细胞生物学实验报告讨论人肝癌

实验一：细胞的形态观察及其大小测量

一、实验目的：

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

二、实验材料和仪器：

小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；

普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。

三、实验步骤：

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。

（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。 （二）细胞的大小和测量

1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜

的上透镜。

2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。

3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。

4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：

镜台测微尺的格数

实验一 细胞的形态观察及其大小测量

【实验目的】

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

【实验用品】

普通光学显微镜;目镜测微尺;镜台测微尺;载玻片;盖玻片等。

【实验材料】

小白鼠肝细胞切片;鸡血红细胞;蚕豆叶片横切片;洋葱。

【实验内容和方法】

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。注意肝细胞之间的界限、细胞的形状、细胞核的形状和数量、核仁的形状和数量、细胞质的形态构造以及细胞质和细胞核染色的区别。

（2）鸡血细胞涂片的观察：注意观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。

（2）洋葱表皮细胞的形态观察：用镊子撕取洋葱表皮，滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。在显微镜下观察的形态和结构。

（二）细胞的大小和测量

1、测微尺的使用

目镜测微尺是一块圆形玻片，中心刻有一尺，长5～10mm，分成50～100格。每格的实际长度因不同物镜的放大率和不同镜筒长度而异。镜台测微尺是在一块载玻片中央，用树胶封固一圆形的

实验一：细胞的形态观察及其大小测量

一、实验目的：

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构； 2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

二、实验材料和仪器：

小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；

普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。

三、实验步骤：

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。

（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

（1）取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。 （二）细胞的大小和测量

1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜

的上透镜。

2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。

3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。

4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：

镜台测微尺的格数

细胞生物学实验报告

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动物细胞融合

【实验目的】

⒈了解动物细胞融合的常用方法。 ⒉学习化学融合的基本操作过程。

⒊观察动物细胞融合过程中细胞的行为和变化。

【实验原理】

细胞融合是指在自发或者诱导条件下，两个或两个以上细胞合并为双核或者多核细胞的过程。目前人们已经发现有很多方法可以诱导细胞融合，包括病毒诱导融合、化学诱导融合和电激诱导融合。

⒈病毒诱导融合

仙台病毒、牛痘病毒、新城鸡瘟病毒和疱疹病毒等可以介导细胞的融合。这类病毒的被膜中含有融合蛋白，可介导病毒和宿主细胞融合，同时也可介导细胞与细胞的融合。用紫外线灭活后，这些病毒即可诱导细胞发生融合。

⒉化学诱导融合

很多化学试剂能够诱导细胞融合，如聚乙二醇(PEG)、二甲基亚砜、山梨醇、甘油、溶血性卵磷脂、磷脂酰丝氨酸等。这些物质能够改变细胞膜脂质分子的排列，在去除这些物质之后，细胞膜趋向于恢复原有的有序结构。在恢复过程中相接触的细胞由于接口处脂质双分子层的相互亲和与表面张力，细胞膜融合，胞质流通，发生融合。化学诱导方法，操作方便，诱导融合的概率比较高，效果稳定，适用于动、植物细胞，但对细胞具有一定的毒性。PEG是被广泛使用的化学融合剂。

⒊电激诱导融合

包括电诱导、激

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一、细胞形态观察及其大小测量

1.实验结果及分析

（1）细胞形态观察

图1.1 10X40倍镜下肝细胞 图1.2 10X40倍镜下血细胞

图1.3 棉花叶横切（栅栏组织细胞） （2）细胞大小测量

40×10倍下的校正数据及其数据处理 项目 台尺 目尺 根据公式计算得：每格μm数 2.412 2.414 2.412 2.414 2.410 2.412 41 170 35 145 原始数值及数据处理 41 170 28 116 20 83 平均值 33 136.8 40×10倍，棉花栅栏组织细胞（椭球形） 项目 长格数 宽格数 长μm 28 5 28 4 29 5 29 4 原始数据及数据处理 31 6 28 4 26 5 23 5 25 4 平均值 27.44 4.67 66.20 67.54 67.54 69.95 69.95 74.77 67.54 62.71 55.48 60.30 宽μm 细胞 体积μm 3 12.06 9.65 12.06 9

广 州 大 学

综合设计性实验报告

学 院 生 命 科 学 学 院

课 程 细 胞 生 物 学 实 验 实验项目 细胞培养 实验题目 小鼠肝细胞的原代培养 专 业 生物技术 年级、班别 生技142 姓 名 徐嘉宽 学 号 1414300030 任课教师 陈鲲

细胞培养

——小鼠细胞的原代培养

摘要 目的 探讨体外分离和培养小鼠肾、脑、心肌细胞的方法。方法 采用脱臼法处死新生小鼠，结合 酶消化法和组织块法对新生小鼠肾、脑、心肌细胞进行了体外分离、培养。（用

实验一 显微镜的结构及使用

[实验目的]

（一）熟悉显微镜的结构及各部件性能。 （二）掌握显微镜的使用方法。 （三）了解显微镜的维护方法。 [实验原理]

虽然显微镜的目镜和物镜的结构很复杂，但它的作用相当于一个凸透镜，其成像原理和光路图如图1所示，被检物体AB放在物镜（O1）下方的1—2倍焦距之间，则在物镜（O1）后形成一个倒立的放大实像A1B1，这个实像正好位于目镜（O2）的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛的明视距离处，即25cm,使所看到的物体最清晰，也就是说虚像A2B2是在眼球晶状体的两倍焦距之外，通过眼球后在视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3。

[实验器材]擦镜纸 字母装片 羊毛交叉擦片 普通光学显微镜 二甲苯 香柏油 三 内容与方法：

普通光学显微镜(Microscope)的外形和结构因类型不同略有差异，但基本结构和功能是相似的。（图2） （一） 1.

微镜的基本结构及功能：光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分构成。 机械部分：

（1）镜座：位于底部的金属座。一般为马蹄形，用以支持和稳定整个镜体。 （2）镜柱：镜座与镜臂相连的短柱。

（3）镜臂：镜柱上方弯曲部分

实验一 显微镜的结构及使用

[实验目的]

（一）熟悉显微镜的结构及各部件性能。 （二）掌握显微镜的使用方法。 （三）了解显微镜的维护方法。 [实验原理]

虽然显微镜的目镜和物镜的结构很复杂，但它的作用相当于一个凸透镜，其成像原理和光路图如图1所示，被检物体AB放在物镜（O1）下方的1—2倍焦距之间，则在物镜（O1）后形成一个倒立的放大实像A1B1，这个实像正好位于目镜（O2）的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛的明视距离处，即25cm,使所看到的物体最清晰，也就是说虚像A2B2是在眼球晶状体的两倍焦距之外，通过眼球后在视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3。

[实验器材]擦镜纸 字母装片 羊毛交叉擦片 普通光学显微镜 二甲苯 香柏油 三 内容与方法：

普通光学显微镜(Microscope)的外形和结构因类型不同略有差异，但基本结构和功能是相似的。（图2） （一） 1.

微镜的基本结构及功能：光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分构成。 机械部分：

（1）镜座：位于底部的金属座。一般为马蹄形，用以支持和稳定整个镜体。 （2）镜柱：镜座与镜臂相连的短柱。

（3）镜臂：镜柱上方弯曲部分

实验一 线粒体和液泡系的超活染色

[实验目的]

1、学习一些细胞的超活染色技术。

2、通过超活染色观察活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。 [实验原理]

活体染色是指对生活有机体的细胞或 的某些结构组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是显示生活细胞内的某些结构。而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。

但不是任何染料皆可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总是要配成稀淡的溶液来使用。一般是以碱性染料最为适用，可能因为它们具有溶解在类脂质（如卵磷脂、胆固醇等）的特性，易于被细胞吸收。站那思虑B和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。 [仪器、材料与试剂]

1、仪器：显微镜、恒温水浴锅

2、材料：洋葱鳞茎内表皮细胞、黄豆幼根根尖、载玻片、盖玻片、10ml量筒、吸管、吸水纸

黄豆幼根根尖培养方法：将黄豆种子用温水泡胀后，培养在培养皿内多层润湿的滤纸上（水稍淹住黄豆为宜），30℃使其发芽，3~4天后，胚根伸长到1cm以上。 3、试剂：

⑴ Ringe

实验一 线粒体和液泡系的超活染色

[实验目的]

1、学习一些细胞的超活染色技术。

2、通过超活染色观察活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布。 [实验原理]

活体染色是指对生活有机体的细胞或 的某些结构组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是显示生活细胞内的某些结构。而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。

但不是任何染料皆可以作为活体染色剂之用，应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，而且总是要配成稀淡的溶液来使用。一般是以碱性染料最为适用，可能因为它们具有溶解在类脂质（如卵磷脂、胆固醇等）的特性，易于被细胞吸收。站那思虑B和中性红两种碱性染料是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色各有专一性。 [仪器、材料与试剂]

1、仪器：显微镜、恒温水浴锅

2、材料：洋葱鳞茎内表皮细胞、黄豆幼根根尖、载玻片、盖玻片、10ml量筒、吸管、吸水纸

黄豆幼根根尖培养方法：将黄豆种子用温水泡胀后，培养在培养皿内多层润湿的滤纸上（水稍淹住黄豆为宜），30℃使其发芽，3~4天后，胚根伸长到1cm以上。 3、试剂：

⑴ Ringe