生化课件酶

幻灯片1

生物化学

幻灯片2

一 蛋白质的结构和生物学功能 （一）蛋白质的概述

? 蛋白质（protein）是最基本的生命物质之一。 ? 1、元素组成：平均含N量约＝16%（特征代表） ? 2、基本结构单位：氨基酸

? 3、大小：蛋白质是大分子化合物

? 4、空间结构：一级结构、二级结构、三级结构、四级结构…… ? 5、重要性：数量多、种类多、功能多 ? 6、蛋白质的合成：AA顺序的遗传编码

幻灯片3

（二） 氨基酸 ? 1.结构通式

? ?-氨基酸

COOHH2N

不变部分

CRH可变部分

各种氨基酸的区别在于侧链R基的不同。20种基本氨基酸按R的极性可分为非极性氨基酸、极性性氨基酸、酸性氨基酸和碱性氨基酸 幻灯片4

2.氨基酸的性质 （1）、天然蛋白质仅有20种AA、均为?- AA （2）、旋光性：＋、－（除甘氨酸没有旋光性） （3）、构型：D－、L－（除甘氨酸，天然蛋白质的AA均为L－AA）。 （4）、构象

人类8种必需AA：（人体体内不能自身合成，必须从食物中获得）

赖、色、甲硫、苯丙、苏、缬、亮、异亮 幻灯片5

3.氨基酸的分类

? 法一：按R基化学结构特点分为四大类： ? 1、脂肪AA（15种） ?

44JournalofAnimalScienceandVeterinaryMedicine　　Vol.28　　No.3　　2009

端粒酶与细胞永生化

李改霞

(陕西省米脂中学,陕西米脂　718100)

摘　要:端粒是真核细胞染色体末端的一种特殊结构,由端粒DNA和端粒蛋白质组成。正常动物

细胞DNA的端粒随着细胞分裂而缩短,当缩短到一定长度时细胞将停止增殖并死亡。端粒酶可以从端粒DNA3′OH末端延伸端粒或合成新的端粒。本文主要介绍了端粒酶的结构和功能以及在细胞永生化中的应用。

关键词:端粒;端粒酶;永生化

[中图分类号]　S852.33　　[文献标识码]　A　　[文章编号]　100426704(2009)0320044203

ProgressonTelomeraseandImmortalization

LIGai-xia

(Mizhimiddleschoolin,　　Abstract:Telomereissrendofeukaryoticchromosomes.Mostofnormalanimal

somaticcellscannumbertimbecomesenescent.Telomeraseisanenzymethatimpartsreplicative

第三章 酶

一、选择题

1、酶反应速度对底物浓度作图，当底物浓度达一定程度时，得到的是零级反应，对此最恰当的解释是（ ）。

A、形变底物与酶产生不可逆结合 B、酶与未形变底物形成复合物

C、酶的活性部位为底物所饱和 D、过多底物与酶发生不利于催化反应的结合 2、米氏常数Km可以用来度量（ ）。

A、酶和底物亲和力大小 B、酶促反应速度大小 C、酶被底物饱和程度 D、酶的稳定性

3、酶催化的反应与无催化剂的反应相比，在于酶能够（ ）。

A. 提高反应所需活化能 B、降低反应所需活化能 C、促使正向反应速度提高，但逆向反应速度不变或减小 4、辅酶与酶的结合比辅基与酶的结合更为（ ）。 A、紧 B、松 C、专一 5、下列关于辅基的叙述（ ）是正确的。

A、是一种结合蛋白质 B、只决定酶的专一性，不参与化学基因的传递 C、与酶蛋白的结合比较疏松 D、一般不能用透析和超滤法

一、蛋白质化学

1、下列氨基酸中侧链含有羟基的是( D )。

A. Gly

B. Glu

C. Lys

D. Thr

2、下列含有两个羧基的氨基酸是( E )。

A．Arg B．Lys C．Gly D．Trp E．Glu

3、含硫氨基酸包括：(A、D)

A．Met B．Thr C．His D．Cys 4、下列哪些是碱性氨基酸：（A、C、D）

A．His B．Met C．Arg D．Lys

5、芳香族氨基酸是：（A、B、C）

A．Phe B．Tyr C．Trp D．Pro

6、蛋白质分子组成中不含有下列哪种氨基酸？（D）A．Cys B．Met C．胱氨酸D．瓜氨酸

7、侧链含有咪唑基的氨基酸是（ D ）。

A、Met

B、Cys

C、Arg

D、His

8、下列哪一种氨基酸是先以其前体形式结合到多肽中，然后再进行加工形成的（C）

A.脯氨酸

B.赖氨酸

C.羟脯氨酸

D.谷氨酸

9、生物体内的氨基酸有D-型和L-型两种，其中

D-型氨基酸通常存在于( B )中。

A.胰岛素

B.抗菌肽

C.细胞色素

D.血红蛋白

10、蛋白质中不存在的氨基酸是( C )。

A.Cys

B.Hyp

C.Cit

D.Met

E.Ser

11、谷氨酸有3个可解离，其pK

1

=2.19,

pK

2=9.67,pK

3

=4.24,它

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶，即Uracil - DNA Glycocasylase，尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对，是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常，就很有可能引发癌症等疾病。可是，很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对，想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现，有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说，他们通过实验发现，动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查，如果碱基对排列形状正确则将其放回原处，如果形状有误则将其清除，DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理：UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，形成的有缺失碱基的DNA链，在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂，从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃，95℃灭活。

作用：为保证PCR结果的准确性，要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

第一章 蛋白质的结构与功能 一、名词解释

1、肽单元：参与肽键的6个原子Cα1、C、O、N、H、Cα2位于同一平面，Cα1和Cα2在平面上所处的位置为反式构型，此同一平面上的6 个原子构成了所谓的肽单元。 2、分子伴侣：一类保守的蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。

3、蛋白质的四级结构与亚基：有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链，每一条多肽链都有完整的三级结构，成为蛋白质的亚基。蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。

4、协同效应：一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，称为协同作用。如果是促进作用则称为正协同效应，如果是抑制作用则称为负协同作用。

5、蛋白质的变性：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。

6、Motif（模体）:在许多蛋白质分子中，可发现二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，被称为模体。

7、Domain（结构域）:大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区域，

第一章 蛋白质的结构与功能 一、名词解释

1、肽单元：参与肽键的6个原子Cα1、C、O、N、H、Cα2位于同一平面，Cα1和Cα2在平面上所处的位置为反式构型，此同一平面上的6 个原子构成了所谓的肽单元。 2、分子伴侣：一类保守的蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。

3、蛋白质的四级结构与亚基：有些蛋白质分子含有二条或多条多肽链，每一条多肽链都有完整的三级结构，成为蛋白质的亚基。蛋白质分子中各亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用，称为蛋白质的四级结构。

4、协同效应：一个寡聚体蛋白质的一个亚基与其配体结合后，能影响此寡聚体中另一个亚基与配体结合能力的现象，称为协同作用。如果是促进作用则称为正协同效应，如果是抑制作用则称为负协同作用。

5、蛋白质的变性：在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。

6、Motif（模体）:在许多蛋白质分子中，可发现二个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象，被称为模体。

7、Domain（结构域）:大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区域，

第六章 主要工业酶制剂的生产

第一节 淀粉制糖相关酶制剂的生产

一 α-淀粉酶的生产

α-淀粉酶作用于淀粉时，可以随机的方式从分子内部切开。α-1，4葡萄糖苷键而生成糊精和还原糖。其水解位于中间的。α-l,4键的概率比水解位于分子末端的概率大；不能水解支链淀粉的。α- 1,6键，也不能水解紧靠1，6分支点的α-1，4键；不能水解麦芽糖，但可以水解含有3个或3个以上α- l，4糖苷键的低聚糖。由于水解产物的还原性末端葡萄糖残基C1碳原子为α构型．故称α-淀粉酶。至今已有不少微生物的“α-淀粉酶被高度纯化。

工业上大规模生产和应用的α-淀粉酶主要来自细菌和曲霉。芽孢杆菌所产α-淀粉酶分为液化型与糖化型两种。目前只有液化型酶有用，由于活性高，发酵周期短，酶的耐热性高，尤其是枯草杆菌为大多数工厂所采用。我国淀粉糖工业使用的液化酶BF-7658。地衣芽抱杆菌的酶耐热性比枯草杆菌为高，但产量较低。芽孢杆菌易于退化和遭受噬菌体感染而降低产酶能力。由微生物制备酶制剂，产酶量高，易于分离和精制，适于大量生产。当然亦能从植 物和动物中提取α-淀粉酶，满足特殊的需要，但由于成本高，产量低，目前还不能实现工业化生产。具有实用价值的α-淀粉酶生产菌列于表5—6。