临床微生物学检验技术重点

药品微生物学检验技术

第十二章 药品微生物检验方法验证的意及要求

第一节 药品微生物检验结果的影响因素

微生物的生长受很多因素的影响，特别是药品中污染的微生物尤为如此。药品微生物检验是检测药品中具有繁殖能力的活细胞，这些活的微生物在药品中处于不稳定的状态，它的检出与否受很多因素的影响，主要影响因素有如下几点： 一、供试品组分

由于供试品本身的特性，可能含有具有抑菌作用的组分成分，如抗生素中药中的黄莲、牛黄、冰片等。另外，很多供试品中加入的抑菌剂或防腐剂用于防止供试品中的微生物再污染和再生殖，以及增溶剂、乳化剂、抗氧剂等其他辅料，这些组分在一定浓度下对 微生物具有抑制作用，并可能对 药品中污染的微生物造成不同程度的损伤。供试品中污染的微生物在这些物质的影响下有可能检不出，这时，它们虽然被 抑制甚至受到损伤，但并未死亡，在一定条件在塔门还可以稳定地存活一段时间，当微生物生存环境改变时，如抑菌成分消除或浓度降低时，这些微生物便可以复苏并繁殖，患者使用后同样可危及人体健康。对于这些药品，如按常规方法进行微生物检验，往往显示假阴性结果。

除此之外，在药品微生物检验中，由于原料来源不同，特别是中药制剂，或者生产工艺的差别，使用的辅料不同等原因，使不

1．葡萄糖代谢类型鉴别试验（O/F或Hugh－Leifson，HL）

下层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克

葡萄糖 0.2克 水 100毫升 1.6%溴甲酚紫(Bromo cresol purple)乙醇溶液0.1-0.2mL

PH=7.6 注意: 调完pH值后再加葡萄糖.

(1)原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。本试验又称氧化发酵（O/F或Hugh－Leifson，HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。

(2)方法：挑取少许纯培养物（不要从选择性平板中挑取）接种2支HL培养管中，在其中一管加入高度至少为0.5cm的无菌液体石蜡以隔绝空气（作为密封管），另一管不加（作为开放管）。置30℃孵箱孵育48h以上。

(3)结果：两管培养基均不产酸（颜色不变）为产碱型；两管都产酸（变黄）为发酵型；加液体石蜡管不产酸，不加液体石蜡管产酸为氧化型。

(4)应用：主要用于肠杆菌科

《微生物学检验》期末考试题-A

一. 名词解释(每题3分 共24分)

1. 菌落2.病毒3.SPA4.溶源性细菌5.非发酵菌6.菌群失调7.选择性培养基8.MIC 二. 单项选择题 (将答案填入表中相应位置，每题1分,共20分) 1.细菌蛋白质合成的场所是

A．中介体 B.质粒 C.核蛋白体 D.线粒体内膜 E.性菌毛 2.细菌细胞壁特有的化学结构是( )

A脂蛋白 B.胆固醇 C.脂多糖 D.肽聚糖 E.磷壁酸 3.细菌内毒素的化学成分是 C

A. 磷壁酸 B.脂蛋白 C.脂多糖 D.细菌素 E.荚膜多糖 4.在下列病原菌中能够产生自溶酶，胆汁溶菌试验阳性的细菌是 C

A. 淋球菌 B.白喉杆菌 C.肺炎链球菌 D.溶血性链球菌 E.结核杆菌 5.BCG是结核分枝杆菌的变异株，它属于

A. 形态变异 B.菌落变异 C.结构变异 D.毒力变异 E.耐药变异 6.用TCBS平板分离培养病原菌是 A

A. 霍乱弧菌 B.结核杆菌 C.痢疾杆菌 D.嗜盐性弧菌 E.非发酵菌 7.用溴麝香草酚蓝作为指示剂的培养基是

A. 尿素培养基 B.MIU培养基 C.O/F培养基 D.糖发

临床微生物学与检验习题集

本习题集由三部分构成，第一部分为基础题，主要测试学生对每一章节内容的掌握程度；第二部分为综合题，侧重考查学生综合分析问题的能力及对本门课程掌握的程度；第三部分为病例分析题，考查学生利用所学知识解决实际问题的能力。

第一部分基础题

绪论

一、名词解释：

1．微生物(microorganism)

2．微生物学(microbiology)

3．医学微生物学(medical microbiology)

二、选择题

1．下列描述的微生物中，不是所有微生物共同特征的是

A个体微小 B 分布广泛

C 种类繁多

D 只能在活细胞内生长繁殖

E 结构简单

2．不属于原核细胞型微生物的是

A细菌 B 真菌

C 支原体

D 衣原体

E 立克次体

3．属于真核细胞型微生物的是

A螺旋体 B 放线菌

C 真菌

D 细菌

E 立克次体

4．下列那种微生物属于非细胞型微生物

A细菌 B 衣原体

C 支原体

D 病毒

E 立克次体

三、填空题

1．微生物按其细胞结构可分为、、三大类。、、、、、、、八种。

细菌的形态与结构

一、名词解释：

1. 肽聚糖（peptidoglycan）

2. 脂多糖(LPS)

3. 质粒（plasmid）

4. 异染颗粒（metachromatic gramule）

5. 革兰

病毒学总论1

1、病毒感染标本的采集与送检应注意什么？ 双份血清测定的意义如何？ 2、病毒感染细胞的现象有哪些？

3、能有效预防病毒感染的方法有哪些？ 4 、目前常用的疫苗包括哪些？

病毒学各论2

1、 名词解释：虫媒病毒、内基小体、朊粒 2、简述HIV的传播途径及致病机制。

传播途径：性接触传播：同性恋及性乱者为高危人群

血液传播：输入被HIV污染的血制品或血液及使用被HIV污染的注射用

具、手术器械。

母婴传播：包括经胎盘，产道或经哺乳等方式传播。 致病机制：HIV对CD4+细胞的破坏

HIV对其他细胞的损伤（B细胞、单核细胞亚群） 病毒血症

对神经细胞的损害

3、试述主要的虫媒病毒和出血热病毒种类及其引起的疾病。

主要虫媒病毒包括：流行性乙型脑炎病毒、登革热病毒、汉坦病毒、新疆出血热病毒

出血热病毒种类：肾综合征出血热病毒、新疆出血热病毒

4、疱疹病毒有哪些共同特征？常见的疱疹病毒有哪些？各自引起哪些疾病？

共性：病毒呈球形、20面体立体对称的核心为双股线形DNA的包膜病毒。 除EB病毒以外，容易产生明显的CPE（多核巨细胞、核内嗜酸性包涵体）。 感染类型多样----显性、潜伏、整合、先天感染。 免疫性：可产生免疫力，但对已潜伏的病毒无效。

常见疱疹病毒：单纯疱疹

微生物学试题十二套

微生物学试题（一）

一、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3 ,colony 4, life cycle 5,capsule 6,endospore 二、简答题

1，试述微生物与当代人类实践的重要关系？ 2，简述革兰氏染色的机制？

3.微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 三、填空(每空1分,共15分)

1.真核微生物核糖体类型为 _______ 。

2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为_____ 。

3.研究细菌遗传、代谢性能常采用 _____ 时期的细胞。4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______。

5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 ________ 。 6.微生物细胞的主要组成元素是______，_____，_______和_______。 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成。

8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称 ______ 。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为______。 10.根瘤菌可与 _________共

绪论.ppt

1.微生物的分类及原核细胞型与真核细胞型的区别？

2.近年微生物学得到了迅速地发展，主要表现在哪些方面？ 3.医学微生物学未来发展方向是什么？ 第01章 细菌的形态与结构.ppt 1.细菌有哪3种形态？

2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些？特殊结构各有何作用？ 3.G+菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成？ 4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌？ 5.简述革兰染色法操作步骤 第02章 细菌的生理.ppt

1.细菌的生长繁殖条件是什么？ 2.细菌生长曲线分哪4个阶段？

3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型？ 4.细菌合成代谢产物有哪几种？

第03章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全.ppt 1.常用的消毒剂有哪些种类? 2.简述化学消毒剂的杀菌机制。

3.湿热灭菌有哪些方法? 各有何用途?

4.筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。

5.在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好?

6.当从事病原生物学安全实验室工作时，应考虑哪些与生物安全相关的问题？ 第04章 噬菌体.ppt

1.噬菌体的概念及其特征。 2.毒性噬菌体和温和噬菌体、前噬菌体、溶原性细菌、溶原性转换的概念及特征。 3.溶

1958年某城市炼钢工人不慎大面积烧伤，并造成细菌性感染，经检测为铜绿 假单胞菌(绿脓杆菌)，使用了当时仅有的几种抗生素治疗，未取得明显疗效，后经某医学院分离出此菌，并找到该菌对应的特异性噬菌体，经该噬菌体治疗后取得明显疗效。

思考题：噬菌体治疗后获得明显疗效的相关机制及其此案例给予的启示。

王小姐前段时间嘴角边长了一个小疖，红肿间可见一小脓点，自觉不好看，就对着镜子将小、肿疖挤了。可第二天起来发觉面部红肿，并恶寒、发热、头痛、全身不适，到医院后出现意识模糊，经医生检查，诊断为颅内化脓性感染。

思考题：患者面部疖肿为何导致颅内化脓性感染?

患者，男，72岁。 因反复咳嗽、咳痰20余年，加重5天就诊，临床诊断为慢性支气管炎急性发作。该患者曾用过的抗菌药物主要包括复方新诺明、氨苄西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、头孢氨苄等，痰标本微生物学检查发现肺炎克雷伯菌，药物敏感试验结果显示该病原菌对复方新诺明、氨苄西林、左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、头孢氨苄均为耐药。

思考题：

1．该患者曾用过的抗菌药物分别属于哪些种类?

2．该细菌对这些不同种类抗菌药物形成耐药性的机制是什么?

3．在患者的后续治疗中应当

成中医微生物学名词解释与问答题

原核细胞型生物：其细胞核无核膜、核仁，呈环状裸DNA结构，包括细菌，放线菌，螺旋体，支原体，立克次体和衣原体。

真核细胞型微生物：细胞核分化程度高，有核膜，核仁，细胞器完整，包括真菌和原虫。 非细胞型微生物：结构最简单，最小的微生物，仅有一种核酸类型，只能在活细胞内生长增殖。包括病毒，亚病毒，阮粒。

L型菌：细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成抑制，在高渗环境下仍可存获的细菌。

选择性培养基：在培养基中加入抑制剂，目的是抑制标本中的杂菌生长，有助于对所选择的细菌种类的生长。

外毒素：多数革兰阳性菌和少数阴性菌在生长繁殖过程中释放的到菌体外的蛋白质。 内毒素：革兰阴性菌细胞壁的脂多糖，当菌体死亡崩解后游离出来的。

脂多糖：有脂质A，核心多糖和特质多糖三部分组成，即G阴菌的内毒素。 菌落：单个细菌分裂繁殖成 一堆肉眼可见的细菌集团。

对数期：细菌在对数期以恒定的几何级数增长，生长曲线图上细菌数的对数呈直线上升，达到顶峰状态，是研究细菌的生物学性状的最佳时期。 MRSA：甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌。 HLARE：氨基糖苷类高水平耐药。

MIC：在试管或小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度

1. 微生物的概念

自然界的一大群体形微小、结构简单、 肉眼直接看不见，必须籍助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物的总称。

2. 微生物的特点

1.个体微小,但具有一定的形态、结构和功能。

2.种类多,数量大，在自然界中分布广泛。 3.适宜环境中繁殖迅速,易变异。

3. 自然界微生物的种类

1. 非细胞型微生物：无典型的细胞结构 ，活细胞内繁殖，只有一种核酸(DNA\\RNA)——病毒(virus)。

2. 原核细胞型微生物：细胞的分化程度较低 ，是一类仅有原始的核质，无核膜核仁，缺乏完整细胞器的微生物——细菌（细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌）

3. 真核细胞型微生物：一类细胞分化程度高，有核膜，核仁和染色体，胞质内有完整细胞器的微生物——真菌(fungus)。

非细胞原核细胞型 真核细胞型微生型 微生物 物 微生物 区别 无细胞拟核，无核细胞核，有核仁、结构，仁、核膜 核膜，细胞器完无产生只有核糖体 整 能量酶，一种核酸,只能在活细胞内增殖 种类 病毒 细菌（狭义） 真菌 支原体 衣原体 螺旋体 立克次体 放线菌（广义）

4.微生物学（补充）