体可以分为两大类：①抗天然DNA（nDNA）抗体，或称抗双链DNA（dsDNA）抗体；②抗变性DNA抗体，或称抗单链DNA（ssDNA）抗体。抗dsDNA抗体对SLE有较高的特

红细胞血型不规则抗体是导致免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血等的原因,平常多在ABO正反定型不符、交叉配血异常、新生儿溶血、溶血性贫血时经血型血清学试验被发现。对以往的不规则抗体检测情况进行分析,可以大致了解本地区人群中的不规则抗体分布特点,为今后的血型血清学和输血工作提供帮助与参考。

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中国实验诊断学

20年 5 07月第 l卷 1

第5期

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6 3 — 8— -—

[] 5孙

芾，林

宏，王厚芳，呼吸系统感染性疾病快速诊断技术等.

[] 6赵林清，渊，钱王之棵， .等呼吸道合胞病毒检测方法比较[] J.临床儿科杂志， O,1 1: . 2 32 () 2 O 3

的应用[]现代检验医学杂志， 0,94: . J. 2 41()1 0 3

(收稿日期：06 8 0 20—0—1)文章编号：07 2720 )一08—0 10—4 8(Of 7 63 2

红细胞血型不规则抗体检测结果分析关亮，郑朝晖(台州市中心血站，浙江台州 380) 1 0 0

红细胞血型不规则抗体是导致免疫性溶血性输

13操作方法 .

盐水法、球蛋白法、抗吸收放散试

血反应、新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血等的原因

慢性荨麻疹患者甲状腺自身抗体检测及自体血清皮肤试验的意义 胡小平1 ,谢谦2 ,于波1 ,邵勇1，张杰1，钟绮丽1 ,马刚1

（1 北京大学深圳医院皮肤科；2 北京大学深圳医院内分泌科广东深圳 518036）

[摘要] 目的:通过检测指标分析慢性荨麻疹和甲状腺功能亢进的关系，探讨甲状腺自身抗体在慢性荨麻疹发病中的作用和自体皮肤血清试验的意义。方法:研究对象包括100例慢性荨麻疹患者，68例甲亢合并慢性荨麻疹患者，60例甲状腺功能亢进患者和60例健康人群，回顾性分析四组患者的临床资料，检测游离甲状腺素（FT3、FT4）、高敏促甲状腺素（sTSH），甲状腺自身抗体（TGAb、TPOAb、TRAb），并进行自体血清皮肤试验（ASST），比较各组指标间的差异性。结果:慢性荨麻疹组TGAb、TPOAb、TRAb和ASST阳性率均显著高于对照组；甲亢合并慢性荨麻疹组TGAb、TPOAb、TRAb阳性率均显著高于慢性荨麻疹组，两组ASST阳性率有显著性差异；甲亢组TGAb、TPOAb阳性率和甲亢合并慢性荨麻疹组差异无显著性，TRAb和ASST阳性率有显著性差异；慢性荨麻疹组sTSH水平和对照组有显著性差异。结论:甲状腺自身抗体在慢性荨麻疹发病中可能起一定

艾滋病病毒抗体检测知情同意书

艾滋病是大家都非常关注的一种对人类威胁非常严重的疾病，为了保护您和家人，在本次操作(手术)前，做一次艾滋病病毒(HIV)抗体初筛检测非常必要,医院为您提供免费检测，同时承诺为您保守秘密。

如果您正处于艾滋病病毒感染“窗口期”（从感染艾滋病病毒起至3个月以内），因而未能检测出是否感染艾滋病病毒是可能存在的。

艾滋病病毒抗体检测试剂在个别情况下可能会出现阴性和假阳性的反应，我们不能保证检测结果绝对准确。

本人已经接受上述艾滋病病毒抗体检测告知内容，自愿选择是否接受艾滋病病毒抗体检测。

自愿接受艾滋病病毒

抗体检测

本人签字：

日 期：

不接受艾滋病病毒抗 体检测 本人签字： 日 期：

标准化操作规程 临检室 鄱阳湖第二医院检验科

结核分枝杆菌抗体检测 (胶体金法) 规程操作

1、检验目的

本试剂盒可定性检测人血清中结构分枝杆菌抗体，用于临床结构病的辅助诊断。 2、检验原理

本试剂盒利用斑点免疫胶体金渗滤技术（DIGFA），将结核分枝杆菌特异性膜蛋白抗原分离纯化，点样并固化在硝酸纤维素膜上，膜上TB抗原捕获人血清样品中结核分枝杆菌抗体，被捕获的结核IgG抗体可用葡萄球菌A蛋白（SPA）胶体金缀合物标呈色（SPA能与IgG特异性结合），形成红色斑点，根据是否出现红色斑点即可判断阴、阳结果从而判断是否存在结核分枝杆菌抗体。 3、样本要求

必须使用新鲜血清标本，血浆标本必须用玻璃棒剥离纤维蛋白，保证血清无混浊沉淀。 4、试剂

4.1试剂名称：结核分枝杆菌抗体诊断试剂盒（胶体金法） 4.2生产厂家：上海奥普生物医药有限公司 4.3包装规格： 20人份/盒

4.4贮存条件及有效期：2-8℃干燥处保存，有效期12个月。 5、检验方法：

5.1在反应板的反应孔中间，加入2滴封闭液，等待薄膜吸入； 5.2 取40μl新鲜的血清标本，加入反应孔中间，等待薄膜吸入； 5.3 在反应孔中间加

丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）

【实验原理】

本样品采用胶体金色免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清（浆）中HCV抗体。在玻璃纤维膜上预包被金标小鼠抗人lgG抗体（anti-lgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被重组丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5，源自大肠杆菌）和人lgG抗体（丙种球蛋白）。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人lgG抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-lgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色，游离金标鼠抗人lgG抗体则在对照线处与人lgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。

【主要组成成分】

1、 HCV胶体金试纸条/试卡 2、 说明书 3、 样本稀释液 4、 塑料滴管

【样本要求】

1、 采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。

2、 如果血清和血浆样品收集后7天内检测,样品须放在0-4℃保存；大于7天必须-20℃一下 冷冻保存。

3、 临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）不影响实验结果。

4、 溶血、粘稠及高指标本不适于本试剂。含特殊

人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）

生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司 储存条件：4℃-30℃保存 操作步骤

1. 2. 3. 4.

将待测标本从存储条件下取出，平衡至室温并编号 将所需数量的测试试剂从包装盒取出平衡至室温

用微量加样器取60μl待检血清/血浆标本滴加到试剂加样处

加样后，阳性标本可在1-30分钟内检出，超过30分钟将对实验结果造成影响。因此建议30分钟内最终观察并记录实验结果

结果判读

1. 阳性结果：测试条在测试区和对照区位置各出现一条紫红色条带。如果检测区的紫红色条带隐约可见，建议对实验重复检测，并使用其他方法确认

2. 阴性结果：测试条只在对照区位置出现一条紫红色条带 3. 无效结果：对照区未出现紫红色条带，表明不正确的操作或试剂已变质损坏或是试剂中抗体含量过高。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂条重新测试。如果问题依然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系

注意事项

1. 本试剂用于体外诊断，仅用于人全血、血清或血浆样品，其它体液样本可能得不到准确结果

2. 本试剂用于定性检测人全血、血清或血浆样品中HIV1/2型抗体，对于所有使用本试剂条检测的结果必须进一步验证 3. 样品的加样