植物蛋白工艺学试题

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植物蛋白酶提取纯化工艺

标签:文库时间:2024-11-20
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植物蛋白酶提取纯化工艺

生物工程09-2班 陈福泉 学号:3090343214

一、 实验目的

1、了解植物蛋白酶常用的提取纯化方法的基本原理和基本操作; 2、掌握双水相和反胶束萃取的原理和操作步骤; 3、掌握蛋白质含量和蛋白酶酶活的检测方法 二、 实验原理

植物蛋白酶常用的提取纯化方法有缓冲盐溶液提取、初步纯化的方法有有机溶剂法、乙醇粉法、丙酮粉法、盐析法、双水相法、反胶束萃取法等

以pH6.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液为提取溶剂所得酶活力较高,最佳工艺为:以pH6.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液25℃提取2次,料液比1∶1;应用硫酸铵盐析及透析袋透析对粗酶液进行纯化,粗酶液再以60%硫酸铵盐析24h,透析袋(14000)低温透析12h,冻干;酶学性质研究表明:生姜蛋白酶以酪蛋白为底物其最适pH值为6.0,30℃保温30min,酶活稳定。 三、 实验材料 材料与试剂

新鲜生姜、酪蛋白(化学纯)、考马斯亮蓝G-250、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水碳酸钠、碳酸氢钠、柠檬酸、硫酸铵、丙酮等试剂均为分析纯。

0.01%(w/v)考马斯亮蓝G-250溶液:将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50mL 90%vol乙醇中,加入85%正磷酸100

植物蛋白质提取方法

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一、 植物蛋白质提取

1. TCA-丙酮法

(1)称量一定量的样品置于液氮预冷的研钵中,加少许PVPP,反复加液氮研磨至粉末。

(2)研磨好的样品用10 倍体积(w/V)的10%的TCA-丙酮溶液悬浮,加入0.1 M PMSF、

1 M DTT 至终浓度为1 mM PMSF、10mM DTT,超声5 分钟,于-20℃静置6 小时或

过夜后,4℃,20000g 离心15 分钟,弃上清。

(3)沉淀用10 倍体积于样品的丙酮溶液重悬浮,于-20℃静置1 小时后,4℃,20000g 离

心15 分钟,弃上清。

(4)重复步骤(3)一次。 (5)沉淀用10 倍体积于样品的乙醇/乙醚=1:1 洗,于-20℃静置1 小时后,4℃,20000g 离

心15 分钟,弃上清。

(6)重复步骤(3)一次。

(7)取出沉淀真空干燥约5 分钟,除尽有机溶剂。 (8)按10mg 干粉末加200 微升裂解液的比例,加入1 mM PMSF、10mM DTT,超声5

分钟,充分溶解1 小时,10℃,35000g 离心30 分钟,上清为所需的蛋白溶液。 (9)用Bradford 法测定蛋白样品的蛋白浓度。 (10)蛋白样品溶液小量分装,-80℃保存。

注意事项:

(1)

植物蛋白质提取方法

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一、 植物蛋白质提取

1. TCA-丙酮法

(1)称量一定量的样品置于液氮预冷的研钵中,加少许PVPP,反复加液氮研磨至粉末。

(2)研磨好的样品用10 倍体积(w/V)的10%的TCA-丙酮溶液悬浮,加入0.1 M PMSF、

1 M DTT 至终浓度为1 mM PMSF、10mM DTT,超声5 分钟,于-20℃静置6 小时或

过夜后,4℃,20000g 离心15 分钟,弃上清。

(3)沉淀用10 倍体积于样品的丙酮溶液重悬浮,于-20℃静置1 小时后,4℃,20000g 离

心15 分钟,弃上清。

(4)重复步骤(3)一次。 (5)沉淀用10 倍体积于样品的乙醇/乙醚=1:1 洗,于-20℃静置1 小时后,4℃,20000g 离

心15 分钟,弃上清。

(6)重复步骤(3)一次。

(7)取出沉淀真空干燥约5 分钟,除尽有机溶剂。 (8)按10mg 干粉末加200 微升裂解液的比例,加入1 mM PMSF、10mM DTT,超声5

分钟,充分溶解1 小时,10℃,35000g 离心30 分钟,上清为所需的蛋白溶液。 (9)用Bradford 法测定蛋白样品的蛋白浓度。 (10)蛋白样品溶液小量分装,-80℃保存。

注意事项:

(1)

食品工艺学试题

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食品98试点班《食品技术原理》考卷B 一、填空(30分)

1. 食品的质量因素包括感官特性、营养质量和卫生质量、耐储藏性。

2. 在干燥操作中,要提高干燥速率,可选用的操作条件包括:升温、加快空气流速、降低空气相对湿度和提高真空度。

3. 辐射类型主要有非电离辐射(低频辐射)和电离辐射(高频辐射)两类,食品保藏主要应用电离辐射,在商业上,经常采用人工制备放射性同位素Co60作为放射源。

4. 烟熏成分中,醇类和烃类是与保藏无关的两类化合物。

5. 列举一些目前已经成熟的检测辐射食品的方法:过氧化物法、ESR法、热释光法和化学发光法。??

6. 控制食品发酵的主要因素有:酸度、酒精、发酵剂(酵种)、温度、氧气供应量和盐。

7. 糖水水果罐头一般采用常压杀菌,肉类罐头一般采用高压杀菌,其原因是水果罐头属于酸性食品(PH≤4.6,Aw<0.85),其高酸度可抑制细菌生长,所以仅常压杀菌即可。而肉类罐头属于低酸性食品,需采用高压杀菌。

8. 罐藏食品常用的排气方法有热罐袋法、加热排气法和真空排气法。???

9. 影响冻结食品储藏期和质量的主要因素有空气相对湿度、空气流速和贮藏温度。??? 10.

冰晶体最大生成带的范围是-1~-5℃。???

二、是非题(6分)(对的打√,错的打╳)

1. 在-18℃,食品中的水分全部冻结,因此食品的保存期长。( )

食品工艺学试题

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食品工艺学-综合试卷一

一、名词解释(每小题3分,共15分)

1. 冷害:在低温储藏时,有些水果、蔬菜等的储藏温度虽未低于其冻结点,但当储温低于某温度界限时,这些水果、蔬菜就会表现出一系列生理病害现象,其正常的生理机能受到障碍失去平衡。这种由于低温所造成的生理病害现象称之为冷害。

2. 渗透作用:指在渗透压的作用下,溶剂从低浓度经过半透膜向高浓读溶液扩散的作用。

3. 肉类发色助剂:指本身没有发色的功能,但和亚硝酸盐这类发色剂合用时能很好地改善发色的状况的一类物质,如抗坏血酸等。

4. 升华干燥:将食品预先冻结后,在真空条件下通过升华方式除去水分的干燥方法。

5. 辐射臭:通过辐照处理和热处理,可以加速农产品及其制品中脂肪的自氧化过程,从而产生臭味。

二、 选择题(从下列各题四个被选答案中选出一个或多个正确答案,并将其代号顺次写在答题纸的相应位置,答案选错或未选全者,该题不得分。每小题2分,共30分。)

1. 磷酸盐是一类具有多种功能的物质,在食品加工中具有明显的改善品质的作用。其作用机制是:.A、B、D

A,提高体系pH值;B,增加离子强度;C,乳化油脂;D,解离肌动球蛋白。 2. 下列哪种糖类的扩散系数最大:A A,葡萄糖;

化工工艺学试题

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淮 海 工 学 院

2010 -2011学年 第 2 学期 化工工艺学 大作业

班级 学号 姓名 一、填空题

1.化工工艺是将各单项化学工程技术在以产品为目标的前提下集成,解决各单元间的_______ 和 _______。

2.对于无机矿的加工方法主要有_______ 和 _______。

3.在基本有机化工原料中,最重要的就是“三烯”,“三苯”,它们主要来源于石油和天然气加工获得,其中“三苯”指苯、甲苯、_______;“三烯”指乙烯、丙稀、_______。 4.合成气可由天然气、煤以及渣油制得,通过它可以获得一系列的化工产品,但不同产品对合成气中H2/CO(摩尔)要求不同,对于合成氨,H2/CO应为_______;对于制造甲醇H2/CO应为_______。

5.催化裂化是石油加工中最重要的方法,是典型的气固催化反应,其基本的反应历程是原料油高温汽化,扩散在多孔催化剂表面,被催化剂的活性中心_______,_______,_______,产物再扩散到气流主体。

二、简答题

1. 简述将实验室试验(间歇过程)成功工业化(连续过程)放大的方法和必要条件? 2. 请说明

焊工工艺学试题

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一、判断

1、 等离子弧是压缩电弧。

2、 工业上常用的等离子气体是N2.

3、 减小喷嘴孔径和增大喷嘴孔道长度都易产生双弧现象。

4、 焊缝中容易产生夹钨缺陷是等离子弧焊的主要缺点之一。 X 5、 不同厚度的金属材料不能用点焊焊在一起。 X 6、 缝焊适合于厚件的搭接焊。X

7、 点焊时,为了保证质量要经常对电极进行清理和清整。

8、 等离子弧切割时,若等离子气流量过大、冷却气流将带走大量的热量,会降低切割

能力。

9、 闪光对焊主要是利用光产生的热量来加热焊件的一种方法。X

10、转移型等离子弧主要用于喷涂以及焊接、切割较薄金属或用于非导电材。X 11、电渣焊焊接接头必须通过焊后热处理,才能改善接头的力学性能。 12、碳弧气刨一般采用直流电源,并要求焊机具有陡降外特性。

13、钎焊时,由于钎料熔化,焊件不熔化,所以焊件金属组织和性能变化较少,焊接应力和变形也较小。

14、碳弧气刨可以在焊件上开U形坡口。

15、奥氏体不锈钢手弧焊时,焊条要适当横向摆动,以加快其冷却速度。X 16、珠光体耐热钢的特性通常用高温强度和高温抗氧化性两种指标来表示。 17、焊接珠光体耐热钢时选用碱性焊条是防止冷裂纹的主要措施之一。 18、对低温钢性能的要求

食品工艺学试题

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食品工艺学-综合试卷一

一、名词解释(每小题3分,共15分)

1. 冷害:在低温储藏时,有些水果、蔬菜等的储藏温度虽未低于其冻结点,但当储温低于某温度界限时,这些水果、蔬菜就会表现出一系列生理病害现象,其正常的生理机能受到障碍失去平衡。这种由于低温所造成的生理病害现象称之为冷害。

2. 渗透作用:指在渗透压的作用下,溶剂从低浓度经过半透膜向高浓读溶液扩散的作用。

3. 肉类发色助剂:指本身没有发色的功能,但和亚硝酸盐这类发色剂合用时能很好地改善发色的状况的一类物质,如抗坏血酸等。

4. 升华干燥:将食品预先冻结后,在真空条件下通过升华方式除去水分的干燥方法。

5. 辐射臭:通过辐照处理和热处理,可以加速农产品及其制品中脂肪的自氧化过程,从而产生臭味。

二、 选择题(从下列各题四个被选答案中选出一个或多个正确答案,并将其代号顺次写在答题纸的相应位置,答案选错或未选全者,该题不得分。每小题2分,共30分。)

1. 磷酸盐是一类具有多种功能的物质,在食品加工中具有明显的改善品质的作用。其作用机制是:.A、B、D

A,提高体系pH值;B,增加离子强度;C,乳化油脂;D,解离肌动球蛋白。 2. 下列哪种糖类的扩散系数最大:A A,葡萄糖;

钳工工艺学试题

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钳工工艺学试题

第一章绪论 一、 填空题

1、 机器设备都是由()组成的,而大多数零件是由()材料制成。 2、 钳工大多是用()并经常在()上进行手工操作的一个工种。 3、 当机械设备产生()、出现()或长期使用后精度(),影响使用时,就要通过()进行维护和修理。 4、 钳工必须掌握的基本操作有:划线、()、()、()、钻孔、扩孔、锪孔、铰孔、攻螺纹与()、刮削与()、矫正与()、铆接与()、装配与()、测量与简单的()等。 二、 判断题(对的画√,错的画×)

1、 机器上所有;零件都必须进行金属加工。() 2、 零件毛坯的制造方法有锻造、铸造和焊接等。() 3、 可有机械加工方法制作的零件,都可由钳工完成。()

4、 普通钳工主要从事式具、模具、夹具、量具及样板的制作和修理工作。() 三、 简述题

1、 钳工在机器制造业中,担负着哪些主要任务? 2、 机修钳工担负着哪些主要任务? 3、 工具钳工担负着哪些主要任务? 第二章钳工常用量具 一、 填空题

1、 量具按其用途和特点,可分为()量具、()量具和()量具三种类型。 2、 长度基准单位是(),等于()mm。 3、 1

食品工艺学试题十七

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食品工艺学试题十七

食品工艺学试题十七

一、填空题(每空1分,共20分)

1、果蔬中色素分为两大类,一类是一类是。

2、在果蔬原料中,产生涩味的物质是,与果实的软硬程度和脆度有关的

是,在马玲薯中有毒物质是。

3、大豆中存在会影响到豆制品的质量和营养性质。

4、小麦面筋蛋白质主要是、组成。

5、在肉中,决定持水性的重要因素是和。

6、在乳中,酪蛋白——磷酸钙粒子,一般内部由的丝构成的网,在其中附

,外表由酪蛋白层被覆,结合有腹体磷酸钙

7、罐头生产中,排气方法有、和。

8、巧克力,的质构特征是可可脂物理特性的表现。

9、在果脯蜜饯加工中,由于划皮太深,划纹相互交错,成熟度太高等,煮制后易产生

现象,“吃糖”不足易产生现象。

二、选择题(每题1.5分,共12分)

1、加热肉的持水性要比生肉______。

A、低

B、高

C、一样

D、其他.

2、高温短时杀菌法用下列英文缩写名称。

A、UTH

B、LT LT

C、HTST

D、LTST

3、果蔬干制过程中,当处于恒温干燥阶段时,果蔬品温度______。

A、几乎不变

B、快数上升

C、缓慢上升

D、缓慢下降

4、食品的温度只有达到_____食品内的水分才能全部结冰。

A、冰点

B、过冷点

C、共晶点

D、冻结点

5、韧性饼干烘烤条件一般采用。

A、低温长时

B、高温短时