疟原虫涂片镜检

疟原虫镜检操作规程

1.标本采集

1.1标本采集前病人的准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20小时左右采血。 1.2标本种类：全血或末梢血。 1.3标本要求：厚血片溶血要及时。 2．标本运送：室温运送。 3．标本拒收标准：被细菌污染。 4．操作步骤 4.1 薄血片法：

4.1.1在洁净玻片上，滴血液标本1滴，以常法推制成薄片。 4.1.2 血膜完全干燥后即可用瑞氏法染色，干后用油镜镜检。 4.2厚血片法：

4.2.1在洁净玻片上，滴血液标本2滴。

4.2.2用推片将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。

4.2.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血约5分钟后倾去溶血液。

4.2.4 不必待干，进行瑞氏染色，干后镜检。 5．结果判断

在油镜下观察，薄片须至少100个视野，厚血片至少20个视野，才能报告“未见疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。

疟原虫胶体金法简易操作步骤

原理

基于双抗体夹心法工作原理，检测时，滴加5μL全血样本于试剂卡加样孔处，随之滴加4滴裂解液，裂解后的样本在毛细管效应下向上层析。如样本中含有恶性疟原虫特异性乳酸脱氢酶（pf

疟原虫镜检技术操作规范

1.目的

指导实验室检验人员正确使用和维护全显微镜，完成疟原虫检测项目 2、范围

适用于实验室检验人员 3、职责

检验人员需按照本操作规程使用和维护全显微镜, 确保仪器在最佳状态下运行，以便得到正确的结果，提高结果准确率。 4、作业指导 4.1.需用器材

显微镜 单、双目显微镜均可，目镜一般以5X为宜（有的用10X），物镜必须用油镜（100X）、镜油 、擦镜纸 、二甲苯或酒精乙醚 4.2操作步骤

4.2.1、血膜上滴加镜油 滴一滴镜油在血膜上，再将血片置载物台上。

4.2.2、镜检 用目镜5×和物镜10～40×低倍镜检下找到血膜，再将物镜转换成油镜（100×），查找疟原虫，吉氏染色较好的血膜，红细胞呈淡红色，嗜酸性细胞的颗粒呈鲜红色，淋巴细胞及疟原虫胞浆呈蓝色或淡蓝色，白细胞的核呈紫蓝色，疟原虫的核呈红色。

4.2.3、观察血膜的方法 镜检时从血膜的一端开始，自上而下，

1

自左而右，逐个视野顺序查看。发热病人血片至少要查完200个视野以上，普查带虫血片则需看完全片，方可报告结果。镜检疟原虫一般只查厚血膜，薄血膜作为疟原虫的分类定种。 4.3、结果报告 结果报告分阳性和阴性，阳性者至少

疟原虫镜检操作规程

1.标本采集

1.1标本采集前病人的准备：间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10余小时采血；恶性疟患者，应在发作后20小时左右采血。 1.2标本种类：全血或末梢血。 1.3标本要求：厚血片溶血要及时。 2．标本运送：室温运送。 3．标本拒收标准：被细菌污染。 4．操作步骤 4.1 薄血片法：

4.1.1在洁净玻片上，滴血液标本1滴，以常法推制成薄片。 4.1.2 血膜完全干燥后即可用瑞氏法染色，干后用油镜镜检。 4.2厚血片法：

4.2.1在洁净玻片上，滴血液标本2滴。

4.2.2用推片将血液由内向外转涂成直径约1cm、厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。

4.2.3 在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血约5分钟后倾去溶血液。

4.2.4 不必待干，进行瑞氏染色，干后镜检。 5．结果判断

在油镜下观察，薄片须至少100个视野，厚血片至少20个视野，才能报告“未见疟原虫”；发现虫体后还应在薄血片上进行分类鉴别。

疟原虫胶体金法简易操作步骤

原理

基于双抗体夹心法工作原理，检测时，滴加5μL全血样本于试剂卡加样孔处，随之滴加4滴裂解液，裂解后的样本在毛细管效应下向上层析。如样本中含有恶性疟原虫特异性乳酸脱氢酶（pf

疟原虫镜检技术操作规范

1.目的

指导实验室检验人员正确使用和维护全显微镜，完成疟原虫检测项目 2、范围

适用于实验室检验人员 3、职责

检验人员需按照本操作规程使用和维护全显微镜, 确保仪器在最佳状态下运行，以便得到正确的结果，提高结果准确率。 4、作业指导 4.1.需用器材

显微镜 单、双目显微镜均可，目镜一般以5X为宜（有的用10X），物镜必须用油镜（100X）、镜油 、擦镜纸 、二甲苯或酒精乙醚 4.2操作步骤

4.2.1、血膜上滴加镜油 滴一滴镜油在血膜上，再将血片置载物台上。

4.2.2、镜检 用目镜5×和物镜10～40×低倍镜检下找到血膜，再将物镜转换成油镜（100×），查找疟原虫，吉氏染色较好的血膜，红细胞呈淡红色，嗜酸性细胞的颗粒呈鲜红色，淋巴细胞及疟原虫胞浆呈蓝色或淡蓝色，白细胞的核呈紫蓝色，疟原虫的核呈红色。

4.2.3、观察血膜的方法 镜检时从血膜的一端开始，自上而下，

1

自左而右，逐个视野顺序查看。发热病人血片至少要查完200个视野以上，普查带虫血片则需看完全片，方可报告结果。镜检疟原虫一般只查厚血膜，薄血膜作为疟原虫的分类定种。 4.3、结果报告 结果报告分阳性和阴性，阳性者至少

疟原虫生活史

疟原虫是疟疾的病原体。 寄生于人体的疟原 疟原虫是疟疾的病原体。 虫有间日疟原虫(Plasmodium vivax p.v）、 虫有间日疟原虫 ）、 恶性疟原虫（ 恶性疟原虫（ Plasmodium falciparum p.f） ） 三日疟原虫（ 三日疟原虫（Plasmodium malariae p.m） ） 及蛋形疟原虫（ 及蛋形疟原虫（ Plasmodium ovale p.o）四 ） 种，分别引起间日疟、恶性疟、 三日疟和卵 分别引起间日疟、恶性疟、 形疟。 形疟。

疟原虫生活史

人疟原虫完成其生 活史需要人和按蚊 两个宿主。 两个宿主。在按蚊 体内进行有性繁殖， 体内进行有性繁殖， 按蚊是疟原虫的 是疟原虫的终 按蚊是疟原虫的终 末宿主； 末宿主；在人体内 进行无性增殖，人 进行无性增殖， 是疟原虫的中间宿 是疟原虫的中间宿 主。

疟原虫在蚊体内的发育

当雌性按蚊叮吸疟疾患者 雌性按蚊叮吸疟疾患者 血液时， 血液时，各期疟原虫随同 血液进入蚊胃。此时， 血液进入蚊胃。此时，除 雌、雄配子体能在蚊胃内 继续发育外，其他各期疟 继续发育外， 原虫与红细胞均被胃液消 化。雌配子体的核经减数 分裂发育为不活动的圆形 雌配子。与此同时，

痰涂片镜检及痰培养 实验室质量保证手册

编制：汪平帮

审核：李志波

批准：李志波

2012-04-01

1

浏阳市人民医院 痰涂片镜检及痰培养 实验室质量保证手册 文件编号：lryj-jh-01 生效日期：2012.04.01 版本号：2.0 第 1 页 共 32 页 医学检验中心

01.目 录 序号 主 题 内 容 页 码 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 术语注释 绪论 目的和任务 实验室网络及职能 痰涂片的意义 分枝杆菌的形态和结构 检查对象 涂片抗酸染色检查方法 痰涂片实验室质量保证 室内质量控制 室间质量评估 分支杆菌分离培养标准操作程序 2 4 5 5 6 7 8 11 18 18 21 28

浏阳市人民医院 医学检验中心 痰涂片镜检及痰培养 实验室质量保证手册 文件编号：lryj-jh-01 生效日期：2012.04.01 版本号：1.0 第 1 页 共 32 页 02.修 订 页

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微生物类群的分类

原生动物

1. 1 肉足虫 其细胞质可伸缩变动而形成伪足,作为运动和摄食的胞器,常见的有变形虫、表壳虫和太阳虫，大量出现预示着出水水质差，如活性污泥驯化初期。

1. 2 鞭毛虫 具有一根或一根以上的鞭毛，鞭毛是其运动器官。常见的有滴虫、聚屋滴虫、眼虫、波豆虫、豆形虫和粗袋鞭虫等。

1. 3 纤毛虫 动物周身表面或部分表面具有纤毛，作为运动或摄食的工具，具有胞口、口围等吞噬和消化的器官,分固着型和游泳型两种,喜欢吃游离细菌（游离细菌也可视为污染物）及有机颗粒，与废水生物处理的关系密切。 常见的游泳型 有漫游虫、草履虫、管叶虫、斜管虫等（预示出水较差，污泥驯化仍在继续）；常见的固着型有钟虫、盖虫、独缩虫、聚缩虫、吸管虫、累枝虫等。（预示着出水水质好，污泥驯化佳）

1. 4 后生动物 在活在活性污泥系统中是不经常出现的,在出水水质较好或较稳定时出现,常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。性污泥系统中是不经常出现的,在出水水质较好或较稳定时出现,常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。根据污水厂两年的镜检记录,红斑票贝体虫平时几乎不见,多在8 ,9 月份出现,这时水温较高,一般为22 ℃左右。

水蚤属于节肢动物门、甲壳纲、鳃足亚纲。俗称鱼虫。体

微生物类群的分类

原生动物

1. 1 肉足虫 其细胞质可伸缩变动而形成伪足,作为运动和摄食的胞器,常见的有变形虫、表壳虫和太阳虫，大量出现预示着出水水质差，如活性污泥驯化初期。

1. 2 鞭毛虫 具有一根或一根以上的鞭毛，鞭毛是其运动器官。常见的有滴虫、聚屋滴虫、眼虫、波豆虫、豆形虫和粗袋鞭虫等。

1. 3 纤毛虫 动物周身表面或部分表面具有纤毛，作为运动或摄食的工具，具有胞口、口围等吞噬和消化的器官,分固着型和游泳型两种,喜欢吃游离细菌（游离细菌也可视为污染物）及有机颗粒，与废水生物处理的关系密切。 常见的游泳型 有漫游虫、草履虫、管叶虫、斜管虫等（预示出水较差，污泥驯化仍在继续）；常见的固着型有钟虫、盖虫、独缩虫、聚缩虫、吸管虫、累枝虫等。（预示着出水水质好，污泥驯化佳）

1. 4 后生动物 在活在活性污泥系统中是不经常出现的,在出水水质较好或较稳定时出现,常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。性污泥系统中是不经常出现的,在出水水质较好或较稳定时出现,常见的有轮虫、红斑票贝体虫等。根据污水厂两年的镜检记录,红斑票贝体虫平时几乎不见,多在8 ,9 月份出现,这时水温较高,一般为22 ℃左右。

水蚤属于节肢动物门、甲壳纲、鳃足亚纲。俗称鱼虫。体

原虫概论、溶组织内阿米巴、结肠内阿米巴*、

蓝氏贾第鞭毛虫*、弓形虫、阴道毛滴虫*、杜氏利氏曼原虫* 一、名词解释 1 medical protozoan 2 trophozoite 3 cyst

4 opportunistic protozoan

5 阿米巴触杀机制(amebic contact lysis) 6 烧瓶样溃疡(flask-like ulcer) 7 阿米巴肝脓肿(amebic liver abscess) 8 弓形虫的假包囊与包囊 9 先天性弓形虫病 二、选择题 A型题

1 医学原虫的基本结构是:

A 表膜、基质和细胞器 B 表膜、胞质和胞核 C 核膜、核质和核仁 D 胞质、胞核和细胞器 E 表膜、细胞器和胞核 2 不属于原虫运动细胞器的结构是:

A 纤毛 B 线粒体 C 伪足 D 鞭毛 E 波动膜 3 The medical protozoan is:

A 危害人类的原生动物 B 人体的寄生性原虫

C 寄生于人体和家畜的原虫 D 寄生于人

精品资源

实验观察人血涂片

本实验在中学是为学习血涂片制作，了解红细胞与白细胞的形态特点。但常因怕取血、和推片不匀、染色出现色渣及白细胞观察不清等而不作此实验。为此教师必须解决涂片技术及观察指导等问题。

一、目的要求

（一）了解本实验的准备。

（二）掌握血涂片制作技术及注意事项。

（三）掌握红细胞与白细胞的特征。

二、材料用具

采血针（三棱针或大号缝衣针）、脱脂棉球、酒精棉球、载片、显微镜、滴管、伊红-甲基蓝染液、血细胞彩色挂图或剪贴图。

三、实验步骤

（一）按照生理卫生本实验指导制作涂片观察（染色后再观察）。

（二）讨论本实验关键及如何指导实验。

四、实验准备

（一）配制伊红-甲基蓝染液

实验前半年，取伊红-甲基蓝粉末0.1克（旧称瑞氏染剂），放在研缽内加适量甘油研磨。量取纯甲醇60毫升，少许倒入研缽内使染料溶解，已溶部分移入棕色瓶中，未溶部分再加少许甲醇研磨，直到全部溶解为止。把装染液的棕色瓶密封放阴暗处保存。如来不及配制，可就近向医院化验室索取。

（二）配制缓冲液

用缓冲液作血涂片稀释液效果更好。取磷酸二氢钾（KH2PO4）6.63克，磷酸氢二钠（Na2HPO4）2.56克，溶于蒸馏水或去离子水1，000毫升中其pH值是6.4的缓冲液。

（三）培训小组长

血涂片的关键在推