组培培养基的配方
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组培培养基实验问答 文档
组培实验遇到的常规问题
1.有些植物在组培生根阶段会把大量元素和糖减半,我应根据什么来判断是否需要减半? 答:在组培过程中,我们提起配方往往只局限于激素的配比和添加物的使用,其实对基本培养基的构成和培养条件(温度、光照、湿度、PH等)都属于配方的范畴。在这方面的调整主要是根据实际培养状况灵活调整。在生根阶段,试验证明培养基高渗透势或液体培养基有利于营养素和激素的运转,有利于根的发生和形成质量,因此大部分植物在生根过程需要调整基本培养基的组成。但具体需不需要应该通过对比试验确定。
2.什么是滤纸桥生根?
答:1)滤纸桥生根技术是分化苗直接瓶外生根技术,其作用主要是简化生根环节,提高炼苗成活率,降低组培成本,同时还可以对污染苗进行最大程度的利用。
3.组织培养中出现黄化的原因有几种?
答:黄化是指在组培过程中由于培养基成分、环境、激素、碳水化合物等各种因素引起的幼苗整株失绿,全部或部分叶片黄化、斑驳。这一现象在植物组织培养中比较常见,特别在部分木本花卉中较为常见,引起黄化的主要原因是培养基中Fe的含量不足;各矿质营养不均衡;培养环境通气不良,瓶内乙烯含量升高;激素配比不当;糖用量不足或长时间不转移糖已耗尽;PH值变化过大;培养温度不适;光照不足等。
解决的方
红香蕉组培培养基的优化研究
采用正交设计法,研究红香蕉组培培养基中的无机盐、蔗糖及细胞分裂素等重要组成成分和细胞分裂素6-BA与生长素NAA的浓度配比对红香蕉快繁增殖的影响。结果表明:培养基中无机盐浓度对芽的诱导作用大于蔗糖浓度,细胞分裂素影响最小;在6-BA4.5mg/L的基础上,配合加入NAA0.3mg/L,芽的增殖效果更好。红香蕉增殖培养基最优化组合为:MS+6-BA4.5mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖2%。
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广西农业科学
20 0 2年第 2期
6 5
红香蕉组培培养基的优化研究黎炎(广西农科院经作所南宁 5 0 0 ) 30 7
黄记生(广西农科院生物所 )
摘要:用正交漫计法,究红香蕉组培培养基中的无机盐、采研蔗糖及细胞分裂素等重要组成成于和细胞分裂素 6,一
B A与生长索 NAA的浓度配比对红香蕉快繁增殖的影响.结果表明:培养基中无机盐浓度对芽的诱导作用大十
蔗糖浓度 .细胞分裂素影响最小; 6 A 4 5 g I在一B . m/的基础上,配台加入 NAA03/芽的增殖效果更好。红香 mg[.蕉增殖培养基最优化组合为:+6 A 4 5/+NAA0 3/ 4蔗糖 2。 MS~B .mg| . mgI -
146种培养基配方
146种培养基配方
1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)
牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 pH
水
3g 5g 10g 15~20g 7.0~7.2 1000mL
2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用) 可溶性淀粉
硝酸钾 氯化钠 磷酸氢二钾 硫酸镁 硫酸亚铁 琼脂 水 pH
20g 1g 0.5g 0.5g 0.5g 0.01g 20g 1000mL 7.2~7.4
配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。121℃灭菌20min。 查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)
硝酸钠 磷酸氢二钾 氯化钾 硫酸镁 硫酸亚铁 蔗糖 琼脂 水 pH
2g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 30g 15~20g 1000mL
自然
121℃灭菌20min。
4、马丁氏(
实验室平板培养基配方 -
实验室用平板培养基配方
1.MRS培养基:
液体:蛋白胨 10g 牛肉膏 10g
柠檬酸铵2g 乙酸钠 5g(无水乙酸钠3g) 酵母粉 5g 葡萄糖 20g 磷酸氢二钾 2g 吐温 1.0ml 盐液甲 5.0ml 蒸馏水: 1000ml 溴甲酚紫 0.8g
[备注]盐液甲的配制:MgSO4.7H2O 11.5g ,MnSO4.4H2O 2.8g
蒸馏水 100ml
固体:在MRS液体培养基中加入1.6%~2%的琼脂
PH=6.5~7.0 121℃灭菌30min
2.YB培养基:
液体:蛋白胨 5g 葡萄糖 5g 酵母粉 5g 磷酸氢二钾4g 3.08%硫酸锰 1.0ml 蒸馏水 1000ml 固体:在YB液体培养基中加入1.4%~1.7%的琼脂 PH=6.0~7.0 121℃灭菌30min
3.PYD培养基:
液体:酵母粉
DMEM培养基
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
基本简介
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
主要特点
(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等; (2)维生素含量为依格尔培养基的4倍; (3)含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸; (4)含有微量的铁离子。
主要成分
DMEM(A) 细胞培养基(粉末型)成分
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 化合物名称 无水氯化钙 .2H 2 O 硝酸铁 .9H 2 O 氯化钾 无水硫酸镁 氯化钠 无水磷酸二氢钠 丁二酸 丁二酸钠 L-盐酸精氨酸 L-盐酸胱氨酸 甘氨酸 L-盐酸组氨酸 L-异亮氨酸 L-亮氨酸 含量 (mg/L) 265.00
DMEM培养基
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
基本简介
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
主要特点
(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等; (2)维生素含量为依格尔培养基的4倍; (3)含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸; (4)含有微量的铁离子。
主要成分
DMEM(A) 细胞培养基(粉末型)成分
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 化合物名称 无水氯化钙 .2H 2 O 硝酸铁 .9H 2 O 氯化钾 无水硫酸镁 氯化钠 无水磷酸二氢钠 丁二酸 丁二酸钠 L-盐酸精氨酸 L-盐酸胱氨酸 甘氨酸 L-盐酸组氨酸 L-异亮氨酸 L-亮氨酸 含量 (mg/L) 265.00
常用培养基的配制
常用培养基的配制
(一)营养琼脂培养基
【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。
【成分】牛肉膏 3g
NaCl 5g 蛋白胨 10g 琼 脂 20g
【pH值】7.2±0.2
【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml,经121.3℃ 30min高压灭菌备用。 (二)蛋白胨水培养基
【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。
【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g
【pH值】7.6 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中,过滤,分装于试管,每管2~3ml,经121.3℃ 20min高压灭菌备用。
(三)半固体培养基
【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。 【成分】蛋白胨 10g
氯化钠 5g 琼脂 2.5~3g
【pH值】7.6
【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中,加热溶解,分装于试管,每管3~4ml,经 121.3℃ 20min高压灭菌备用。
(四)营养肉汤培养基
【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等,也可用于消毒效果的测定。 【成
发酵培养基的优化
文献综述
发酵培养基的优化
申请学位: 院 (系): 专 业: 姓 名: 学 号: 指导老师:
二 O 一 五 年 六 月 五 日
学士学位 药学院 生物技术 张永芳 114080107 张小华(讲师)
文献综述:
发酵培养基的优化
张永芳:114080107 指导老师:刘向勇
【摘要】:发酵,这一门悠久的技艺,在古今中外的生产生活与科学研究中扮
演着不可或缺的角色。在实验室发酵过程中,经常需要通过试验来寻找研究对象的变化规律,这些对象包括培养基的设计、工艺参数等;而这些变化规律的寻找就要通过科学的试验设计与数据分析来实现。通过对规律的研究达到各种实用的目的,比如提高产量、降低消耗、提高产品质量等,特别对于新菌种、新产品的试验。本文对发酵培养基优化的基本方向进行了综述,并比较了常用的试验设计与数据分析方法。
【关键词】:发酵、发酵培养基、优化、最优组合、响应面法优化 【内容】:
在工业化发酵生产中,发酵培养基的设计是十分重要的,因为培养基的成分对产物浓度、菌体生长都有重要的影响。培养基优化,是指面对特定的微生物,通过实验手段配比和筛选找到一种最适合其生长及发酵的培养基,在原来的基础上提高发酵产物的产量,以期达到生产最大发酵
常用培养基的制备
常用培养基的制备
技能训练3 常用培养基的制备
常用培养基的制备
实训目标熟悉培养基制备的基本程序 会制备常用的培养基
常用培养基的制备
仪器材料高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、 量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、 营养琼脂培养基(或伊红美兰琼脂培养基、三 糖铁琼脂培养基、SS琼脂培养基、麦康凯琼脂 培养基)等
常用培养基的制备
方法步骤
(一)营养琼脂培养基 (二)血液琼脂培养基 (三)肉汤培养基 (四)半固体培养基
常用培养基的制备
(一)营养琼脂培养基计算 称量 溶化 倒平板或倒试管 灭菌 无菌检验 备用
常用培养基的制备
1.计算:根据营养琼脂培养基的说明书了解营养琼脂粉与水的比 例,一般是1000 ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g,再根据 培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量。 营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000 (g) 其中: 15代表一个平板需要营养琼脂约15 ml; n代表要做的培养基平板的数量
常用培养基的制备
2.称量:用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量,用量筒量出相 应的 蒸馏水的量,要尽量准确。
常用培养基的制备
3.溶化:将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中,于电炉上加热溶 化,边加热边搅拌,沸腾时立即从
鉴别培养基
麦康凯琼脂
麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基,它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌,还能抑制革兰氏阳性菌生长,发酵乳糖的细菌能使培养基变红,这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。
麦康凯抑制阳性菌的生长,是因为其中加了结晶紫。 MACCONKEY AGAR
MacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment cre