橘皮精油提取方法

桔子皮多糖的提取

一丶实验目的

（1）学习从植物中提取多糖及多糖含量测定的方法。 （2）了解换算因子的计算并掌握标准曲线的制作。

二丶仪器与药品 材料：新鲜的桔子皮

试剂：石油醚；无水乙醇；浓硫酸；三氯甲烷；正丁醇；标准葡萄糖溶液（0.04mg/mL)；苯酚溶液（5%）

仪器：电热恒温水浴箱；电热鼓风干燥箱；高速中药粉碎机；电子天平；200分光光度计；旋转蒸发器；循环水式多用真空泵

三丶实验步骤

（1）桔子皮多糖的提取过程

称取50.00g样品粉末，置于500mL圆底烧瓶中，加入500mL80%的乙醇，回流2h，脱去表面脂肪、抽滤、风干，重复1次。脱脂后的样品，在恒温水浴中热水浸提2h，过滤后.滤渣在相同条件下重复浸提1次。将两次浸提液减压过滤，去除滤渣，合并两次滤液。将合并滤液在真空旋转蒸发器中浓缩至小体积，得粗多糖。往粗多糖里加入1;1的石油醚，去色素。挥干溶剂后，用Sevag试剂(氯仿∶正丁醇=4∶1)除蛋白，连续操作多次，直到完全脱除蛋白为止。在脱蛋白后的多糖溶液中加入3倍95%乙醇，沉淀用乙醇、丙酮及乙醚反复洗涤，经抽滤、真空干燥后得到精制多糖。

（2）换算因子的测定

精密称取干燥至恒重的精制桔子皮多糖20

柑橘皮中果胶的提取

实验方案

一、目的要求:

1．学习从柑橘皮中提取果胶的方法。 2．进一步了解果胶质的有关知识。

二、实验原理 :

果胶物质广泛存在于植物中，主要分布于细胞壁之间的中胶层，尤其以果蔬中含量为多。不同的果蔬含果胶物质的量不同，山楂约为6.6%，柑橘约为0.7～1.5%，南瓜含量较多，约为 7%～17%。在果蔬中，尤其是在未成熟的水果和果皮中，果胶多数以原果胶存在，原果胶不溶于水，用酸水解，生成可溶性果胶，再进行脱色、沉淀、干燥即得商品果胶。从柑橘皮中提取的果胶是高酯化度的果胶，在食品工业中常用来制作果酱、果冻等食品。

三、实验药品: 仪器：

恒温水浴、布氏漏斗、抽滤瓶、玻棒、尼龙布、表面皿、精密 pH 试纸、烧杯、电子天平、小刀、真空泵。 材料：

柑橘皮（新鲜）。 试剂：

1．95%乙醇、无水乙醇。 2．0.2 mol/L 盐酸溶液。 3．6 mol/L 氨水。 4．活性炭。

四、操作步骤 :

1．称取新鲜柑橘皮20 g（干品为8 g） ，用清水洗净后，放入250 mL 烧杯中，加120 mL 水， 加热至90 ℃保温5～10 min，使酶失活。用水冲洗后切成3～5 mm 大小的颗粒，用50 ℃左 右的热水

薰衣草花精油的提取

一、实验目的
1．了解植物性精油的提取技术；
2．学习和掌握薰衣草花精油的提取方法和操作过程。
二、实验原理
薰衣草(Lavender)属紫系唇形科(Labiatae)，是一种多年生香料植物，植株干后有浓郁香气，素有“香料之王”的称号，是当今世界重要的香精原料。薰衣草花穗提取出的精油清香扑鼻、浓郁芬芳，用途非常广泛，具有驱虫、除异味、抗菌、镇静、催眠、缓解精神压力等作用。薰衣草是兼有药用植物和香料植物共有属性的植物类群之一。
精油的提取方法有很多种，归纳起来有如下九种：榨磨法、水蒸气蒸馏法、有机溶剂浸提法、超临界CO2萃取法、超声波辅助萃取法、微波辐照诱导萃取法、吸附法、微胶囊-双水相萃取法和酶提取法。现代精油的提取技术趋向于提取更充分、分离产品
纯度更高。本实验采用了有机溶剂蒸馏法、微波辐照辅助法和超声波辅助法提取薰衣草花的精油。
1．有机溶剂蒸馏法
有要溶剂蒸馏法是用有机溶剂对芳香原料(包括含精油的植物各部分、树脂树胶以及动物的泌香物质等)作选择性的蒸馏，排除那些不重要的成分，有选择地提取香味物质。有机溶剂蒸馏法的优点是操作简单，且可通过选择不同的萃取有机溶剂而有选择地提取致香成分。
2．微波辐照辅助提取法
微波辐照辅助提取法是促使香料植物

分类号 TQ654+.2 密 级 GK

学位代码 308 学校代码 10298 学 号 3070300

南 京 林 业 大 学

研 究 生 硕 士 学 位 论 文

论文题目：杉木根精油提取及深加工研究 作 者：陈科 专 业：化学工艺 研究方向：精细化工 指导教师：朱 凯 教授

二○一○年 六 月

致 谢

本论文是在朱凯教授的严格要求及悉心指导下完成，从论文的选题、实验的开展及论文的撰写，都凝结着朱都是的心血和智慧。在三年的学习期间，导师渊博的学术知识、严谨的治学态度、朴实的为人和忘我的工作热情给我留下了深刻的印象，并使我受益终身！值此论文完成之际，谨向朱老师表示衷心的感谢！

在论文工作期间，林中祥、季永新、朱新宝、毛连山、杨云等老师给予了大量指导和帮助，向诸位老师表示感谢！

感谢林产化工专业的周建斌老师在实验阶段提供的仪器及设备的帮助！ 感谢本课题组研究生任静、云亮、吴昊和本科生蒋晨武、黄杰、陆洲在论文期间给予的大力帮助！

最后感谢我的父母及好友在学习和生活中给予我的关心和支持！

陈 科 2010年6月

摘 要

杉木根含有丰富的杉木

分类号 TQ654+.2 密 级 GK

学位代码 308 学校代码 10298 学 号 3070300

南 京 林 业 大 学

研 究 生 硕 士 学 位 论 文

论文题目：杉木根精油提取及深加工研究 作 者：陈科 专 业：化学工艺 研究方向：精细化工 指导教师：朱 凯 教授

二○一○年 六 月

致 谢

本论文是在朱凯教授的严格要求及悉心指导下完成，从论文的选题、实验的开展及论文的撰写，都凝结着朱都是的心血和智慧。在三年的学习期间，导师渊博的学术知识、严谨的治学态度、朴实的为人和忘我的工作热情给我留下了深刻的印象，并使我受益终身！值此论文完成之际，谨向朱老师表示衷心的感谢！

在论文工作期间，林中祥、季永新、朱新宝、毛连山、杨云等老师给予了大量指导和帮助，向诸位老师表示感谢！

感谢林产化工专业的周建斌老师在实验阶段提供的仪器及设备的帮助！ 感谢本课题组研究生任静、云亮、吴昊和本科生蒋晨武、黄杰、陆洲在论文期间给予的大力帮助！

最后感谢我的父母及好友在学习和生活中给予我的关心和支持！

陈 科 2010年6月

摘 要

杉木根含有丰富的杉木

综述中药提取方法

摘要 以中药提取方法的本质和影响提取作业的因素为理据，分析国内中药厂提取方法 关键词 中药提取方法 1前沿

近年来有关中药提取方法的论述有很多，然而有效成分的提取率仍然是现今国内中药制药工业现代化的瓶颈。尽管近年来国内在中药提取生产中推出了一些新工艺，如超声场强化提取、微波提取、超临界流体提取等，但当下的主流仍是浸提技术。浸提技术是应用溶剂提取固体原料中某一或某类成分的提取分离操作，又称固液萃取。目前在中药生产过程中，常用的中药浸提方法有煎煮法、浸渍法、渗漉法、回流法、水蒸气蒸馏法等。

面对众多中药提取方法如何抉择是一个复杂的问题，因为它牵涉到生产设备和生产条件等许多因素。加上如今中药提取的规模较大，尤其考虑到连续生产，即使在实验中取得成果，在实际情况下还要经过长时间的实践检验。还有前面提到过的提取新工艺，其提取物往往是化学结构明确的物质，与传统中药生产完全是两回事，所以生产传统中药的厂家下不了决心去尝试新工艺，生产者情愿随大流，以避免风险。

提取方法的不同，提取等量有效成分所需原料和能源

也不尽相同，资源和能源对世界经济和人类生存环境的影响越来越被重视。可持续发展经济和资源节约型社会的概念已经被全世界广泛认同

水蒸气蒸馏法提取橙子皮中的香精油

摘要 利用挥发油提取蒸馏装置进行橙子皮中香精油的提取实验，不但减少了一项热源、节约实验经费，而且具有安装操作简单、减少污染和缩短时间等优点，有利于在学生实验中推广，教学效果好，符合绿色化学的要求。

关键词 橙子皮 水蒸气蒸馏 香精油

橙子皮中主要含有橙皮苷（Hesperidin）、果胶（Pectin）、胡萝卜素、香精油等多种有效成分，它们在食品工业及食品添加剂等方面都具有重要的用途［1］。其中，香精油（橙子皮精油）可作为饮料、糖果的矫味剂、赋香剂，在花露水、香水、香醋、牙膏、香皂等日用品中也有广泛的用途。香精油的主要成分是一种无色透明、具有桔香味的单萜类烯烃——柠檬烯。它是一种很好的天然溶剂［2］，能有效地除去厨房、浴室、衣物等各种物件上的油脂和污垢，在大多数情况下，柠檬烯类产品代替了具有腐蚀性的碱性清洁剂在家庭和机械设备中使用。

从橙子皮中提取香精油的主要方法有传统水蒸气蒸馏法、压榨法和溶剂浸提法［3］。其中，传统水蒸气蒸馏［4］是有机化学实验中的基本操作，一般采用溴苯、苯胺、苯甲醛或1辛醇等作为实验原料。由于这几种药品有毒且具有难闻的气味，不仅损害师生的身体健康，而且还会污染环境；同时教材中涉及到的仪器装置也

DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen, Hilden, Germany)试剂盒中文操作说明书 作者: Allanflying (站内联系TA) 发布: 2012-09-11

一．利用DNeasy? Blood & Tissue试剂盒提取样本总DNA 1．前处理： 注意：

1） 石蜡包埋组织的DNA一般小于650bp，还要视样本类型与保存年限而定。 2） 固定剂一般为福尔马林或酒精。不推荐用蛾酸固定的样本。 3） 溶解时间随样本类型和溶解状态而定。 4） 产量视样本类型和保存年限而定。推荐用50-100ul的AE缓冲液洗脱纯化的DNA。 5） 开始前要预热孵化器或水浴锅至37℃，用于操作步骤9）。 1.石蜡包埋组织的前处理 操作步骤：

1） 将小片石蜡包埋的组织（小于25mg）放入2ml离心管中（自备）。 2） 加入1200ul的二甲苯，用力涡旋震荡。 3） 最大转速室温（15-25°）离心5分钟。 4） 移液枪吸去上清。小心不要吸去沉淀。

5） 往沉淀中加1200ul的

各种DNA提取方法提取方法提取方法提取方法

一，基因组DNA提取方法

制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。主要是CTAB方法，其他的方法还有1物理方式:玻璃珠法超声波法研磨法冻融法。2化学方式：异硫氰酸胍法碱裂解法3生物方式:酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有:硅质材料、阴离子交换树脂等

试验步骤： 1、贴壁细胞用胰酶消化，离心收集。 2、细胞重悬于冰冷的PBS漂洗一次，离心收集。试验步骤2再重新作一边。 3、加入5mlDNA提取缓冲液，(10mmol/LTris-cl0.1mol/LEDTAo.5%SDS)混匀。 4、加入25ul 蛋白酶K使终浓度达到100ug/ml 混匀，50℃水浴3h 5、用等体积的酚抽提一次，2500rpm离心收集水相，用等体积的（酚，氯仿，异戊醇）混合物抽提一次，2500r/min离心收集水相 6、用等体积的氯仿，异戊醇抽提一次。加入等体积的5mol/L的LiCL混匀，冰浴，10min.。 7、2500rpm离心10min.转上清于一离心管

CTAB方法提取RNA

叶片RNA的提取

（1）取叶片材料两克，液氮中研磨成细粉末。

（2）每管加入10ml65℃预热的CTAB提取液和500 l β-巯基乙醇，剧烈涡旋匀浆，65℃水浴温育30min。

（3）每管加入10ml氯仿：异戊醇（24：1），涡旋混匀，冰浴10min。4℃，12000rpm离心10min。

（4）取上清，加入1∕3体积的8M LiCl和500 l β-巯基乙醇，-20℃沉淀过夜。

（5）4℃，12000rpm离心20min。

（6） 弃上清，沉淀用4ml异硫氰酸胍变性液溶解，加入120 l β-巯基乙醇和880 l 2M Na Ac (pH4.0),混匀后加入5ml的酚：氯仿：异戊醇（25：24：

1）， 涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（7）取上清，加入等体积酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（8）取上清，加入等体积氯仿：异戊醇（24：1），涡旋混匀，冰浴5min。4℃，12000rpm离心10min。

（9）取上清，加入1∕10体积的3M NaAc(pH5.2)和2.5倍体积的无水乙醇，-20℃放置过夜。

（10）4℃，14000rpm离心